Справочник врача 21

Поиск по медицинской литературе


Биопроба




Рис. П.7. Ингибиторный иммуноанализ. 1 — антиген, иммобилизованный на твердой фазе; 2 — биопроба с антигеном; 3 — меченые антитела. Антиген из биопробы конкурирует с антигеном на твердой фазе за растворимые меченые антитела. В итоге результат реакции на твердой фазе обратно пропорционален концентрации определяемого вещества в пробе. Сэндвич-ИФА (рис. П.8). Сэндвич-ИФА разработан для антигенов, на которых есть не менее двух неперекрывающихся эпитопов. Против обоих эпитопов получают в качестве реагентов специфичные антитела. Антитела к одному из эпитопов сорбируют на твердой фазе. Испытуемую пробу добавляют к твердой фазе, инкубируют, отмывают. После отмывки вносят конъюгат антител ко второму эпитопу с ферментом. Ферментативная активность, остающаяся на твердой фазе, прямо пропорциональна содержанию антигена в пробе. Сэндвич-ИФА не требует препаратов очищенных антигенов, что выгодно отличает его от конкурентных и ингибиторных методик, поскольку чистые антигены всегда дороги. Чувствительность сэндвичИФА потенциально выше, чем конкурентных и ингибиторных. Аналогичная технология применима и с использованием одного антитела (и на твердой фазе, и в составе конъюгата с ферментом) в случаях наличия на целевом антигене повторяющихся эпитопов. В современных модификациях ту же технологию называют ловушечным ИФА (capture IA) — антитела на твердой фазе ловят свой антиген из смеси веществ в биопробе. Иммунометрические анализы (рис. П.9). При иммунометрических анализах к испытуемой пробе, предположительно содержащей определяемый антиген, в пробирку добавляют заведомый избыток... [стр. 381 ⇒]

Рис. П.9. Иммунометрический анализ. 1 — пробирка с биопробой; 2 — в пробирку с биопробой вносят заведомый избыток антигена, сорбированного на мелкодисперсном твердофазном носителе; 3 — затем в ту же пробирку вносят заведомый избыток меченых антител; 4 — материал инкубируют, центрифугируют и в супериатанте определяют количество метки. Результат реакции в супернатанте прямо пропорционален содержанию антигена в испытуемой пробе. Иммунометрические анализы наиболее чувствительны по сравнению со всеми другими вариантами иммуноанализов. [стр. 382 ⇒]

У собак и кошек болезнь протекает бессимптомно и может быть обнаружена при серологическом исследовании. Патологоанатомические признаки. Картина вскрытия при бруцеллезе нехарактерная. У абортировавших животных плодные оболочки набухшие, покрыты хлопьями фибрина и гноя. Возможны признаки гнойно-катарального мастита, у самцов — гнойнонекротических орхитов. У абортированных плодов находят отеки подкожной клетчатки и пупочного канатика, а также катаральное воспаление слизистых оболочек желудочнокишечного тракта, легких, некротические участки в печени. Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз на бруцеллез устанавливают комплексно на основании анализа эпизоотологических данных, клинических признаков, лабораторных и аллергических (у свиней) исследований. Из эпизоотологических данных учитывают благополучие местности по бруцеллезу, факты приобретения животных из других хозяйств. При клиническом обследовании животных обращают внимание на наличие абортов, задержание последов, эндометритов, а у самцов — бурситов, орхитов. Для бактериологического исследования в лабораторию посылают патологический материал (плод с плацентой, содержимое бурс, кусочки паренхиматозных органов, кровь, молоко и др.) свежий или консервированный. Одновременно в лабораторию направляют для серологического исследования молоко, сыворотку крови или кровь от абортировавшего или убитого с диагностической целью животного. Бактериологическая диагностика бруцеллеза предусматривает бактериоскопию мазков из патологического материала и при необходимости постановку биопробы на морских свинках. Бактериоскопия мазков-отпечат-ков, окрашенных по Граму и специальными методами (по Козловскому, Шуляку—Шину), имеет ориентировочное значение. Выделение культуры бруцелл при посеве биоматериала на специальные питательные среды и положительная биопроба на морских свинках имеют решающее значение при постановке бактериологического диагноза на бруцеллез. Для массовых профилактических и диагностических прижизненных исследований скота на бруцеллез широко используют РА, РСК, РДСК, РДП и РИД. Применяют также РБП (роз-бенгал проба) и кольцевую реакцию (КР) с молоком коров. Все указанные реакции используют в серологической диагностике бруцеллеза у крупного рогатого скота, яков, зебу, буйволов. Сыворотки крови животных благополучных хозяйств, дающие положительную РБП, сразу же исследуют в РА и РСК для установления титра агглютининов и наличия комплементсвязывающих антител. Кольцевая реакция (КР) с молоком применяется для контроля за благополучием стада по бруцеллезу, положительные результаты необходимо перепроверять по РА, РСК, РДСК. У мелкого рогатого скота, лошадей, верблюдов, оленей используют РА, РСК/РДСК, РБП, а у свиней — аллергический метод. У собак и животных других видов используют РА и РСК. Аллергический метод исследования используется у свиней, и наибольшую диагностическую ценность он имеет на поздних стадиях развития болезни. Для аллергических исследований применяют бруцеллин ВИЭВ. Диагноз на бруцеллез считают установленным: 1) при выделении культуры бруцелл из биоматериала; 2) при положительной биопробе; 3) при положительных результатах серологических исследований невакциниро-ванных животных в следующих показателях: для крупного рогатого скота (буйволов, яков, зебу), верблюдов и лошадей — РА с наличием антител 200 МЕ/мл и выше, а также при положительных результатах в РИД; для овец и коз — РА 100 МЕ/мл и выше; для оленей (маралов) и собак — РА 50 МЕ/мл и выше; для всех видов животных РСК в разведении сыворотки 1:5 и выше. При выявлении среди крупного рогатого скота (буйволов, яков, зебу), верблюдов и лошадей, реагирующих только в РА с содержанием антител 50... 100 МЕ/мл, а среди овец, коз, оленей (маралов) — 25... 50 МЕ/мл, их обследуют повторно через 15... 30 дней; 4) свиней... [стр. 25 ⇒]

При биопробе выделенной культурой, суспензией из кусочков органов и лимфатических узлов заражают морских свинок или белых мышей и в случае необходимости исследуют материал в реакции преципитации. У экспериментально зараженных при биопробе морских свинок (гибель которых отмечают через 2...3 сут) патогномоничными изменениями считают воспаление и образование язв в месте введения биоматериала (или культуры возбудителя), нагноение регионарных лимфатических узлов, увеличение селезенки и печени, узелковые и очаговые поражения в легких. Белые мыши погибают на 3...4-Й день после заражения. Диагностическими признаками у них являются глинистый цвет печени, увеличение селезенки с узелками серо-белого цвета. По результатам лабораторных исследований диагноз считается установленным: при выделении культуры F. tularensis из присланного патологического материала; при положительной биопробе с характерными для туляремии изменениями в органах и последующим выделением из них чистой культуры. При дифференциальной диагностике туляремию следует отличать от анаплазмоза, псевдотуберкулеза, туберкулеза, парату-беркулеза, бруцеллеза и кокцидиоза (эймериоза) путем проведения бактериологических, серологических и аллергических исследований. Иммунитет, специфическая профилактика. После переболевания у животного вырабатывается напряженный иммунитет. В крови животных-ре-конвалесцентов обнаруживают антитела, возникает сенсибилизация организма. Предложенная для иммунизации людей против туляремии живая вакцина при введении животным оказалась слабоиммуногенной, поэтому вакцинацию животных не проводят. Профилактика. В системе профилактических мероприятий одно из первых мест занимают меры по обезвреживанию источника возбудителя инфекции, факторов передачи и переносчиков возбудителя. Снижению численности иксодовых клещей способствуют изменение сроков (позднее начало) весеннего выпаса скота, сокращение площади естественных лугов, выпас скота на искусственных и культурных пастбищах, плановые или экстренные обработки заклещеванного скота. Снижение численности грызунов достигается прессованием сена и соломы в тюки; качественной обработкой стогов сена и ометов соломы аммиаком, перевозкой кормов сразу после уборки урожая в хорошо оборудованные хранилища, в которые не могут проникнуть грызуны. Не рекомендуется устанавливать стога сена и ометы соломы по краям оврагов или опушкам леса. Лечение. Специфические средства лечения не разработаны. Больным животным применяют антибиотики (стрептомицин, левомицетин, дигидрострептомицин, олететрин, тетрациклин, хлортетрациклин), сульфаниламидные и нитрофурановые препараты. Меры борьбы. Больных животных изолируют и лечат. Убой больных и подозрительных по заболеванию животных на мясо, а также снятие с них шкур запрещены. В случае убоя больных животных туши вместе с органами и шкурой уничтожают. Продукты убоя, полученные от здоровых животных неблагополучного стада и загрязненные пометом грызунов, зачищают и направляют на изготовление вареных колбасных изделий (на местном предприятии). Проводят систематическое уничтожение мышевидных грызунов и эктопаразитов, дезинфекцию помещений, водоисточников, загрязненных возбудителем. Для дезинфекции используют 5...10%-ные растворы лизола, 3...5%-ный раствор фенола, 5%-ные растворы хлорамина Б или ХБ, формальдегида и др. Вывоз животных из неблагополучных хозяйств разрешается после исследования сывороток крови в реакции агглютинации и обработки против пастбищных клещей. Меры по охране здоровья людей. Мероприятия по профилактике заболеваний людей на территории эпизоотического очага в соответствии с санитарными правилами предусматривают эпизоотолого-эпидемиологичес-кое обследование очага; порядок... [стр. 60 ⇒]

..3 нед. При хроническом течении на коже образуются язвы с неровными краями, развивается кахексия. У лошадей, крупного рогатого скота и буйволов болезнь протекает доброкачественно, на месте проникновения возбудителя образуется флегмона, наблюдаются кратковременная лихорадка и гнойное выделение из носа, реже сепсис, абсцессы во внутренних органах. У овец и коз отмечают кашель, истечение из носа, а также полиартрит, нагноение предлопаточных лимфатических узлов, реже симптомы со стороны нервной системы. У свиней поражаются заглоточные лимфатические узлы, а также развиваются абсцессы во внутренних органах. Патологоанатомические признаки. Трупы павших животных обычно истощены. При вскрытии во внутренних органах обнаруживают характерные для мелиоидоза казеозные очаги. Печень, селезенка, почки, регионарные лимфатические узлы увеличены, на разрезе усеяны многочисленными узелками и абсцессами желтоватого цвета разной формы и величины. Аналогичные изменения могут наблюдаться в легких, подкожной клетчатке, мышцах, костях, а также в стенках мочевого и желчного пузырей. На слизистой оболочке кишечника обнаруживают множество язв. Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз устанавливают на основании анализа эпизоотологических, клинических и патологоана-томических данных с обязательным проведением лабораторных исследований (бактериологических и биопробы). При бактериологическом исследовании выделяют и идентифицируют культуру возбудителя. Из лабораторных животных к возбудителю восприимчивы морские свинки, кролики, белые крысы и мыши. Биопробу проводят на морских свинках. При наличии в патматериале возбудителя мелиоидоза на месте инъекции суспензии развивается флегмозное воспаление, через 2...3 дня — некроз тканей с образованием язвы и нагноением регионарных лимфатических узлов. Через 15...21 день морские свинки погибают. При хроническом течении болезни за рубежом применяют внутрикожную аллергическую пробу. Мелиоидоз необходимо дифференцировать от сапа, эпизоотического лимфангита, стафилококкоза, стрептококкоза путем проведения бактериологических, серологических и аллергических (маллеинизация) исследований. Иммунитет, специфическая профилактика. Иммунитет изучен недостаточно. Известно, что в крови больных животных обнаруживаются антитела, а в процессе переболевания развивается аллергическое состояние (ГЧЗТ). В США создана вакцина для иммунизации животных и человека. В других странах специфическая профилактика и терапия не разработаны. Профилактика. Для предупреждения мелиоидоза в неблагополучных странах и регионах необходимо вести систематическую борьбу с грызунами, служащими основными резервуарами возбудителя в природе, и проводить диагностику при подозрительных случаях. Лечение. Лечение больных животных нецелесообразно. Меры борьбы. Больных животных убивают, соблюдая меры личной профилактики, трупы сжигают. При подозрении на мелиоидоз убой животных на мясо запрещен. В неблагополучных хозяйствах проводят дезинфекцию, дезинсекцию и дератизацию. О появлении болезни ставят в известность медицинскую службу. Меры по охране здоровья людей при мелиоидозе. Источником заражения человека и резервуаром возбудителя в природе служат дикие грызуны и восприимчивые к болезни домашние животные. Возбудитель передается через пищевые продукты и воду, загрязненные выделениями больных ме-лиоидозом животных, а также воздушнокапельным путем. Переносчики возбудителя — крысиные блохи и москиты. Заражение происходит через поврежденную кожу, алиментарно и аэрогенно. Различают септическую, септикопиемическую и локальную формы болезни. Чаще всего поражаются легкие, почки, печень, мочевой пузырь. Появляются кожные высыпания, желтуха, и... [стр. 62 ⇒]

Патологоанатомические признаки. Они зависят от места локализации очага инфекции. Трупы в большинстве вздуты и быстро разлагаются. Наиболее характерные изменения локализуются в пораженных органах или участках тела. Соединительная ткань в области отека пропитана желтой и красноватой жидкостью, иногда гемолизированнои, содержащей пузырьки газа, издающей прогорклый или гнилостный запах. Вид пораженных мышц и количество газа в соединительной ткани зависят от вида возбудителя. При гибели животных в результате заражения С. novyi обнаруживается студенистый бесцветный или кремового оттенка отек. Поражения при инфицировании С. histolyticum весьма характерны: распад всех тканей от кожи до костей, кровянистый, с частицами некро-тизированных тканей экссудат. Мышцы окрашены в темно-коричневый цвет, легко разрываются, мягкие, сочные, плохо режутся. Если воспалительный процесс вызван С. septicum, мышцы красного цвета; если С. perfringens — мышцы как будто вареные, зеленоватого оттенка, с большим количеством пузырьков газа; если С. novyi или С. sordellii — мышцы студенистые, отек гелеобразный. При смешанной инфекции с наличием гнилостных аэробов или анаэробов пораженная ткань имеет серый, бурый и синеватый цвет. Кровь в сосудах трупа свернувшаяся, в грудной и брюшной полостях содержится кровянистый экссудат. Изменения внутренних органов нетипичны. Диагностика и дифференциальная диагностика. Материалом для исследования служат тканевый экссудат, кусочки пораженных мышц, паренхиматозные органы, а от трупов овец, кроме того, часть сычуга и тонкого отдела кишечника с содержимым (для одновременного исследования на брадзот и энтеротоксемию). Диагноз устанавливают на основании анамнестических данных, клинических и патологоанатомических показателей и результатов лабораторных исследований. При исследовании материала проводят микроскопию мазков, бактериологическое исследование, биопробу на лабораторных животных (морских свинках) и реакцию нейтрализации со специфическими сыворотками для определения вида возбудителей. Диагноз считается установленным: 1) при выделении культуры с характерными свойствами, положительной биопробе с типичной картиной и выделением чистой культуры; 2) при положительной биопробе из исходного патматериала с характерной картиной патологических изменений и выделением чистой культуры. При дифференциальной диагностике злокачественного отека необходимо исключить карбункулярную форму сибирской язвы и эмфизематозный карбункул крупного рогатого скота. Иммунитет, специфическая профилактика. Иммунитет при злокачественном отеке антитоксический. В связи с тем что злокачественный отек — это болезнь полимикробной этиологии и возникает спорадически, средства его активной профилактики в плановом порядке не используют. Однако полианатоксин против клостридиозов овец и поливалентная вакцина против брадзота, энтеротоксемии, злокачественного отека и дизентерии ягнят могут быть успешно использованы. Профилактика. Меры профилактики при злокачественном отеке животных сводятся в основном к соблюдению строгой асептики при операциях и своевременному лечению ран. Для профилактики родильного злокачественного отека необходимо соблюдение санитарно-гигиенических условий при отелах. При тяжелых родах с повреждением слизистых оболочек и прилегающих к ним тканей родовых путей рекомендуется орошение их дезинфицирующими растворами. Большое значение имеет соблюдение санитарно-гигиенических условий при родах и оказании акушерской помощи. В стационарно неблагополучных зонах рекомендуется перед массовыми обработками поголовья, родами, связанными с возможностью травмирования, вводить животным поливалентную антитоксическую сыворотку в сочетании с антибиотиками. [стр. 88 ⇒]

Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз на эмфизематозный карбункул устанавливают на основании эпизоотологических данных, симптомокомплекса болезни с учетом патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований (микроскопии мазков-отпечатков, бактериологического исследования и биопробы на морских свинках). Трупы во избежание распространения возбудителя болезни вскрывать не рекомендуется. Поэтому кусочки мышц отбирают без полного вскрытия трупа. Если труп случайно вскрыт, берут кусочки паренхиматозных органов, подкожной клетчатки, отечный экссудат, кровь. При пересылке лучше использовать хорошо высушенные мышцы. Окончательный диагноз устанавливают при выделении культуры возбудителя из патматериала и гибели морской свинки после заражения ее полученной культурой и наличии типичной патологоанатомической картины или положительной биопробе с характерной патологоанатомической картиной и выделением культуры. При дифференциальной диагностике необходимо прежде всего исключать сибирскую язву и злокачественный отек. Иммунитет, специфическая профилактика. После переболевания формируется напряженный иммунитет. Животные старше 4 лет невосприимчивы к эмкару, они приобретают иммунитет вследствие иммунизирующей субинфекции. Высокой иммунной активностью обладают концентрированная гидро-окисьалюминиевая формолвакцина против эмкара (иммунитет сохраняется в течение 6...7 мес) и живая вакцина (иммунитет продолжительностью до 1 года и более). Используется также ассоциированная живая вакцина против сибирской язвы и эмкара. Профилактика. Чтобы не допустить появления эмкара, необходимо проводить комплекс ветеринарно-санитарных мероприятий. Всех вновь поступивших в хозяйство животных выдерживают в профилактическом карантине. Основным мероприятием в профилактике болезни является активная иммунизация всего восприимчивого поголовья, находящегося в неблагополучных местностях. Ежегодно проводят однократную или двукратную (в зависимости от пастбищного периода и применяемой вакцины) профилактическую вакцинацию животных в возрасте от 3 мес до 4 лет. Лечение. Поскольку течение болезни, как правило, острое, лечение животных не всегда осуществимо. В начале болезни эффективны антибиотики: хлортетрациклин, дибиомицин, ампициллин, бициллин. В толщу воспалительного отека и вокруг него целесообразно инъецировать 1... 2%-ный раствор пероксида водорода, 3...5%-ный раствор карболовой кислоты, 3...5%-ный раствор лизола или фенола, 0,1%-ный раствор калия перманганата. Применяют симптоматическое лечение. Целесообразность хирургической обработки сомнительна. Меры борьбы. В случае возникновения болезни хозяйство (ферму) объявляют неблагополучным по эмкару и накладывают карантин. По условиям карантина запрещают: вывоз и вывод, а также ввоз в карантинную зону крупного рогатого скота и овец и перегон их через карантинную территорию; продажу, обмен и внутрихозяйственную перегруппировку крупного рогатого скота и овец; вывоз сена и других кормов, собранных на карантинированной территории. В очаге инфекции всех восприимчивых к болезни животных подвергают клиническому осмотру и термометрии. Подозреваемых в заболевании, животных изолируют и лечат, а остальных прививают независимо от сроков предыдущей вакцинации. В случае падежа трупы сжигают или помещают в биотермическую яму. Убой на мясо больного и подозрительного по заболеванию скота запрещается. Животных, переболевших эмфизематозным карбункулом, разрешается убивать на мясо не ранее чем через 30 дней со дня исчезновения клинических признаков болезни (хромота, отеки, крепитация). Молоко от иммунизированных коров используют без ограничений. Навоз, подстилку и остатки корма, загрязненные выделениями больных животных, перед удалением увлажняют 10%ным горячим раствором гидроксида натрия, а затем сжигают. [стр. 96 ⇒]

Патологоанатомические признаки. Патологоанатомические изменения наблюдаются только в тканях пораженных копыт, во внутренних органах и тканях они отсутствуют. Из общих признаков отмечают лишь истощение хронически больных животных. Диагностика и дифференциальная диагностика. Первичный диагноз на копытную гниль устанавливают на основании эпизоотологических данных и клинических признаков. В стационарно неблагополучных хозяйствах диагностику проводят по клиническим признакам болезни с учетом эпизоотологических данных. Окончательный диагноз подтверждается результатами лабораторных исследований. Патологическим материалом для лабораторных исследований служат пораженные копыта от вынужденно убитых животных или пораженные ткани и соскобы, взятые из мест поражений — межкопытной щели и копыт. В лаборатории проводят бактериоскопическое исследование (обнаруживают феномен Бевериджа), люминесцентную диагностику (непрят мой метод РИФ) и при необходимости биопробу на овцах (в затруднительных случаях) путем заражения их в кожу межкопытной щели. Бактериологическую диагностику копытной гнили (выделение культуры возбудителя) и серологические исследования не проводят. Диагноз на копытную гниль считают установленным: 1) при обнаружении возбудителя методом бактериоскопии в патологическом материале; 2) положительном результате РИФ; 3) положительной биопробе на овцах. При дифференциальной диагностике в первую очередь необходимо исключить некробактериоз. Для этого в лабораториях проводят заражение патологическим материалом белых мышей или кроликов. Основные дифференциальные признаки копытной гнили и некро-бактериоза представлены в таблице 1.12. 1.12. Схема дифференциальной диагностики копытной гнили и некробактериоза у овец Показатель... [стр. 133 ⇒]

), гистологических и аллергических исследований. В лабораторию для серологического исследования посылают сыворотку крови. Для бактериологического (биологического) исследования от павших или убитых животных направляют: 1) при остром течении — выпот из междольчатой соединительной ткани легкого, плевральный выпот (взятый стерильно). Одновременно посылают кусочки пораженного легкого размером 4x5 см, консервированные глицерином; 2) при хроническом течении — кусочки секвестров, не подвергшихся полному распаду (некрозу). Во всех случаях необходимо посылать средостенные лимфатические узлы (избегая надрезов). Для гистологического исследования направляют зафиксированные патологически измененные легкие или часть их. При отсутствии четких патологоанатомических изменений рекомендуется ставить биопробу на 2...3 здоровых телятах из заведомо благополучных хозяйств. Экспериментальная КПП у молодняка характеризуется системным серозно-фибринозным воспалением суставов конечностей, студенистыми инфильтратами в подкожной клетчатке подгрудка, межчелюстного пространства и в области суставов; фибринозным плевритом в разных стадиях развития, серозным воспалением регионарных лимфатических узлов; зернистой дистрофией почек, реже — гломеруло-нефритом. КПП крупного рогатого скота считается установленной, если клинический диагноз подтвержден обнаружением специфических патолого-анатомических изменений (независимо от стадии процесса), а в сомнительных случаях — результатами дополнительных бактериологических (включая биопробу), серологических и аллергических исследований всего стада. Контагиозную плевропневмонию следует дифференцировать от пастереллеза (особенно его легочной формы), туберкулеза, чумы крупного рогатого скота, парагриппа-3, эхинококкоза, легочных гель-минтозов, катаральной и крупозной пневмоний незаразного происхождения, травматического перикардита, для чего проводят комплексные исследования. Иммунитет, специфическая профилактика. Природа иммунитета выяснена недостаточно. Переболевшие КПП животные приобретают напряженный иммунитет продолжительностью свыше 2 лет. Для создания активного иммунитета в странах, где в настоящее время все еще имеет место контагиозная плевропневмония, широко проводят прививки вакцинами из живых ослабленных возбудителей (авианизиро-ванные, аттенуированные или природно ослабленные штаммы). Применяют также ассоциированные вакцины против чумы и КПП крупного рогатого скота. Профилактика. Россия благополучна по КПП, поэтому основное внимание ветеринарной службы сосредоточено на предотвращении заноса возбудителя болезни на территорию нашей страны из-за рубежа. Чтобы избежать заноса инфекции в благополучные регионы, закупку скота проводят только из благополучных стран и областей или регионов, в которых за последние 6 мес не было зарегистрировано ни одного случая заболевания КПП. Результаты двукратного с интервалом 2 мес серологического исследования (РСК) животных перед закупкой должны быть отрицательными. Лечение. Лечение проводят преимущественно для смягчения тяжелых поствакцинальных реакций. Наряду с физиотерапевтическими средствами и оперативным вмешательством животным, имеющим поствакциналь-ные осложнения, внутривенно вводят 10%-ный раствор неосальварсана, внутривенно или подкожно — сульфамезатен-натрий, внутримышечно — бронхоциллин, тилозин, хлорамфеникол или спирамицин. Меры борьбы. Успех борьбы с болезнью зависит от длительности и степени ее распространения, своевременного и точного распознавания диагноза, строгого... [стр. 197 ⇒]

Печень поражается редко. Почки приобретают бугристую поверхность с очагами некроза. Сердце увеличено, на эпикарде точечные кровоизлияния. Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз на инфекционную агалактию овец и коз устанавливают на основании эпизоотологичес-ких, клинических, патологоанатомических данных с обязательным подтверждением наличия возбудителя. В необходимых случаях диагноз уточняют серологическими исследованиями и биопробой. Для бактериологического исследования в лабораторию направляют от больных животных свежие пробы крови, молока (секрета молочной железы), синовиальной (суставной) жидкости и конъюнктивальный секрет, а от павших или вынужденно убитых — кровь, лимфатические узлы, спинномозговую жидкость, паренхиматозные органы, головной мозг, абортированные плоды. Для серологической диагностики разработаны РДП и РСК. Биологическую пробу проводят на лактирующих овцах и козах, ягнятах и козлятах, а также кроликах. Искусственное заражение овец и коз выполняют введением патологического материала или культур в сосок вымени, молочную цистерну, подкожно, в плевру, внутривенно, внутрикожно и в область суставов. Кроликов заражают в переднюю камеру глаза. Диагноз считается установленным: 1) при выделении из патматериала культуры со свойствами, характерными для возбудителя данного заболевания; 2) при положительной биопробе на кроликах, овцах или козах с последующим выделением культуры со свойствами, характерными для данного возбудителя, даже если в посевах из исходного материала культуры возбудителя не выделено. Инфекционную агалактию следует дифференцировать от маститов и сходных болезней другой этиологии (инфекционный мастит, пиосептицемия, рожистая септицемия, рожистый и стафилококковый полиартриты ягнят, риккетсиозный или хламидиозный кератоконъюнкти-вит; болезни, вызываемые другими микоплазмами). Нужно иметь в виду также и вторичную инфекцию, поскольку болезнь довольно часто осложняется условно-патогенной микрофлорой. Иммунитет, специфическая профилактика. У переболевших животных в целом устанавливается стабильный иммунитет, но иногда козы заболевают повторно. Предложено и апробировано большое число инактивиро-ванных и живых аттенуированных вакцин, однако надежной специфической защиты они не создают. Профилактика. Для предупреждения инфекционной агалактии в благополучных хозяйствах необходимо выполнять комплекс организационно-хозяйственных, санитарногигиенических и ветеринарных мероприятий. Запрещается вводить животных из неблагополучных пунктов. Все поступающие в хозяйство овцы и козы подлежат профилактическому каран-тинированию и тщательному клиническому исследованию. Не допускают контакта на пастбищах и водопоях, а также совместного передвижения (по одному маршруту) животных различных отар и хозяйств на летние и зимние пастбища или на убой. Лечение. Специфическое лечение не разработано. Сыворотки крови переболевших и гипериммунизированных животных обладают слабым лечебным эффектом. Общее лечение издавна проводили пенициллином, новарсенолом с уротропином (гексаметилентетрамин) или водным раствором йода. Рекомендованы также дибиомицин (выздоравливало более 90% больных животных), дитетрациклин, новарсенолбензол, тилозин, стрептомицин и спиромицин. Больных животных с поражением глаз рекомендуется содержать в затемненных местах и промывать глаза 1%-ным водным раствором борной кислоты, альбуцида или пенициллина на физиологическом растворе. При маститах рекомендуется применение водного раствора йода и йодида калия или пенициллина путем введения его в полость вымени через соски 3 раза в день. При воспалении суставов в самом начале заболевания рекомендуется вводить раствор Люголя или свежеприготовленный 1%-ный раствор химически чистого сульфата меди под кожу, в область пораженного сустава. [стр. 205 ⇒]

В это время эпидермис легко отделяется в виде пленки (пелликула, кожица). Иногда появляется очень много папул, в этом случае они сливаются. Везикулы и пустулы обычно не образуются. В пораженных участках кожи под струпом формируются соединительнотканные рубцы, которые в зависимости от степени повреждения ткани слабо зарастают или совсем не покрываются волосом. Струп отпадает через 5...6 дней. Если оспенный процесс осложнился, на передний план выступают признаки секундарных инфекций, сопровождающихся поражениями дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта. При тяжелом течении оспы экзантема покрывает большие участки кожи: отдельные папулы, сливаясь между собой, образуют сплошные поражения значительных участков кожи, подвергающихся гнойному воспалению. Болезнь сопровождается значительным повышением температуры тела, особенно в период нагноения, и ухудшением общего состояния животного. Эту форму оспы называют сливной. Чаще сливную форму оспы наблюдают у ягнят. Погибает 50...80 % заболевших особей (молодняк), чаще от сепсиса. 287При легком и абортивном течении оспы на теле животных появляется небольшое число оспин, температура тела повышается незначительно, и оспины, не претерпев всех стадий формирования, могут быстро исчезать. Патологоанатомические признаки. Помимо характерных изменений на коже и слизистых оболочках ротовой полости обнаруживают геморрагическое воспаление слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и дыхательных путей. В глотке и трахее находят эрозии и язвы. Отмечают увеличение всех поверхностных и регионарных лимфатических узлов. Наблюдают кровоизлияния на серозных покровах; в легких — очаги ге-патизации. В срезах папул, окрашенных по Пашену и Романовскому, выявляют элементарные частицы вируса — вирионы возбудителя болезни. Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз на оспу ставят на основании анализа эпизоотологических, клинических, патологоанато-мических данных и результатов лабораторных исследований, включая биопробу. При оценке эпизоотологических данных необходимо учитывать, что из домашних животных болезнь поражает только овец независимо от возраста и породы, а из диких — сайгаков и козерогов. Для подтверждения диагноза на оспу необходимо взять биоматериал — участок пораженной кожи, имеющий свежие папулы, пораженные легкие и лимфатические узлы. При гистологическом исследовании в пораженных участках кожи находят серозноклеточный экссудат, в котором преобладают лимфоциты, макрофаги со специфическими включениями, а также гранулоциты. Деструктивные изменения наиболее сильно выражены в подэпидермальном слое, граница между дермой и эпидермисом неразличима. При окрашивании специальными методами выявляют внутриклеточные включения Пашена. При абортивном течении болезни ставят биопробу на овцах. Для этого исследуемый материал вводят в кожу подхвостовой складки. При дифференциальной диагностике необходимо исключить экзему, грибной дерматит, чесотку и контагиозный пустулезный дерматит. Иммунитет, специфическая профилактика. Переболевшие животные приобретают иммунитет не менее чем на 2 года. Для специфической профилактики оспы овец применяют культуральную вирус-вакцину из атте-нуированного штамма НИСХИ, которая создает у привитых животных иммунитет длительностью до 12мес. Профилактика. Для предупреждения возникновения оспы овец необходимо: 1) не допускать ввода (ввоза) в хозяйство овец, а также кормов и инвентаря из хозяйств, неблагополучных по оспе овец; 2) всех вновь поступивших в хозяйство овец содержать изолированно в течение 30 дней; 3) поддерживать в надлежащем ветеринарно-санитарном состоянии пастбища, места поения, животноводческие помещения; 4) овцепоголовье... [стр. 233 ⇒]

Эти поражения, а также некротические изменения в легких чаще всего обусловлены вторичной микрофлорой, в том числе возбудителем некробактериоза. При гистологическом исследовании срезов, окрашенных по Романовскому—Гимзе, в эпителии кожи и слизистой оболочки рта выявляют элементарные тельца вируса. Их обнаруживают регулярно, начиная с 3-го по 12-й день после экспериментального заражения. Вирионы имеют вид темно-синих шариков, локализующихся в цитоплазме клеток верхних и средних слоев эпидермиса. Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз ставят на основании клиникоэпизоотологических данных, результатов лабораторных исследований, включая биопробу. Симптомы болезни обычно типичны и одновременно регистрируются у многих животных. Нередко их бывает достаточно для того, чтобы поставить предварительный диагноз, который во всех случаях должен быть подтвержден лабораторными исследованиями. Из лабораторных методов диагностики проводят: микроскопическое исследование мазков, гистологическое исследование пораженных участков кожи и слизистой оболочки. Для приготовления мазков берут материал от животных в начальной стадии заболевания. Мазки окрашивают по Морозову или Гимзе. Под микроскопом видны вирионы, располагающиеся группами, попарно или в виде рассеянных одиночных шариков. Биопробу ставят на ягнятах, не болевших контагиозным пустулезным дерматитом. Суспензию, приготовленную из клеток пораженных участков кожи, втирают в... [стр. 236 ⇒]

Течение и клиническое проявление. Инкубационный период длится от 24 ч до 2...5 сут (иногда до 12 сут). В начале болезни у животных повышается температура тела. Затем на слизистой оболочке ротовой полости появляются красноватые пятна — папулы размером от 2 до 20 мм, на месте которых обычно через 1 сут формируются красные пузыри (везикулы, афты) величиной от макового зерна до голубиного яйца. Последние быстро лопаются, обнажая ярко-красную эрозийную поверхность. Эрозии могут покрывать большую поверхность языка, десен, пятачка (у свиньи). Как правило, в течение 3...7 дней они эпителизируются, и животное выздоравливает. В период выраженных клинических признаков животные угнетены, температура тела повышается до 40...42 °С, появляются анорексия, жажда и сильная саливация. У коров часто поражаются соски, иногда развивается мастит. Везикулы могут образовываться на слизистой оболочке носовой полости, конъюнктиве, на коже носового зеркала, венчика и межко-пытной щели. При доброкачественном течении продолжительность болезни около 1...3 нед. Но переболевший молодняк, как правило, отстает в развитии от здоровых животных. Везикулярный стоматит редко заканчивается смертью. Более того, у большинства животных симптомы выражены слабо, и обычно больные выздоравливают. Часть животных стада может переболевать латентно, и их удается выявить лишь серологическим исследованием (РСК). Однако в ранее благополучных районах у телят и коров болезнь может закончиться летальным исходом (до 80 % случаев). Патологоанатомические признаки. При вскрытии выявляют местные поражения слизистых оболочек или кожи, патологоанатомически и гистологически не отличающиеся от ящурных при доброкачественном его 298течении. Если везикулярный стоматит осложняется вторичной бактериальной инфекцией, то в местах поражения скапливаются обильный экссудат и некротизированная ткань. Диагностика и дифференциальная диагностика. Везикулярный стоматит клинически и патологоанатомически достаточно трудно отличить от других трех везикулярных вирусных болезней животных: ящура, везикулярной экзантемы и везикулярной болезни свиней. Поэтому диагноз на ВС ставят на основании анализа эпизоотологических данных (болеют одно- и парнокопытные), клинических признаков (афтозное поражение) и результатов лабораторных исследований, позволяющих дифференцировать везикулярный стоматит от названных выше везикулярных болезней. При лабораторной дифференциальной диагностике выполняют биопробу на сельскохозяйственных животных различных видов (табл. 5.5) и используют соответствующие каждой болезни диагностические наборы и наставления по их применению. 5.5. Результаты биопробы при везикулярных вирусных болезнях Вид животного... [стр. 242 ⇒]

Гематологические исследования включают определение числа эритроцитов в 1 мкл крови, содержания гемоглобина и скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Для гистологического исследования готовят срезы и окрашивают их гематоксилином и эозином и по Перл су (для обнаружения гемосидерина). Наиболее характерные изменения в капиллярах и клетках печени и селезенки: скопление гистиоцитов, макрофагов, лимфоидных клеток и гемосидерина. В сомнительных случаях для проверки особо ценных лошадей ставят биопробу на жеребятах. Жеребят заражают сывороткой крови или плазмой, взятой от подозреваемых лошадей. За зараженными животными наблюдают 90 дней, через каждые 10...15 дней проводят гематологические и серологические (РДП) исследования. Биопробу считают положительной при наличии у зараженных жеребят характерных клинических признаков: рецидивирующей лихорадки, слабости, желтушности слизистых оболочек, и при... [стр. 337 ⇒]

Брыжеечные и мезентери-альные лимфатические узлы на разрезе сочные, с кровоизлияниями. Сосуды головного мозга инъецированы. В целом патологоанатомические изменения при чуме плотоядных весьма неспецифичны и варьируются в зависимости от интенсивности и длительности болезни. Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз устанавливают на основании анализа эпизоотической ситуации, клинических признаков болезни, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований. При постановке диагноза по клинической картине учитывают наличие следующих признаков: поражения респираторного тракта, диареи, катара слизистых оболочек глаз и носа, двухволнового подъема температуры тела, гиперкератоза подушечек лап, поражения центральной нервной системы, продолжительности болезни не менее 3 нед. Если у собаки отмечены любые четыре из перечисленных признаков, то есть основания предполагать у нее чуму плотоядных. На ранней стадии болезни чаще встречаются следующие пять признаков: кашель, фотофобия, повышение температуры тела до 39 °С и более при потере аппетита, нормальная температура при чрезмерном аппетите, симптомы поражения нервной системы. По любым двум из пяти перечисленных признаков можно подозревать чуму, а по трем ставить клинический диагноз. Наиболее характерные для чумы патологоанатомические изменения — точечные и полосчатые кровоизлияния на слизистых оболочках двенадцатиперстной и прямой кишки и мочевого пузыря. Однако повсеместное применение эффективных вакцин из аттенуиро-ванных штаммов вируса чумы вызвало изменение эпизоотической ситуации по этой инфекции и сделало редкостью классические клинические признаки и патологоанатомические изменения. В связи с этим возросла роль лабораторных методов исследования, особенно на ранних стадиях болезни. Лабораторная диагностика чумы плотоядных заключается главным образом в обнаружении возбудителя болезни путем выявления в патматери-але вирусных антигенов и генома, реже активного вируса, проведении биопробы, а также установлении нарастания титра специфических антител в парных сыворотках. В лабораторной практике диагностики чумы плотоядных нашли применение следующие методы: биопроба на восприимчивых животных, РСК, обнаружение телец-включений, РДП, реакция иммуноосмофоре-за, РПГА, РЗГА, РИФ, ИФА, выделение вируса чумы в культуре клеток. Серологическая диагностика применяется лишь в экспериментальных целях. При дифференциальной диагностике следует учитывать, что на отдельных стадиях развития болезни чума сходна с лептоспи-розом, инфекционным гепатитом, бешенством, болезнью Ауески, парво-вирусной инфекцией собак, сальмонеллезом, пироплазмозом и некоторыми гельминтозами. Иммунитет, специфическая профилактика. У собак-реконвалесцентов наступает продолжительный, практически пожизненный иммунитет, однако устойчивость переболевших животных к реинфекции неабсолютная. Специфическую иммунопрофилактику чумы плотоядных осуществляют с использованием живых и инактивированных моно- и ассоциирован434ных вакцин. В нашей стране производят моновалентные вакцины из атте-нуированных штаммов вируса «Вакчум», ЭПМ и 668-КФ. Многочисленные ассоциированные вакцины отечественного и зарубежного производства включают антигены вирусов чумы, аденовирусных инфекций, пар-во- и коронавирусных энтеритов, бешенства и бактериального компонента (как правило, двух серологических вариантов лептоспир (L. canicola и L. icterohaemorrhagiae) в различных сочетаниях. Продолжительность активного иммунитета не менее 1 года. [стр. 354 ⇒]

Она рыхлая, утолщенная и иногда с кровоизлияниями. В трахее заметно скопление слизи, перемешанной с кровью и казеозными массами, иногда содержатся сгустки крови (геморрагический трахеит). Слизистая оболочка на всем протяжении трахеи или чаще только в верхней трети ее отечная, гиперемированная, с точечными или полосчатыми кровоизлияниями. Казеозные пробки встречаются и в крупных бронхах. В легких видны очаги воспаления. Если птица погибла от закупорки трахеи казеозными пробками, обнаруживают признаки удушья, синюшность слизистых оболочек и венозный застой крови в легких. У некоторых павших кур слизистая оболочка тонкого отдела кишечника, клоаки и фабрициевой сумки в состоянии катаральногеморрагического воспаления. При конъюнктивальной форме слизистая оболочка глаз гиперемирова-на. Под третьим веком нередко находятся казеозные массы с неприятным запахом. Веки отечные, в тяжелых случаях казеозные массы обнаруживают в инфраорбитальных синусах. При панофтальмии поражены роговица и все глазное яблоко. Нередко обнаруживают риниты. Носовая полость 542заполнена серозным или серозно-слизистым экссудатом; слизистая оболочка гиперемированная и отечная. Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагностику проводят на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, пато-логоанатомических изменений и подтверждают результатами лабораторных исследований. Для вирусологического исследования от больных птиц берут экссудат из трахеи, от павших или вынужденно убитых в начальной фазе болезни — слизистые оболочки гортани, трахеи, конъюнктивы, носовых ходов и кусочки легких. Материал замораживают и сохраняют при —20 °С и ниже. Для гистологических исследований материал помещают в 10%-ный раствор нейтрального формалина. Суспензией патматериала заражают эмбрионы 9...12-дневного возраста. На 6...8-й день их убивают. Для выявления специфических поражений необходимо провести не менее трех пассажей, используя ХАО, суспензированную в аллантоисной жидкости предыдущего пассажа. Выделение вируса подтвердают обнаружением телец-включений Зейфрида, РН, РДП, биопробой, а также методом ИФА. Выделение вируса также возможно путем заражения культуры фибро-бластов эмбрионов кур. В качестве вспомогательных методов диагностики используют следующие: 1) гистологический — обнаружение вирусспецифических внутриядерных включений в эпителии слизистой оболочки; 2) люминесцентную микроскопию для обнаружения антигена в мазках-отпечатках, изготовленных из пораженной хорион-аллантоисной оболочки, культуры фибро-бластов эмбрионов кур; а также флуоресцирующих антител в мазках, приготовленных из слизи трахеи и конъюнктивы больной птицы; 3) реакцию нейтрализации с сыворотками от переболевшей птицы; 4) РДП с экссудатом из трахеи или антигеном из инфицированных хорион-аллантоисных оболочек и иммунной сывороткой; 5) биопробу на цыплятах 30...90-днев-ного возраста путем аппликации вируссодержащего материала на слизистую оболочку гортани, трахеи, глаз, носа, подглазничного синуса, клоаки. При инокуляции материала в подглазничный синус в положительных случаях развивается синусит с отеком, выделениями из носовых ходов и слезотечением. Положительная реакция на клоачную пробу проявляется с 3-го по 8-й день, но чаще на 4...5-й день и характеризуется отечностью слизистой оболочки фабрициевой сумки и катаральным, геморрагическим или фибринозным воспалением. При дифференциальной диагностике ИЛТ необходимо исключить оспу, инфекционный бронхит, заразный насморк, хронический пастереллез, респираторный микоплазмоз. [стр. 442 ⇒]

На 7...14-й день болезни на любой стадии яйцекладки отмечают снижение яйценоскости (которая восстанавливается к 21...28-му дню), снесение дефектных яиц, выводимость цыплят падает. Некоторые штаммы вируса могут в течение первых 2 нед болезни вызывать нефрозонефритный синдром — поражение почек и мочеточников с отложением уратов. В таких случаях у больных птиц обычно отмечают депрессию и диарею с примесью уратов. Течение болезни острое. В начале эпизоотии нередко наблюдают нечеткие признаки респираторного синдрома. При первичной циркуляции вируса в хозяйстве летальность птицы при этой форме болезни достигает 57...70 %. Патологоанатомические признаки. Внешние признаки у погибших цыплят и кур малохарактерны, иногда отмечают цианоз гребня, лицевой части черепа. У молодняка наблюдают гиперемию слизистых оболочек носа, трахеи и скопление серозного или серозно-слизистого экссудата. Легкие слегка увеличены в объеме, красного цвета, наполнены пенистой жидкостью. Воздухоносные мешки очагово или диффузно поражены; отмечают зернистую дистрофию почек и печени. У взрослой птицы яичник и яйцевод недоразвиты, яйцевые фолликулы атрофированы. В яйцеводе обнаруживают кисты, в оболочке яичника нередки кровоизлияния, печень застойно гиперемирована, края притуплены. При нефрозонефритном синдроме обнаруживают набухание и пестроту рисунка почек. Мочевые канальцы переполнены уратами, их находят и на серозных покровах внутренних органов. У павших куриных эмбрионов отмечаются серозная пневмония, нефроз, скопление уратов в аллантоисе, отечность и гиперемия плодовых оболочек. Характерным признаком считается на 6...9-й день «карликовость» эмбрионов. При осложнении колисептицемией, респираторным микоплазмозом на вскрытии обнаруживают аэросаккулит, перикардит, перигепатит. Диагностика и дифференциальная диагностика. На основании эпизоото-логических данных, клинических признаков и патоморфологических изменений можно поставить лишь предварительный диагноз на ИБК. Решающее значение имеет проведение лабораторных исследований, которые основываются на выделении и идентификации вируса, биопробе и обнаружении специфических антител в парных пробах сыворотки крови птиц. Для выделения и идентификации вируса патологическим материалом заражают 8... 10дневные куриные эмбрионы, которые обычно погибают на 5...7-м пассаже через 36...48 ч. Выделенный вирус идентифицируют при помощи специфических иммунных сывороток в РН, РНГА, РДП и РИФ. Одновременно с выделением вируса проводят экспериментальное воспроизведение болезни на цыплятах Ю...20-дневного возраста, полученных из благополучных по ИБК хозяйств. При положительной биопробе через 18...36 ч у цыплят развиваются клинические признаки болезни. Вируснейтрализующие антитела в основном накапливаются с 11-го по 36-й день и сохраняются в сыворотке крови цыплят в течение 483 дней. Антитела выявляют при помощи РНГА или РДП. При дифференциальной диагностике необходимо исключить инфекционный ларинготрахеит, болезнь Ньюкасла, оспу, грипп, инфекционную бурсальную болезнь, респираторный микоплаз-моз, гемофилез (табл. 8.4). 36-7753... [стр. 457 ⇒]

Комплексный метод диагностики инфекционных болезней Эпизоотологический; Клинический; Патоморфологический (картина вскрытия, гистологическое исследование)4 Вирусологический (люминесцентная микроскопия, биопроба, выделение вируса, серологические реакции); Бактериологический (выделение культуры, биопроба, микроскопия); Иммунологический (аллергические пробы: внутрикожная, глазная, подкожная; серологическое исследование: РА, РСК, РДСК, РП, кольцевая проба с молоком и др.); 7. Клинико-лабораторный (исследование морфологических и биохимических свойств крови, мочи, кала и др.). При постановке диагноза на любое инфекционное заболевание всегда пользуются этим методом. Эпизоотологический метод представляет собой систему изучения проявлений эпизоотического процесса. Устанавливают вид животного, возраст, пол, источник возбудителя инфекции, резервуар возбудителя, механизм передачи инфекции, ворота инфекции, интенсивность проявления эпизоотии, сезонность, периодичность, наличие предрасполагающих факторов, заболеваемость, смертность, летальность. Выясняют, проводилась ли вакцинация, какими вакцинами, в какие сроки, проводились ли диагностические исследования, встречались ли подобные заболевания ранее. 1. 2. 3. 4. 5. 6. [стр. 3 ⇒]

При гистологическом исследовании в воспаленных лимфатических узлах и в очагах некроза в печени и селезенке обнаруживаются скопления клеток пролиферирующего ретикулоэндотелия, полиморфных и полиморфноядерных лейкоцитов. В центре — сильно выраженный кариорексис. В сосудах и синусах — диффузная пролиферация ретикулоэндотелия и нередко тромбозы. Диагностика. На основании клинических признаков и патологоанатомической картины, особенно при нетипичном проявлении болезни у домашних кроликов, поставить диагноз весьма трудно. Диагноз ставят с учетом результатов бактериологического, серологического (РА, РП, РСК, РНГА, РН) и аллергического (внутрикожное введение тулярина) исследований. Бактериологическое исследование включает микроскопию мазковотпечатков из патологического материала, выделение и идентификацию чистой культуры возбудителя и заражение белых мышей или морских свинок суспензией из исследуемого материала. Идентификацию свежевыделенной культуры возбудителя туляремии проводят с учетом: морфологии бактерий, тинкториальных свойств, роста на свернутой желточной среде, отсутствия роста на обычных питательных средах, агглютинации специфической противотуляремийной сывороткой (выделенная культура должна агглютинироваться не менее чем до 2/3 титра диагностической агглютинирующей сыворотки) и способности выделенной культуры при биопробе вызвать гибель белых мышей и морских свинок с характерными для туляремии изменениями в органах с последующим выделением чистой культуры. У экспериментально зараженных при биопробе морских свинок (гибель через 2–3 сут) патогномоничными изменениями считают воспаление и образование язв в месте введения биоматериала (или культуры возбудителя), нагноение регионарных лимфоузлов, увеличение селезенки и печени, узелковые и очаговые поражения в легких. Белые мыши погибают на 3–4й день после заражения. Диагностическими признаками у них являются 4. ÈÍÔÅÊÖÈÎÍÍÛÅ ÁÎËÅÇÍÈ ËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÛÕ ÆÈÂÎÒÍÛÕ... [стр. 65 ⇒]

Одним из самых богатых видами оказался род Aspergillus, представители этого рода весьма устойчивы к различным неблагоприятным факторам (сухость, соленость, повышенная температура, различные излучения и др.) и способны усваивать широкий спектр питательных субстратов. Род Penicillium оказался представленным также большим количеством видов, преобладал P. chrysogenum. Этот технофильный вид доминировал в пыли из пылесборника, и менее обилен на фильтре. Он постоянно выделяется с некоторых поверхностей на РС МКС, а на станции «МИР» это был один из доминирующих видов. Впервые на РС МКС обнаружен опасный токсинообразующий гриб – Stachybotrys chartarum, однако обилие его очень низкое. В целом, анализ пыли дает более полные данные по сравнению с пробами, отобранными с конкретных поверхностей. Ряд видов был выявлен этим методом на 1 – 1,5 года раньше, а 10 видов пока еще не отмечено с использованием укладки «Биопробы». Анализ пыли, собираемой пылесосом и воздушными фильтрами и являющейся местом концентрации спор грибов и клеток микроорганизмов, дает интегральную оценку микробиологического населения РС МКС и оптимально подходит для выявления максимального разнообразия видов. Однако этот метод не позволяет определить место развития микроорганизмов, и поэтому должен обязательно сочетаться с анализом в конкретных точках и на определенных материалах. Таким образом, анализ пыли на РС МКС оптимально дополняет эксперимент «Начальные этапы биодеградации и биоповреждений в условиях космоса» с использованием укладки «Биопробы». [стр. 366 ⇒]

Задача 3. Девочка Н., 14 лет. В течение нескольких месяцев беспокоит сухой навязчивый кашель, лечилась у врача по поводу ларингита. Улучш ений нет. Вечерами повышается температура до 37 ,2 -3 7 ,4 °С. Похудела, аппетит плохой, стала хуже учиться. Из анамнеза известно, что девочка летом гостила у тети в другом городе, где жила пожилая женщина, у которой был постоянный кашель в течение многих лет. Не обследована. 1. О каком заболевании следует подумать и почему? 2. Какие методы обследования можно применить? Задача 4. В школе детям поставлена реакция Манту. При ее проверке выяснилось: Витя П. — реакция отрицательная. Есть один рубец от прививки БЦЖ в роддоме. Ира В. — папула 10 мм. Р прошлом году была сделана ревакцинация БЦЖ. Катя И. — папула 18 мм. В прошлом году реакция М анту была отрицательная, но прививка не сделана, так как девочка болела ОРВИ. 1. Оцените результаты биопроб. 2. Определите наличие и характер виража биопроб. 3. Нуждается ли кто-либо из детей в обследовании в туберкулезном диспансере и почему? 4. Можно прививать кого-либо из детей? Задача 5. Ребенку 3 года. При проведении пробы Манту у ребенка впервые выявили (+) реакцию — папула 10 мм. Из анамнеза известно: контакта с больным туберкулезом не было, материально-бытовые условия хорошие, питание регулярное. ОРВИ болеет редко, мама жалоб не предъявляет. Объективно: общее состояние удовлетворительное, аппетит сохранен, поведение обычное, кожные покровы розовые, чистые, л/у не увеличены, дыхание везикулярное, температура 36,4 °С, пульс 110 в мин, печень не увеличена. В анализе крови и мочи изменений нет. 1. Поставить диагноз. Задача 6. Миша С., 12 лет, направлен в туберкулезный диспансер из школы в связи с резко выраженной реакцией М анту (21 мм). При осмотре выяснилось, что у ребенка имеется нечастый контакт с дядей, больным инфильтративным туберкулезом (ВК+). За последние 2 месяца болел ОРВИ 4 раза, стал вялым, раздражительным, быстро утомляется, хуже учится, забросил занятия спортом. У ребенка периодически подъем температуры до 37,6 °С, сухой кашель, был кератоконъюнктивит. При осмотре: бледность кожных покровов, увеличение наружных лимф атических узлов. [стр. 364 ⇒]

Биопробу проводят следующим образом: после медленного введения первых 5 капель ЛС прекращают переливание на 3 мин, затем вводят еще 30 капель и снова прекращают вливание на 3 мин. При отсутствии реакции продолжается введение ЛС. Результаты биопробы обязательно регистрируются в истории болезни. Декстран апирогенен и нетоксичен. Совместно с декстраном целесообразно вводить кристаллоидные растворы (0,9% раствор натрия хлорида, 5% раствор декстрозы) в таком количестве, чтобы восполнить и поддержать жидкостный и электролитный балансы. Это особенно важно при лечении обезвоженных больных и после тяжелых хирургических операций. У больных со сниженной фильтрационной способностью почек необходимо ограничить введение натрия хлорида. Как правило, вызывает увеличение диуреза (уменьшение диуреза указывает на обезвоживание организма больного). Декстраны способны обволакивать поверхность эритроцитов, препятствуя определению группы крови, поэтому в реакции при подобном определении необходимо использовать отмытые эритроциты. [стр. 400 ⇒]

ЖМ: Что такое мышечная композиция? ВС: Классифицировать мышечные волокна можно минимум двумя способами. Первый способ — по скорости сокращения мышцы. В этом случае все волокна делятся на быстрые и медленные. Это метод определяет наследственно обусловленную мышечную композицию. Надо заметить, что обычно мышечную композицию определяют с помощью взятия из латеральной головки мышцы бедра биопробы. Но данные полученные для данной мышцы не коррелируют с биопробами других мышц. Например, бегуны на средние и длинные дистанции имеют большую долю ММВ (медленных мышечных волокон) в латеральной головке мышцы бедра, в мышцах задней поверхности бедра и икроножной мышце больше БМВ. У стайера все мышцы ног имеют преимущественно ММВ. Существует и второй способ классификации. Если в первом случае оценка идет по ферменту миофибрилл (миозиновая АТФ-аза), то во втором — по ферментам аэробных процессов, по ферментам митохондрий. В этом случае мышечные волокна делят на окислительные и гликолитические. Те мышечные волокна, в которых преобладают митохондрии, называют окислительными. В них молочная кислота практически не образуется. В гликолитических волокнах, наоборот, очень мало митохондрий, поэтому в них образуется много молочной кислоты. Так вот в этих классификациях и начинается путаница. Почему-то большинство читателей понимают так, что быстрые волокна всегда гликолитические, а медленные – окислительные и ставит знак равенства в этих классификациях, а это далеко не так. При правильно построенном тренировочном процессе быстрые волокна можно сделать окислительными, значительно увеличив в них количество митохондрий, и они не будут утомляться, то есть перестанут образовывать молочную кислоту. Почему это происходит? Потому что промежуточные продукты, например, пируват, не превращается в лактат, а поступает в митохондрии, где окисляется до воды и углекислого газа. Такие спортсмены показывают выдающиеся результаты, в видах спорта, требующих выносливости, если нет других лимитирующих факторов. Например, выдающиеся велосипедисты профессионалы – Меркс, Индурайн, Армстронг, при выполнении ступенчатого теста до МПК закисляются только до 6мМ/л лактата в крови. У обычных гонщиков концентрация лактата достигает 12–20мМ/л. И наоборот, медленные волокна тоже могут быть гликолитическими, хотя этот вариант в литературе не описывается. Но мы знаем, что если человек лежит в больнице предоперационный период, а потом ещё и послеоперационный период, то потом уже и встать не может, ходить не может. Первая причина — координация нарушается, а вторая причина — мышцы «уходят». И самое главное, уходят, прежде всего, митохондрии из медленных мышечных волокон (период их "полураспада" всего 20–24 дня). Если человек пролежал 50 дней, то от митохондрий почти ничего не... [стр. 20 ⇒]

, их культивирование и идентификация остаются деликатной процедурой, требующей длительного времени и опыта. Соблюдение всех этих требований часто оказывается невозможным для рядовой бактериологической лаборатории, но даже в хорошо оснащенных клинико-диагностических центрах процент высеваемости этих микроорганизмов составляет 12-60 %. Существенным недостатком культурального посева является также длительность исследования. Время роста отдельных микроорганизмов может составлять от нескольких дней до нескольких недель, в течение которых больной не получает адекватного лечения. В ряде случаев при БВ необходима видовая идентификация возбудителя (например, для представителей рода Mobiluncus, Fusobacteria), что требует дополнительных средств и времени при использовании микробиологического подхода. Отчасти проблему обнаружения анаэробной микрофлоры в лабораторных условиях решает использование световой микроскопии с окраской мазка по Грамму. При таком обследовании легко обнаружить микроорганизмы, имеющие характерную форму и локализацию. Как сказано выше, одним из критериев БВ яляется наличие "ключевых" клеток, которые можно увидеть в урогенитальном мазке под микроскопом. Это зрелая эпителиальная клетка, по всей поверхности которой плотно и в большом количестве прикреплены мелкие граммвариабельные палочки, представляющие собой G. vaginalis. Одновременно в таком мазке можно обнаружить представителей семейства Mobiluncus, имеющих характерную форму. При окраске по Граму они вариабельны или граммотрицательны, несмотря на строение клеточной стенки, характерной для граммположительных бактерий. Это связано с очень тонким пептидогликановым слоем, что снижает эффективность прокрашивания. Существенным недостатком микроскопического анализа мазка является невозможность видовой идентификации микроорганизмов. Качественная оценка микрофлоры заключается в характеристики только морфотипов бактерий: лактоморфотип, морфотипы гарднереллы, бактероидов, фузобактерий, мобилункуса, вейллонеллы, что является очень грубой оценкой состояния бактериальной микрофлоры. Решить проблему быстрого и качественного обнаружения представителей анаэробной микрофлоры и микроэророфилов способны методы генодиагностики (ДНК-ДНК гибридизация и ПЦР), позволяющие выявлять микроорганизмы непосредственно в урогенитальном мазке, минуя стадию культивирования и выделения чистой культуры. Методы генодиагностики основаны на детекции ДНК возбудителя в клиническом материале. Сходство физико-химических свойств всех нуклеиновых кислот позволило создать универсальные процедуры обнаружения ДНК любых микроорганизмов в биопробе, а уникальность генетического материала каждого конкретного возбудителя легла в основу специфичности метода, позволяющего проводить видовую идентификацию. Для проведения генодиагностики не требуется забор образцов в специальные транспортные среды и создания особых условий хранения и транспортировки, что существенно снижает себестоимость проводимого анализа. При этом время проведения анализа сопоставимо по скорости с микроскопическим исследованием и составляет 4,5-5 часов. Основным методом генодиагностики, используемым при обследовании больных с БВ, является полимеразная цепная реакция – ПЦР и ее модификации. В основе метода ПЦР лежит комплиментарное достраивание участка геномной ДНК или РНК возбудителя, осуществляемое in vitrо с помощью фермента термостабильной ДНК-полимеразы. Специфичность метода определяется уникальностью генетического материала выявляемых инфекционных агентов, к которому подобраны олигонуклеотидные праймеры, участвующие в процессе амплификации. ПЦР-анализ клинического образца включает в себя три основных этапа: пробоподготовка, амплификация и регистрация результатов. Забор клинических образцов для проведения ПЦР диагностики не требует специальных транспортных сред. Объектом исследования может служить любой биоматериал (соскоб клеток цервекального канала, уретры, отделяемое содержимое влагалища) взятый от больного и на холоду доставленный в ПЦР лабораторию. В результате несложных манипуляций из полученного биоматериала выделяют нуклеиновые кислоты (ДНК или РНК), являющиеся матрицей в реакции амплификации. Реакция амплификации представляет собой многократно повторяющиеся циклы синтеза специфической области ДНК-мишени в присутствии термостабильной ДНК-зависимой ДНК-полимеразы. В каждом цикле происходит удвоение числа копий амплифицируемого участка, что позволяет за 30-40 циклов наработать фрагмент ДНК, ограниченный парой специфических праймеров, в количестве, достаточным для его детекции. Детекция продуктов амплификации осуществляется с помощью электрофореза в агарозном геле (большинство отечественных тест-систем) либо путем гибридизации со специфическим к последовательности ампликона олигонуклеотидным зондом (диагностические системы фирмы Roche, наборы серии ПлаТАн НПФ "Литех"). Отличительной особенностью ПЦР диагностики является универсальность подхода для выявления различных инфекционных агентов. Так как объектом исследования служит молекула ДНК, обладающая сходными химическими свойствами у всех организмов, процедуры выявления вирусной, бактериальной, человеческой ДНК одинаковы, что позволяет проводить комплексное исследование биопробы методом ПЦР. Наряду с культуральным методом и микроскопией, ПЦР является прямым методом выявления возбудителя, но при этом обладает существенно большей чувствительностью. Чувствительность ПЦР достигает единичных копий возбудителя в биопробе, что позволяет существенно повысить эффективность выявления инфекционных агентов непосредственно в клиническом образце, минуя стадию бактериологического посева. Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики представители микрофлоры с внутриклеточной или мембранной локализацией (Chlamydia trachomatis, представителей семейства Mycoplasma и др.), а также трудно-культивируемых, некультивируемых и персистирующих форм микроорганизмов, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях. Применение метода ПЦР диагностики позволяет избежать сложностей идентификации микроорганизмов, имеющих малые физические размеры и разнообразные формы, так как снимаются ограничения на размер и формы возбудителя, накладываемые использованием световой микроскопии с окраской мазка по Грамму. Особенностью протекания микоплазменных инфекций является стертый имунный ответ организма хозяина и... [стр. 22 ⇒]

Часто “тик” сопровождается сильной болью в области окончания нервных волокон, животные грызут пальцы и стонут, особенно по ночам. Рецидив всегда протекает тяжело и в большинстве случаев заканчивается гибелью собаки. Абортивное течение чумы характеризуется 1-2-дневным недомоганием, чаще наблюдаемым у вакцинированных собак, после чего наступает выздоровление или без повышения температуры нарастают нервные явления, что может закончиться гибелью животного. Часто чума осложняется секундарными бактериальными инфекциями, стафилококкозами и стрептококкозами, колибактериозом, сальмонеллезом, пастереллезом и др. Патологоанатоммческие изменения. Трупы собак истощены. Иногда на слизистой оболочке ротовой полости обнаруживают язвы, а в носовой полости – гнойные наложения. Конъюнктива гиперемирована, в углах глаз корочки или гной. Слизистая оболочка трахеи катарально воспалена. В передней и задней долях легкого часто находят уплотненные участки, при разрезе которых вытекает светлая слизистая или гнойная жидкость. На слизистой оболочке желудка эрозии, а иногда и язвы. Как правило, изменения бывают в двенадцатиперстной кишке: слизистая оболочка катарально воспалена, на ней хорошо заметны эрозии или язвы. На слизистой оболочке прямой кишки имеются точечные или полосчатые кровоизлияния. Печень кровенаполнена, желчный пузырь переполнен желчью. Селезенка без изменений или слегка набухшая. При разрезе почек рисунок сглажен, мозговой слой иногда гиперемироваи, в корковом слое обнаруживают точечные кровоизлияния. Изменения в мочевом пузыре характерны для чумы собак: его слизистая оболочка всегда гиперемирована, на ней точечные или полосчатые кровоизлияния. Мышца сердца дряблая, иногда как бы вареная. На перикарде могут быть точечные или полосчатые кровоизлияния, часто выражен серозный перикардит. Сосуды головного мозга резко инъецированы. Диагноз. Прижизненный диагноз на чуму ставят на основании эпизоотологических и клинических данных (серозный, гнойный конъюнктивиты, ринит). В необходимых случаях прибегают к гематологическим исследованиям и постановке биологической пробы. Установлено, что при чуме собак наблюдается лейкоцитоз и гиперлейкоцитоз (до 34000 лейкоцитов в 1 мм3 крови), СОЭ до 39 делений в 1 ч. Для постановки биопробы берут кровь больных собак (в начальном периоде болезни во время повышения температуры) и 1-2 мл ее вводят двум здоровым щенкам 2-3-месячного возраста или молодым, не болевшим чумой собакам. За подопытными животными наблюдают 1-2 мес. Самым чувствительным методом диагностики чумы плотоядных является биопроба на тхорзофретках. Суспензией, приготовленной из крови больных животных или из органов только что павших животных, заражают двух животных, которые погибают через 8-12 дней. От трупов берут кусочки селезенки и головного мозга, делают суспензию на физиологическом растворе 1:10 и вводят щенкам внутримышечно в дозе 1-2 мл. За подопытными животными ведут наблюдение. Биопроба считается положительной при заболевании подопытных собак через 7-30 дней. Посмертно чуму диагностируют по патологоанатомическим изменениям. Наиболее характерны точечные и полосчатые кровоизлияния на слизистых оболочках двенадцатиперстной и прямой кишок, мочевого пузыря. Разработаны гистологический и гистолюминесцентный методы посмертной диагностики чумы. Гистологический метод диагностики. Основан он на обнаружении включений в плазме или ядре клетки. Яркие тельца-включения оксифильны. Для фиксации препаратов рекомендуется применять 10%-ный раствор формалина. [стр. 197 ⇒]

Во второй стадии болезни температура тела повышается на 1-3 °С, а в третьей примерно на столько же она уменьшается ниже нормы. В начале болезни пульс ускорен и напряжен, дыхание затруднено. В крови полиморфноядерный лейкоцитоз, уменьшено содержание лейкоцитов. В конце болезни метамиелоцитоз. В моче 3% сахара. Паралитическая (тихая) форма болезни длится 2-4 дня. Больная собака ведет себя спокойно, неагрессивно, аппетит сохранен. Выражен паралич нижней челюсти, глотки и задних конечностей. Создается впечатление, что она подавилась костью. При попытке извлечь несуществующую кость человек может заразиться бешенством. Иногда у таких собак наблюдается геморрагический гастроэнтерит. Атипичная форма болезни не имеет стадии возбуждения. Отмечаются истощение и атрофия моторной мускулатуры, иногда гастроэнтерит. Абортивная форма отличается тем, что в начале второй стадии болезнь внезапно прекращается. Эта форма еще недостаточно изучена. Возвратная (ремитирующая) форма характеризуется тем, что после кажущегося выздоровления вновь развиваются клинические признаки бешенства. Такие чередования обычно бывают 2-3 раза с промежутком в несколько дней, реже 2-3 нед. Патологоанатомические изменения. Труп истощен, шерсть взъерошена, на голове, шее и передних конечностях она смочена слюной. На голове травмы – следствие драк, буйства. Слизистая оболочка ротовой полости гиперемирована, на ней встречаются язвы и эрозии. В желудке часто обнаруживают несъедобные предметы: щепки, подстилочный материал, тряпки, иногда гвозди и т. п. Слизистая оболочка желудка гиперемирована, имеются различные кровоизлияния. Мягкая оболочка головного мозга отечная. Извилины головного мозга сглажены, на разрезе видны мелкие кровоизлияния. Сосудистые сплетения сильно инъецированы, отечные. В желудочках мозга скопление большого количества экссудативной жидкости. При гистологическом исследовании головного мозга в цитоплазме нейронов обнаруживают включения Бабеша-Негри, их может быть от одного до нескольких в одной клетке. Эти образования являются специфическими, их обнаруживают только при бешенстве. Диагноз. Ставят его на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патоморфологическвх, серологических и главным образом лабораторных исследований. Патоморфологические исследования головного мозга направлены на обнаружение телец Бабеша – Негри, что характерно для данной болезни, но находят их не всегда. Для более точного диагноза необходимо ставить биопробы на белых мышах. Их заражают суспензией из патологического материала (головного мозга, слюнных желез или слюной больной собаки). Суспензия должна быть свободной от бактериальной микрофлоры. Заражают внутрицеребрально. При положительной биопробе белые мыши гибнут на 6-10-й день. Головной мозг их исследуют на наличие телец Бабеша – Нетри. Для микроскопического исследования делают отпечатки, мазки или срезы из разных участков головного мозга. Для приготовления отпечатков кусочек головного мозга (аммониев рог, кора больших полушарий, мозжечок, продолговатый мозг) кладут на фильтровальную бумагу, сложенную в 4-6 слоев, срезанной поверхностью кверху К поверхности среза несколько раз (3-4) подряд прикасаются чистым предметным стеклом, слегка подавливая, чтобы на стекле получился тонкий отпечаток. Мазки делают из тех же участков головного мозга. Для этого кусочки головного мозга растирают в фарфоровой ступке пестиком или в пробирке стеклянной палочкой до образования гомогенной массы, из которой делают грубые мазки на обезжиренном предметном стекле. Можно мазки делать и другим способом. Для этого небольшой кусочек мозга кладут на край предметного стекла, а другим стеклом раздавливают его и размазывают от одного края до другого, в результате чего на поверхности стекла получается тонкий равномерный мазок. Полученные мазки или отпечатки окрашивают одним из следующих способов. [стр. 206 ⇒]

Попав на слой сорбента, эти вещества взаимодействуют с подвижной фазой и начинают перемещаться вдоль слоя сорбента по направлению движения подвижной фазы. Если эти вещества обладают разным сродством к неподвижной фазе, то скорость их перемещения разная: в нашем случае компонент А сорбируется слабее, значит продвигается быстрее, за ним движется компонент В, следом — С. В итоге зоны с компонентами будут постепенно образовывать отдельные участки, разделенные чистым элюентом. Таким образом, в данном случае компоненты пробы мигрируют независимо друг от друга, разделение происходит за счет разных скоростей их перемещения. Достоинством данного способа является возможность практически полного разделения смеси на отдельные компоненты (левый график на рисунке 4.12), недостатком — значительное разбавление компонентов растворителем, что снижает их концентрации на выходе из колонки. При колоночной хроматографии данный вариант используется наиболее широко, постепенно вытесняя все остальные. Фронтальный вариант (рисунок 4.12, центр) является наиболее простым. Анализируемую биопробу, которая одновременно служит подвижной фазой, непрерывно пропускают через слой сорбента. Предположим, исследуемая биопроба содержит 3 исследуемых компонента — А, В и С, различающихся по сродству к сорбенту (А < В < С). Поступающие в верхний слой колонки компоненты биопробы постепенно вытесняют из колонки растворитель. Передний край называют фронтом, откуда и происходит название. В 1-й зоне находится только наименее удерживаемое вещество А, которое движется быстрее всего. Вторая зона содержит вещество А и В. Третья зона включает смесь веществ — А, В, С. Метод позволяет выделить из смеси только одно, наиболее слабо сорбирующееся вещество (в нашем примере А). Кроме того, недостатком метода является необходимость значительного объема анализируемой пробы. Вытеснительный вариант хроматографии (правая часть рисунка 4.12) основан на том, что десорбцию компонентов пробы осуществляют потоком раствора, содержащего специальное вещество — вытеснитель, которое сорбируется лучше любого из разделяемых компонентов. Колонку промывают подвижной фазой, затем вводят биопробу (компоненты А, В, С) и пропускают поток подвижной фазы, содержащей вытеснитель. В результате подвижная фаза вытесняет и проталкивает все компоненты. Сначала она вытесняет наиболее сильно сорбирующийся компонент С, который, в свою очередь, вытесняет компонент В, а тот вытесняет наименее сорбирующийся компонент А. Таким образом компоненты биопробы перемещаются вдоль колонки в порядке увеличения их сорбционных свойств. На хроматограмме получается ступенчатая кривая (правый график на рисунке 4.12), но каждая ступенька соответствует только одному компоненту. В результате каждый компонент не отделяется зоной чистого растворителя (как при проявительном варианте), так как зоны частично перекрываются. Это яв101... [стр. 101 ⇒]

Разделенные компоненты в виде пятен на пластинке можно идентифицировать различными аналитическими методами: ультрафиолетовой спектрофотометрией, специальными способами окрашивания и т. д. Метод имеет ряд преимуществ, прежде всего, простота и легкость исследования, высокая скорость, экономичность, отсутствие необходимости предварительной подготовки биопробы, возможность анализа нестойких веществ, причем, одновременно в нескольких образцах. Различные варианты тонкослойной хроматографии приобретают в настоящее время широкое распространение в КДЛ для анализа жиров, углеводов, белков, а также неорганических соединений. 4.3.2 Электрофорез Электрофорез — процесс разделения заряженных частиц под действием внешнего электрического поля. В результате проведения электрофореза можно осуществлять идентификацию и определение количества различных макромолекул, микрочастиц, клеток по их подвижности в направлении силовых линий электрического поля. Электрофорез применяют для исследования веществ, молекулы которых в соответствующих условиях заряжены и различаются по электрофоретической подвижности. Конкретные условия для разделения подбирают путем изменения характеристик внешней среды (рН среды, температуры, состава и концентрации буферного раствора или носителя). На примере разделения белков принцип метода можно представить следующим образом. Белки являются амфотерными веществами, которые в кислой среде присоединяют протон и ведут себя как катионы, а в щелочной среде — отдают протон и приобретают свойство анионов. В изоэлектрической точке они становятся ионами с нулевым суммарным зарядом, то есть нейтральными молекулами, в которых противоположные заряды пространственно разделены. Суммарный заряд молекул зависит от рН буфера, в котором растворен белок. Изменяя этот параметр, можно менять направление и скорость миграции белков в электрическом поле, то есть разделять белки в анализируемой биопробе. Эффективность разделения зависит не только от суммарного заряда молекул, но и от их размеров. При этом крупные молекулы с высоким суммарным зарядом могут мигрировать на то же расстояние, что и небольшие молекулы с низким суммарным зарядом. Определяющим параметром при этом является соотношение заряд/масса, которое и определяет электрофоретическую подвижность молекул исследуемого компонента. Электрофорез можно осуществлять в растворе или использовать специальные носители из пористого материала, не проводящие ток. Среданоситель служит для поддержания стабильности различий в плотности 105... [стр. 105 ⇒]

Для обнаружения трипаносом в крови животных, подозреваемых в заболевании, ставят индивидуальную или групповую биопробу. Для этого используют белых мышей, белых крыс, морских свиней и собак, которым вводят обычно под кожу цельную или цитрированную кровь, а в остальных случаях суспензию из органов" проверяемых животных. Через 8—4 дня у белых мышей развиваются симптомы болезни, а в крови начинают появляться трипаносомы. Для групповой биопробы берут кровь от 3—5 или 10 животных в общий сосуд с гепарином и вводят подопытным животным, которых исследуют через каждые 2—3 дня в течение месяца. Для диагностики су-ауру у верблюдов можно применять формалиновую" реакцию (неспецифическая проба). Для ее постановки кровь у верблюда берут из вены в количестве 10 мл, отстаивают, затем 1 мл свежей сыворотки помещают в пробирку и добавляют две капли чистого формалина. Пробу взбалтывают, закрывают ватной пробкой и оставляют при комнатной температуре на двое суток. Положительной реакцией считается, если исследуемая сыворотка приобретает плотную консистенцию и не вытекает из пробирки, сомнительной — если сыворотка слегка густоватая, вытекает из пробирки с трудом, отрицательной — если сыворотка жидкая, без изменений. Для диагностики су-ауру у лошадей и собак используют РСК, РИФ. Лошадей, давших один раз положительный показатель по РСК или дважды сомнительный, следует считать больными. Подозрительными признают лошадей, давших один раз сомнительный результат по РСК или имеющих неясные клинические признаки болезни. Верблюдов, давших сомнительные результаты по клиническим признакам и по формалиновой реакции, тоже признают больными. Подозрительными по су-ауру необходимо считать верблюдов, давших положительный или отрицательный результат по одной формалиновой реакции. Лечение. Внутривенно применяют 10%-ный раствор наганина лошадям в дозе 0,01—0,015 г/кг, Еерблюдам — 0,01—0,015 г/кг двукратно через 10 дней; собакам — 0,01—0,015 г/кг двукратно с интервалом в 10 дней. Если возникают рецидивы, назначают азидин, пиральдин, антрицид, соварсен в соответствии с наставлением Главного управления ветеринарии МСХ СССР. Азидин (беренил) 100... [стр. 96 ⇒]

Молодые с неровными краями. Зрелые колонии крупные, с бурым зернистым центром и неровными краями. На скошенном агаре черед двое суток при +28 С образуют серовато - белый налет, врастающий в среду, на бульоне - нежную поверхностную пленку и хлопковидный осадок. Биохимические свойства: фенментативная активнсть высокая: ферментация до кислоты ксилозу, синтез плазмокоагулазы, фибринолизина, гемолизина, лецитиназу, сероводород. Рамнозу, мочевину не ферментирует. Антигенная структура. Группа белково - полисахаридных и липополисахаридных антигенов: термостабильный соматический О-антиген и термолабильный капсульный V,W антигены. С W-антигеном связывают вирулентность бактерий. Продуцирует факторы патогенности: фибринолизин, плазмокоагулазу, эндотоксин, экзотоксин, капсулу, V,W антигены. Резистентность: чувствителен к антибиотикам (особенно стрептомицин), нестоек к окружающей среде при высокой температуре. Патогенные свойства. Обладает патогенным потенциалом, подавляет функции фагоцитарной системы, подавляет окислительный взрыв в фагоцитах и беспрепятственно в них размножается. Факторы патогенности контролируются плазмидами трех классов. В патогенезе выделяют три основных стадии - лимфогенного заноса, бактеремии, генерализованной септицемии. Имеют адгезины и инвазины, низкомолекулярные протеины (ингибируют бактерицидные факторы), энтеротоксин. Часть факторов контролируется плазмидами вирулентности. Клинические особенности: Инкубационный период – несколько часов до 8 сут. Различают локальные – кожно-бубонная, бубонная; внешне-диссеминированные – первично-легочная, вторично-легочная и кишечная; генерализованная – первичносептическая, вторично-септическая формы чумы. Региональная лимфоаденопатия, энтероколиты, реактивные артриты, спондилит, лихорадка. Эпидемиология: Чума - классический природноочаговый зооноз диких животных. Основные носители в природе - сурки, суслики, в городских условиях - крысы. В передаче возбудителя - блохи животных, способные заражать человека. Иммунитет: клеточно-гуморальный, ограничен по длительности и напряженности. Микробиологическая диагностика: Бактериоскопическое исследование. Из исследуемого материала готовят мазки, окрашивают по Граму и водным раствором метиленового синего. Бактерии чумы представляют собой грамотрицательные палочки овоидной формы Бактериологическое исследование.Исследуемый материал засевают на чашки с питательным агаром. Посевы инкубируют при 25С. Первичное изучение посевов производят через 10ч. К этому сроку появляются колонии, которые образованы вирулентными R-формами. Мало- и авирулентные бактерии формируют S-формы колоний. Идентификацию чистой культуры проводят по морфологии бактериальных клеток, характеру роста, антигенным и биохимическим свойствам, чувствительности к специфическому фагу и биопробе. На бульоне бактерии образуют пленку; ферментируют многие сахара до кислоты, индола не образуют, желатин не разжижают. Содержат групповой термостабильный соматический антиген и специфический термолабильный капсульный антиген. Биопроба.Проводится для выделения чистой культуры из материала, загрязненного посторонней микрофлорой. Наиболее чувствительными лабораторными животными являются морские свинки, которым материал вводят подкожно. Внутрибрюшинно материал вводят в том случае, если он не загрязнен другими бактериями. После гибели животных отмечают патологические изменения органов и проводят бактериологическое исследование Экспресс-методы лабораторной диагностики: 1.Иммунофлюоресцентный метод позволяет обнаружить присутствие возбудителя как в патологическом материале, так и в объектах окружающей среды (вода, воздух), а также в пищевых продуктах и эктопаразитах. С этой целью используют люминесцентную видоспецифическую противочумную сыворотку, люминесцентные противокапсульную и противосоматическую сыворотку. 2.РПГА - для обнаружения антигенов бактерий в материале с помощью стандартной противочумной сыворотки, антитела которой нагружены на эритроциты. Лечение: антибиотики –стрептомицин, препараты тетрациклинового ряда. Профилактика: специфическая профилактика - живая ослабленная чумная вакцина EV. Имеется сухая таблетированная вакцина для перорального применения. Для оценки иммунитета к чуме (естественного постинфекционного и вакцинального) может применяться внутрикожная аллергическая проба с пестином. Чумной бактериофаг – при идентификации Y.pestis. Чумная сухая вакцина – высушенная живая культура Y.pestis вакцинного штамма EV, используется для профилактики чумы. № 116 Особенности микробиологического диагноза при карантинных инфекциях. Карантинная (конвенционная) болезнь — это болезнь, система информации и меры профилактики которой обусловлены международными соглашениями . Действуют Международные медико-санитарные правила, которые касаются чумы, холеры, желтой лихорадки и натуральной оспы. Основная цель этих Правил заключалась в обеспечении противоэпидемической защиты государств от заноса инфекций. Правила обязывают национальные органы здравоохранения немедленно уведомлять ВОЗ о возникновении карантинных болезней. При возникновении в любой точке планеты случаев карантинных инфекций вступает в силу система: 1) страна направляет в ВОЗ информацию о возникших случаях; 2) ВОЗ обрабатывает данные и направляет их всем странам мира; 3) страны мира, получив информацию, принимают решение относительно проведения каких-либо особых противоэпидемических мероприятий и информируют об этом ВОЗ; 4) ВОЗ обрабатывает полученную информацию и направляет ее всем странам мира. [стр. 69 ⇒]

2. Дифференциацию вируса осповакцины от вируса оспы коров проводят постановкой биопробы на цыплятах, белых мышах или кроликах. 6.2.1. Биопроба на цыплятах: у 1,5месячных цыплят в области голени удаляют перья; в свежеобнаженные фолликулы голени одной конечности (вторая — для контроля) стерильным шпателем втирают 0,6 мл исследуемой надосадочной жидкости (п. 5.1) или суспензии из пораженной ХАО, в которые предварительно добавляют 20% стерильного глицерина. Вирус осповакцины вызывает образование у цыплят на 7...9й день после заражения доброкачественного оспенного фолликулита; вирус оспы коров специфических изменений не вызывает. 6.2.2. Биопроба на белых мышах: пяти белым мышам массой 15...18 г вводят внутримышечно по 0,2 мл надосадочной жидкости исследуемой суспензии (п. 5.1). Вирус осповакцины гибели мышей не вызывает; вирус оспы коров вызывает гибель мышей на 5...7й день после заражения. 6.2.3. Биопроба на кроликах: у двух кроликов массой тела 1,5...2 кг на 4 участках в области живота выстригают шерсть на площади 2,5´2,5 см; кожу обрабатывают 70°ным этиловым спиртом и острым концом стерильного скальпеля делают насечки длиной по 1 см, избегая появления капель крови. В скарифицированную кожу втирают стерильным шпателем по 0,2 мл (на каждый участок) надосадочной жидкости исследуемой суспензии. В суспензию предварительно добавляют 20% глицерина. Вирус осповакцины на 3...5й день после заражения вызывает у подопытных кроликов на скарифицированных участках кожи образование инфильтратов без геморрагии; вирус оспы коров вызывает образование геморрагических инфильтратов. 6.3. Исследования на оспу овец (коз) проводят на двух клинически здоровых ягнятах (козлятах) в возрасте 2...3 мес., взятых от неболевших и невакцинированных против оспы маток. [стр. 103 ⇒]

Кожу вентрального бесшерстного участка хвоста подопытных животных обрабатывают 70°ным этиловым спиртом, затем шприцом внутрикожно в два участка вводят по 0,2 мл надосадочной жидкости исследуемой суспензии (в разведениях 1:20 и 1:200). Биопробу на оспу считают положительной при появлении у ягнят (козлят) на 6...8й день после заражения характерных оспенных розеол, папул и пустул. 6.4. Биопробу на оспу свиней ставят на двух клинически здоровых поросятах в возрасте 2...3 мес. Кожу живота поросят в 4 участках размером 4,0´4,0 см выбривают, обрабатывают спиртом, затем скарифицируют, делая насечки длиной по 3 см. В скарифицированную поверхность кожи каждого участка втирают шпателем по 0,6 мл надосадочной жидкости исследуемой суспензии. Результат исследования на оспу свиней считают положительным при образовании по ходу насечек через 6...8 дней после заражения характерной узелковопустулезной сыпи и обнаружении в патматериале с этих мест методом микроскопии вирусных оспенных частиц. 6.4.1. Дифференциацию возбудителя, вызвавшего оспу у свиней, проводят на куриных эмбрионах (п. 5) или на поросятах. С этой целью используют 2 поросят, переболевших оспой (подопытные) и 2 здоровых (контрольные). Подопытным и контрольным поросятам втирают в два участка скарифицированной кожи по 2 капли растворенной сухой оспенной вакцины, изготовленной из вируса осповакцины. Развитие оспин на скарифицированной коже подопытных и контрольных животных через 5...8 дней после нанесения вируса осповакцины указывает на наличие в хозяйстве оспы, вызванной вирусом оспы свиней. Отсутствие оспенных поражений на коже подопытных животных (при положительной поствакцинальной реакции у контрольных поросят) свидетельствует о наличия у свиней оспы, вызванной вирусом оспы коров или осповакцины. 6.5. Биопробу на оспу верблюдов проводят на одном верблюжонке (отлученном от матки). Кожу бесшерстного вентрального участка хвоста или бесшерстного участка бедра... [стр. 104 ⇒]

При проведении непрямого ИФА пробы обезжиренного молока разводят разбавителем для сывороток: к 0,5 мл молока добавляют 0,5 мл разбавителя. Далее соблюдают последовательность постановки реакции, как изложено в п. 2.2.3.2. Конкурентный ИФА с молоком проводят так же, как и с сывороткой крови. 2.3.4. Обнаружение в молоке, молозиве и секрете вымени сухостойных коров антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота позволяет сделать заключение об инфицированности животных этим вирусом. 3. Выявление инфицированных животных методом биопробы. 3.1. Метод основан на восприимчивости животных гетерологичных видов к ВЛКРС. При введении овцам или кроликам лейкоцитов крупного рогатого скота, инфицированного вирусом лейкоза, у них развивается инфекция, которая сопровождается появлением в крови специфических преципитирующих антител, выявляемых с помощью реакции иммунодиффузии через 14...30 дней после заражения. 3.2. Подготовка к исследованию. Овец в возрасте старше 6 мес. или кроликов любого возраста, пола, породы перед постановкой на них биопробы исследуют в РИД дважды с интервалом 2 мес. на наличие антител к гликопротеидному антигену вируса лейкоза. В опыт берут животных с двукратным отрицательным результатом серологического исследования на лейкоз. 3.3. У исследуемого животного берут стерильно 5...10 см3 крови из яремной вены в пробирку с антикоагулянтом. Период от момента взятия крови у испытуемого животного до постановки биопробы должен составлять не более 24 ч при температуре хранения 18...25°C. 3.4. Для получения лейкоконцентрата пробу крови испытуемого животного центрифугируют в режиме 3000 об/ мин в течение 20 мин. После центрифугирования пастеровской или автоматической пипеткой осторожно собирают лейкоцитарную пленку из пробирок в один объем и перемешивают. [стр. 166 ⇒]

7. Выделение и идентификация вируса КЧС биопробой на животных. 7.1. Для постановки биопробы используют 4 здоровых поросят 2...4месячного возраста, полученных от свиноматок, не вакцинированных против КЧС и не содержащих в сыворотке крови специфических антител к вирусу КЧС, и 2 поросят такого же возраста, иммунных против КЧС. Для иммунизации поросятам вводят по 1000 ИмД50/см3 вирусвакцины ЛК ВНИИВВиМ против классической чумы свиней и через 10...15 сут после прививки используют для постановки биопробы. 7.2. Животных помещают в разные боксы по два подсвинка в каждый станок. 7.3. Двух неиммунных подсвинков содержат в отдельном помещении в качестве контрольных. 7.4. Содержание и кормление животных должны соответствовать зоотехническим нормам. 7.5. Непосредственно перед введением готовят экстракты 20%ных суспензий лимфатических узлов и селезенки подозреваемых в заболевании классической чумой свиней (п. 3.5) и фильтруют через фильтр «Миллипор» (или его аналог) с величиной пор 0,22...0,48 мкм. Равные объемы экстрактов органов смешивают, при этом общий объем смеси должен быть не менее 20 см3. 7.6. Подготовленный материал вводят двум восприимчивым и двум иммунным животным внутримышечно, соблюдая правила асептики, с внутренней стороны бедра в количестве 3...5 см3 каждому поросенку. За животными ведут клиническое наблюдение с ежедневным измерением температуры тела в течение 15 сут. 7.7. Оценка результатов. 7.7.1. При повышении температуры тела у невакцинированных поросят до 40,5...42°C, угнетении, отсутствии аппетита через 3...5 сут после введения исследуемого матери... [стр. 293 ⇒]

..10е сутки после повышения температуры тела выше нормы проводят убой поросят и отбор проб органов (п. 3.1), их подготовку (п. 3.5) и исследование (пп. 5.1...5.4) с целью реизоляции и идентификации вируса КЧС. При выделении и идентификации вируса результат биопробы считают положительным. 7.7.2. При установлении заболевания и гибели невакцинированных и вакцинированных против КЧС поросят проводят дифференциальные лабораторные исследования на африканскую чуму свиней. 8. Постановка лабораторного диагноза. Диагноз на классическую чуму свиней считают установленным в случае: n выделения и идентификации вируса КЧС в одной из исследуемых проб органов; n выявления специфических антител в сыворотках крови свиней, полученных из хозяйств, не применяющих вакцинацию против КЧС в течение последних 2 лет; n получения положительных результатов биопробы на животных, реизоляции и идентификации вируса. 9. Срок исследований: вирусологических — 2...12 сут, серологических — 1...2 сут, биопроба — 12...24 сут. ПРИЛОЖЕНИЕ к Методическим указаниям по лабораторной диагностике классической чумы свиней. 1. Материалы и реактивы для постановки реакции прямой и непрямой иммунофлуоресценции. 1.1. Предметные стекла по ГОСТ 928475, обезжиренные спиртэфиром, взятыми в соотношении 1:1. 1.2. Влажная камера (чашка Петри) или стерилизатор с увлажненной фильтровальной бумагой. 1.3. Фосфатносолевой буферный раствор (ФСК) 0,01 М pH 7,2...7,5 готовят, смешивая: а) 0,01 М раствор двузамещенного фосфата натрия (1,42 г Na2HPO4 безводного или 1,78 г N2HPO4×2H2O) с 0,85% хлористого натрия, воды дистиллированной до 1 дм3; б) 0,001 М раствор однозамещенного фосфата калия (1,36 г KH2PO4) с 0,85% хлористого натрия, воды дистиллированной до 1 дм3. [стр. 294 ⇒]

Сомнительным результатом РСК считают задержку гемолиза испытуемым антигеном в присутствии специфической сыворотки на два (++) креста. При получении сомнительного результата реакцию ставят повторно. При получении дважды сомнительных результатов реакция считается положительной. 3. Биологическая проба. 3.1. Биопробу проводят для подтверждения диагноза. 3.2. В каждом отдельном случае на проведение биопробы необходимо иметь разрешение ветеринарного отдела областного (краевого) управления сельского хозяйства, министерства сельского хозяйства автономной республики или главного управления ветеринарии министерства сельского хозяйства союзной республики, не имеющей областного деления. 3.3. Биопробу проводят под методическим руководством областной (краевой, республиканской) ветеринарной лаборатории в условиях, исключающих возможность рассеивания инфекции и спонтанного заражения опытных свиней. 3.4. Для биопробы отбирают две группы животных: 1я группа — три подсвинка из благополучного хозяйства, где... [стр. 305 ⇒]

3.5. В качестве материала для заражения используют 10%ную суспензию на физиологическом растворе из органов вынужденно убитых больных животных. В суспензию добавляют антибиотики (пенициллин и стрептомицин по 1000 ЕД/мл), выдерживают при температура 2...4°C в течение 3 ч, затем дважды ее центрифугируют (первый раз при 3000 об/мин в течение 30 мин, второй — при 8000... 10 000 об/мин в течение 1 ч). Надосадочной жидкостью заражают подсвинков 1й и 2й групп (неиммунных и иммунных к вирусу чумы), внутримышечно в объеме 10 мл. За подопытными животными наблюдают в течение 21 дня. 3.6. Биопробу считают положительной, если все неиммунные подсвинки (1я группа) после введения патологического материала заболели и пали, а иммунные (2я группа) остались здоровыми. Материал от вынужденно убитых животных биопробы в случае необходимости исследуют в РСК и методом ИФ с целью обнаружения в нем антигена вируса классической чумы свиней. С утверждением настоящих Методических указаний утрачивает свою силу Временное наставление по лабораторной диагностике чумы свиней методом иммунофлуоресценции от 29 января 1971 г. Печ. цех МСХ СССР, тираж 500 экз., заказ № 1088. 5.3. ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ ТЕСТСИСТЕМЫ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ВИРУСА КЛАССИЧЕСКОЙ ЧУМЫ СВИНЕЙ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ (ПЦР) (утверждена 12 февраля 2009 г.) I. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ... [стр. 306 ⇒]

4. Учет результатов РНГА проводят при полном оседании эритроцитов в контроле с отрицательной сывороткой. Давшими положительный результат считают те пробы сывороток, которые в разведении 1:16 и выше вызывают агглютинацию эритроцитарного диагностикума при положительном результате в контроле с положительной сывороткой и отрицательном результате реакции в других контролях. 5.5. РНГА можно ставить методом микроагглютинации с помощью аппарата Такачи. 6. Биологическая проба. 6.1. Биопробу ставят на супоросных свиноматках за 3...5 дней до опороса или на поросятахсосунах 1...2дневною возраста, взятых из благополучного по инфекционным болезням хозяйства. Свиноматку или поросят заряжают 10%ной суспензией, приготовленной из пораженных стенок тонкого отдела кишечника вынужденно убитых в агональном состоянии животных или вируссодержащей культуральной жидкостью. Суспензию центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 мин, в надосадочную жидкость добавляют пенициллин из расчета 1000 ЕД и стрептомицина 500 мкг на 1 мл, выдерживают при комнатной температуре в течение 2 ч и проверяют на стерильность (методом посева на МПБ, МПА, среду Китта — Тароцци). 10 мл указанной надосадочной жидкости вводят через рот одной свиноматке или поросятам от одной свиноматки (первая группа). Контролем служит вторая супоросная свиноматка или незараженные поросята второй свиноматки (вторая группа). 6.2. Биопробу считают положительной, если через 24 ч (реже через 48 ч) после заражения поросята, родившиеся от зараженной свиноматки, или поросята первой группы заболевают с клиникой вирусного гастроэнтерита свиней. В сомнительных случаях проводят исследование органов от вынужденно убитых в агональном состоянии поросят подопытной группы на наличие вируса этой болезни методом ИФ и РН. [стр. 326 ⇒]

Результат считается положительным при нарастании титра антител в парных сыворотках в 4 раза и более или при обнаружении титров антител 1:32 и выше в 50% и более сывороток крови однократно обследованных животных. 6. Постановка биопробы. 6.1. Биопробу ставят на здоровых поросятах 2...4месячного возраста из благополучного по инфекционным болезням животных хозяйства. Для заражения и контроля используют по 2 поросенка. 6.2. Подопытных поросят заражают 5%ной суспензией головного и спинного мозга от убитых больных свиней или вируссодержащей культуральной жидкостью. Суспензию центрифугируют при 3 тыс. об/мин в течение 30 мин, в надосадочную жидкость добавляют пенициллин из расчета 1000 ЕД и стрептомицина 500 мкг на 1 мл, выдерживают при комнатной температуре в течение 2 ч и проверяют на отсутствие бактериальной флоры (посев на МПА, МПБ, МППБ). Надосадочную жидкость вводят подопытным поросятам по 0,2...0,4 мл интрацеребрально и по 1 мл на скарифицированную слизистую каждой ноздри. При заражении подопытных поросят вируссодержащей жидкостью доза ее и метод заражения те же, что и при заражении суспензией. Наблюдение за подопытными и контрольными животными ведут в течение 1 мес. Животных содержат в изолированных условиях. 6.3. Биопробу считают положительной при развитии у зараженных животных клинических признаков энзоотического энцефаломиелита свиней и отсутствии таких признаков у контрольных. 7. Сроки исследования. 7.1. Сроки исследования методом иммунофлуоресценции — 1...2 сут, по выделению и идентификации вируса энзоотического энцефаломиелита — 10...30 сут, по выявлению типоспецифических антител в сыворотках крови — 3...14 сут, постановка биопробы — 1 мес. (1). [стр. 390 ⇒]

..25е сутки) в разведении 1:8 и выше, свидетельствует об обнаружении специфических антител к вирусу болезни Тешена. 6. Постановка биопробы на животных. 6.1. Для постанови биопробы используют 4 здоровых поросят 2...4месячного возраста, полученных из хозяйств, благополучных по болезни Тешена. 6.2. Животных помещают в изолированные боксы отдельных помещений по два подсвинка в каждый. Содержание и кормление животных должны соответствовать зоотехническим нормам. 6.3. Непосредственно перед введением готовят экстракты 20%ных суспензий проб нервной ткани животных (пп. 3.4, 3.5), подозреваемых в заболевании болезнью Тешена, при этом общий объем смеси суспензий должен быть не менее 15 см3. 6.4. Перед введением материала берут пробы крови и получают сыворотку по п. 3.2. («нулевая» сыворотка). Подготовленный материал вводят 2 животным интраназально в объеме 5...10 см3 каждому поросенку. За животными ведут клиническое наблюдение с ежедневным измерением температуры тела в течение 30 сут. При отсутствии клинических признаков болезни или выздоровлении на 30е сутки у животных отбирают пробы крови для получения сыворотки и постановки реакции нейтрализации. 6.5. В случае установления заболевания поросят, сопровождающегося повышением температуры до 40,5...41°C, угнетением, отсутствием аппетита, легкого пареза, переходящего в паралич, животных убивают в стадии агонии, отбирают пробы нервной ткани головного и спинного мозга (п. 3.1) и проводят выделение и идентификацию вируса по пп. 4.1, 4.2. 6.6. В случае отсутствия клинических признаков заболевания или выздоровления животных исследуют сыворотки проб крови (п. 3.2) в реакции нейтрализации. Реакцию нейтрализации ставит по п. 5.3, при этом исследуемые сыворотки берут в двукратных разведениях от 1:8 до 1:256. [стр. 397 ⇒]

7. В случае получения положительных результатов при выделении и идентификации вируса из патологического материала или при обнаружении реакцией нейтрализации специфических антител к вирусу болезни Тешена в сыворотках проб крови, полученных на 30е сутки в разведении 1:8 и выше, результат биопробы считают положительным (наличие болезни Тешена), при получении отрицательных результатов — отрицательным (отсутствие болезни Тешена). 7. Постановка лабораторного диагноза. Диагноз на болезнь Тешена считают установленным в случае: n выделения и идентификации вируса болезни Тешена из проб головного и спинного мозга; n обнаружения специфических антител в сыворотках, полученных от свиней из хозяйств, не применяющих вакцинацию против болезни Тешена в разведении 1:8 и выше; n установления четырехкратно увеличения титра антител; n получения положительных результатов биопробы на животных. 8. Сроки исследований: n вирусологических — 8...32 сут; n серологических — 2...3 сут; n биопробы — 30...45 сут. С утверждением настоящих «Методических указаний» на территории Российской Федерации утрачивают силу «Временные методические указания по лабораторной диагностике болезни Тешена» от 24 января 1996 г. Методические указания по лабораторной диагностике болезни Тешена разработаны в лаборатории «Диагностика» Всероссийского научноисследовательского института ветеринарной вирусологии и микробиологии (заведующий лабораторией, доктор ветеринарных наук В. В. Куриннов; старший научный сотрудник, кандидат биологических наук Е. А. Балашова). [стр. 398 ⇒]

Постановку биопробы проводят только в сомнитель" ных случаях (при отсутствии клинических признаков и па" тологоанатомических изменений у птиц или при выделе" нии вируса из гомогенатов исследуемых органов только в разведении 1:10). Биопробу проводят на неиммунной к болезни Ньюкасла или классической чуме птице того же возраста и породы, на которой установлено заболевание. Перед постановкой бнопробы птиц проверяют на отсут" ствие в крови антигемагглютининов (см. раздел III). Четырем птицам (у которых не обнаружено в крови ан" тигемагглютининов) внутримышечно вводят 10%"ную сус" пензию исследуемых органов или аллантоисную вируссо" держащую жидкость. За зараженной птицей устанавлива" ют наблюдение в течение 10 дней. 9. При наличии в исследуемом материале вирулентно" го вируса болезни Ньюкасла птица заболевает через 3...7 дней после заражения и погибает через 1...5 дней после начала заболевания, при классической чуме птица забо" левает через 1...5 дней после заражения и погибает через 10...72 ч после проявления клинических признаков забо" левания. 10. При отрицательном результате биопробы заражен" ные птицы должны оставаться живыми. При гибели хотя бы одной из 4 зараженных птиц биопроба считается поло" жительной при условии выделения вируса, как изложено в разделе I. III. ТИПИРОВАНИЕ ВЫДЕЛЕННОГО ВОЗБУДИТЕЛЯ В РЕАКЦИЯХ ЗАДЕРЖКИ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ, НЕЙТРАЛИЗАЦИИ И СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА... [стр. 457 ⇒]

Смотреть страницы где упоминается термин "биопроба": [484] [531] [532] [539] [602] [603] [616] [16] [17] [4] [5] [7] [9] [10] [22] [44] [60] [86] [24] [627] [93] [366] [75] [10] [157] [15] [57] [86] [66] [84] [101] [137] [138] [149] [151] [49] [155] [27] [31] [5] [123] [375] [160] [28] [10] [12] [115] [1] [1] [1]