Справочник врача 21

Поиск по медицинской литературе


Гемагглютинация




Мазки высушивают на воздухе и фиксируют спиртом. 6. Фиксированные мазки окрашивают по Гимзе или обрабатывают антителами, меченными флюоресцентным красителем. 7. Для получения надежных результатов соскоб производят трижды. В. Продукцию антител к вирусным антигенам можно оценить с помощью реакции нейтрализации, реакции торможения гемагглютинации, реакции связывания комплемента и твердофазного ИФА. Пробы крови (2—10 мл) забирают на ранней стадии заболевания и спустя 2—3 нед. В стерильных условиях получают сыворотку, помещают ее в стерильную пробирку и до отправки в лабораторию хранят в холодильнике или замораживают (–20°C). Диагностически значимым считается четырехкратное повышение титра антител в ходе заболевания. 1. Реакция связывания комплемента (см. гл. 22, п. III.Д). 2. Реакция нейтрализации — высокоспецифичный метод, основанный на связывании вируса антителами и его нейтрализации. Метод позволяет определить уровень противовирусных антител и способность исследуемой сыворотки нейтрализовать вирусы. Суть метода заключается в следующем: 1) производят серийные разведения исследуемой сыворотки; 2) разные разведения сыворотки смешивают с известным количеством вируса; 3) сыворотку добавляют к культуре клеток, восприимчивой к данному вирусу; 4) нейтрализующую активность сыворотки оценивают по снижению способности вирусов инфицировать культуру клеток. 3. Реакция торможения гемагглютинации — высокоспецифичный и чувствительный метод, позволяющий определить даже незначительное количество противовирусных антител в биологических жидкостях. Этот метод основан на способности некоторых вирусов сорбироваться на эритроцитах, в частности на человеческих эритроцитах группы 0 и куриных эритроцитах, и вызывать гемагглютинацию. Если исследуемая биологическая жидкость содержит противовирусные антитела, при ее добавлении к вирусам будет наблюдаться торможение гемагглютинации. Чем выше содержание противовирусных антител в исследуемой жидкости, тем сильнее подавляется гемагглютинация. Г. Для экспресс-диагностики вирусных инфекций применяют серологические методы, основанные на применении стандартных противовирусных антител. Эти методы перечислены ниже. 1. РИА. 2. Иммунофлюоресцентный анализ. 3. Твердофазный ИФА. Д. Инфекционный мононуклеоз вызывает вирус Эпштейна—Барр. Заболевание обычно возникает в детском и молодом возрасте. К характерным проявлениям инфекционного мононуклеоза относятся лихорадка, боль в горле, увеличение лимфоузлов, спленомегалия, лимфоцитоз. Поскольку сходная клиническая картина наблюдается также при цитомегаловирусной инфекции, бруцеллезе, туляремии, остром токсоплазмозе и на ранних стадиях краснухи, для диагностики инфекционного мононуклеоза используют серологические методы. 1. Гетерофильные антитела — IgM, взаимодействующие с антигенами животных неродственных видов, например барана или быка. Эти антитела выявляются примерно у 90% больных инфекционным мононуклеозом. Гетерофильные антитела в низком титре могут присутствовать и у здоровых людей. а. Проба Пауля—Буннелля — стандартный метод лабораторной диагностики инфекционного мононуклеоза. Он заключается в выявлении гетерофильных антител к эритроцитам барана с помощью реакции гемагглютинации. Гетерофильные антитела при инфекционном мононуклеозе отличаются от гетерофильных антител, присутствующих в сыворотке здоровых и больных сывороточной болезнью, по способности абсорбироваться тканью почек морской свинки и эритроцитами быка (см. табл. 22.3). Диагностически значимым считается титр 1:128—1:256. Гетерофильные антитела обычно обнаруживают через 3—4 нед после начала заболевания. Реакция Пауля—Буннелля бывает положительной при лейкозах, вирусных гепатитах, цитомегаловирусной инфекции, лимфоме Беркитта, ревматоидном артрите и после введения иммунных сывороток. Титр антител не отражает тяжести заболевания, однако при измерении в динамике позволяет следить за течением заболевания. б. Экспресс-тест на гетерофильные антитела (Моно-Тест, Уэмпоул Лэборэтрис). Гетерофильные антитела в этом исследовании выявляются при агглютинации стабилизированных формалином эритроцитов лошади. Абсорбцию тканью почек морской свинки и эритроцитами быка не проводят. 2. Специальные серологические методы. Инфекционный мононуклеоз не всегда сопровождается появлением гетерофильных антител. Они, в частности, отсутствуют у детей. В этом случае применяют следующие серологические методы. а. Антитела к капсидному антигену вируса Эпштейна—Барр выявляют методом иммунофлюоресценции. На ранней стадии заболевания в сыворотке больного появляются IgM к капсидному антигену. Их титр становится максимальным через 2 нед после начала заболевания и снижается в течение 2—3 мес. Присутствие IgM к капсидному антигену вируса Эпштейна—Барр свидетельствует о недавнем заражении, а IgG — о ранее перенесенном заболевании. б. Антитела к ранним антигенам вируса Эпштейна—Барр выявляются методом непрямой иммунофлюоресценции. Титр этих антител становится максимальным через 2—3 нед после начала заболевания. в. Антитела к ядерному антигену вируса Эпштейна—Барр выявляются методом непрямой иммунофлюоресценции с применением комплемента и меченых антител к нему. Антитела к ядерному антигену появляются примерно через 4 нед после начала заболевания и сохраняются на протяжении всей жизни. Е. Вирусные гепатиты — системные инфекционные заболевания, проявляющиеся преимущественным поражением печени. Их вызывают вирусы гепатитов A, B, C, D, E, вирус Эпштейна—Барр, цитомегаловирус, вирус varicella-zoster, аденовирусы. 1. Вирус гепатита A — РНК-содержащий вирус размером 27 нм. Наиболее достоверный лабораторный признак заболевания — выявление IgM к вирусу гепатита A с помощью РИА или твердофазного ИФА. Реже используется... [стр. 213 ⇒]

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Реакция была разработана T. Rathlev в 1965–1967 гг. Антигеном в реакции выступают эритроциты барана или птиц, обработанные вначале формалином, затем танином и сенсибилизированные антигеном бледной трепонемы (штамм Никольс), обработанным ультразвуком. Принцип реакции состоит в том, что при добавлении исследуемой сыворотки в лунку с антигеном может образовываться комплекс антиген-антитело, связанный с поверхностью носителя, при наличии специфических противотрепонемных антител в сыворотке. Визуально это проявляется склеиванием эритроцитов, т. е. гемагглютинацией. В данном случае имеет место непрямая, или пассивная, гемагглютинация, так как антиген соединяется с носителем (эритроциты барана, на... [стр. 80 ⇒]

— подострый склерозирующий панэнцефалит —пентозофосфат — полимеразная цепная реакция — реакция агглютинации —реакция агрегат-гемагглютинации — реакция биологической нейтрализации РБТЛ — реакция бласттрансформации лимфоцитов РГА — реакция гемагглютинации РИА — радиоиммунный анализ РИТ — реакция иммобилизации трепонем РИФ — реакция иммунофлюоресценции РКЭ — развивающийся куриный эмбрион PH — реакция нейтрализации РНГА (РПГА) — реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации РНИФ — реакция непрямой иммунофлюоресценции РНК — рибонуклеиновая кислота РНП — рибонуклеопротеин РП — реакция преципитации РРГ — реакция радикального гемолиза РС-вирус — респираторно-синцитиальный вирус РСК — реакция связывания комплемента PТГA —реакция торможения гемагглютинации СПИД — синдром приобретенного иммунодефицита ТФР — трансформирующий фактор роста УПМ — условно-патогенные микробы ФДФ — фруктозодифосфат ФНО — фактор некроза опухолей цАМФ — циклический аденозинмонофосфат ЦМВ — цитомегаловирус ЦНС — центральная нервная система ЦПД — цитопатогенное действие ЦПМ — цитоплазматическая мембрана ЦПЭ —цитопатический эффект ЭГКП —энтерогеморрагические кишечные палочки ЭИКП — энтероинвазивные кишечные палочки ЭПКП —энтеропатогенные кишечные палочки ЭТКП — энтеротоксигенные кишечные палочки BCR — В-клеточный рецептор TCR — Т-клеточный рецептор TTV — ТТ-вирус... [стр. 14 ⇒]

— подострый склерозирующий панэнцефалит ПФ — пентозофосфат ПЦР — полимеразная цепная реакция РА — реакция агглютинации РАГА — реакция агрегат-гемагглютинации РБН — реакция биологической нейтрализации РБТЛ — реакция бластгрансформации лимфоцитов РГА — реакция гемагглютинации РИА — радиоиммунный анализ РИТ — реакция иммобилизации трепонем РИФ — реакция иммунофлюоресценции РКЭ — развивающийся куриный эмбрион РП — реакция нейтрализации РИГА (РПГА)1— реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации РНИФ — реакция непрямой иммунофлюоресценции РНК — рибонуклеиновая кислота РНП — рибонуклеопротеин РП — реакция преципитации РРГ — реакция радикального гемолиза РС-вирус — респираторно-синцитиальный вирус РСК — реакция связывания комплемента РТГА — реакция торможения гемагглютинации СПИД — синдром приобретенного иммунодефицита ТФР — трансформирующий фактор роста УПМ — условно-патогенные микробы ФДФ — фруктозодифосфат ФНО — фактор некроза опухолей цАМФ — циклический аденозинмонофосфат ЦМВ — цитомегаловирус ЦНС — центральная нервная система — цитопатогенное действие ЦПД ЦПМ — цитоплазматическая мембрана ЦПЭ — цитопатический эффект ЭГКП — энтерогеморрагические кишечные палочки эи к п — энтероинвазивные кишечные палочки эпкп — энтеропатогенные кишечные палочки эткп — энтеротоксигенные кишечные палочки BCR — В-клеточный рецептор TCR — Т-клеточный рецептор TTV — ТТ-вирус... [стр. 15 ⇒]

Рабдовирусы 570 Радиоиммунологический метод 292 Размножение бактерий 62 Разноцветный лишай 616 Реагин 239 Реакция агглютинации 283 —гемагглютинации 75 —гемадсолрбции 77 —двойной иммунодиффузии 287 —иммунофлюоресценции 289 —коагглютинации 285 — Кумбса 285 — Манту 459 — Мицуды 465 —нейтрализации 289 —непрямой гемагглютинации 285 —ориентировочной агглютинации 284 —преципитации 286 —радиального гемолиза 289 —радиальной иммунодиффузии 287 —связывания комплемента 288 —торможения гемагглютинации 285 — Фернандеса 465 —флоккуляции 288 — Фрея 509... [стр. 698 ⇒]

Реакции гемагглютинации Собственно феномен гемагглютинации заключается в объединении эритроцитов в видимые невооруженным глазом агрегаты и более быстром, чем оседание свободных эритроцитов, осаждении их из раствора. Помимо открытых еще К. Ландштейнером агглютининов α и β агрегирование эритроцитов могут вызывать антитела к различным эритроцитарным антигенам, лектины растительного происхождения, антигены и жгутики бактерий некоторых видов, некоторые вирусы, в том числе и вирусы человека. Такую гемагглютинацию принято называть прямой или активной (ил. 50). Кроме этого, при закреплении на поверхности эритроцитов изначально несвойственных им антигенов, возможно агрегирование и осаждение их антителами, комплементарными таким антигенам. В этом случае агглютинацию называют непрямой или пассивной. Осаждение на поверхность эритроцитов таких, условно говоря, чужих для них антигенов может происходить естественным путем (например, неполных антител из плазмы крови) или в результате направленного экспе132... [стр. 133 ⇒]

Гемагглютинацию можно использовать для выявления определенных возбудителей болезней и антител, вырабатываемых под их воздействием. В первом случае ставится реакция прямой активной гемагглютинации. Например, для выявления в анализируемой жидкости пара- и ортомиксовирусов ее смешивают с 1 % суспензией отмытых физиологическим раствором куриных эритроцитов. Их агглютинация будет свидетельствовать о наличии вируса. Такая реакция фактически не относится к реакциям с применением антител, поскольку здесь собственно вирусы являются агглютинирующим фактором. Во втором случае используется торможение (ингибирование) геамагглютинации. Для ее постановки (ил. 51 В) в систему прямой гемагглютинации, содержащую конкретный гемагглютинирующий вирус и куриные эритроциты, вносят анализируемую сыворотку. В случае наличия в ней антител, комплементарных присутствующему в системе вирусу, вирус будет инактивирован и, следовательно, не сможет вызвать агглютинацию. Используя торможение гемагглютинации, можно выявлять в анализируемых суспензиях присутствующий в очень небольших концентрациях антиген. В частности, для определения некоторых гормонов разработан метод РТПГА – реакция торможения пассивной гемагглютинации (ил. 51 А). В этом случае используют эритроциты, на поверхности которых сорбирован определенный гормон (сенсибилизированные гормоном эритроциты), и антитела, специфичные к этому гормону. Анализируемую на присутствие такого же гормона жидкость смешивают с антителами. Параллельно в качестве контроля с таким же объемом суспензии антител смешивают эквивалентное количество физиологического раствора. По истечении времени, необходимого для связывания гормона с антителами, в обе смеси добавляют суспензию сенсибилизированных гормоном эритроцитов. Если в контроле агглютинация происходит, а в опыте – нет или наблюдается снижение ее эффективности, делается вывод о присутствии гормона в анализируемой жидкости, поскольку уже связанные с гормоном антитела не могут агглютинировать эритроциты. [стр. 135 ⇒]

Реакция гемагглютинации Реакция прямой гемагглютинации Гемагглютинацияэто склеивание эритроцитов, приводящее к образованию конгломератов, видимых невооруженным глазом (зона осадка более широкая, чем та, которую образуют эритроциты, если просто оседают на дно). Может быть прямой, непрямой и обратной непрямой. Применение: выявление антител к тиреоглобулину и микросомальным антигенам. Достоинство – простота. Недостатки – меньшая чувствительность по сравнению с радиоиммунным анализом (РИА) и твердофазным иммуноферментным анализом (ИФА). Реакция прямой гемагглютинации – антитела (гемагглютинины) взаимодействуют с антигенами, находящимися на поверхности эритроцитов. Методика: подготовка эритроцитов (отделение эритроцитов от других компонентов крови; если эритроциты были законсервированы, их отмывают, но нужно помнить, что отмытые эритроциты через 2–3 суток дают спонтанную агглютинацию); разведение и внесение испытуемых сывороток в лунки микропанелей (во все лунки вносят разведения сыворотки, а в последнюю – лунку контроля эритроцитов – изотонический раствор NaCl); добавление эритроцитов, перемешивание содержимого лунок и инкубирование смесей; учет реакции и оценка полученных данных. Чем сильнее агглютинация эритроцитов, тем больше по площади и тоньше (светлее) осадок эритроцитов. [стр. 90 ⇒]

Разные родственные микроорганизмы могут агглютинироваться одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, что затрудняет их идентификацию. Поэтому используются адсорбированные агглютинирующие сыворотки, из которых удалены перекрестно реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыворотках сохраняются антитела, специфичные только к данному виду микроорганизма. Реакция гемагглютинации (РГА) Различают прямую и непрямую РГА. При прямой гемагглютинации происходит подавление вирусов антителами иммунной сыворотки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты. Эту реакцию широко используют для диагностики некоторых вирусных инфекций, например гриппа. При реакции непрямой гемагглютинации (РИГА) происходит склеивание эритроцитов при адсорбции на них определенных антигенов. При этом эритроциты оседают на дно пробирки в виде фестончатого осадка. РИГА применяют для диагностики различных инфекционных заболеваний, для выявления чувствительности к лекарственным препаратам и гормонам. Для определения групп крови применяется реакция агглютинации эритроцитов, при этом используются антитела к группам крови А(Н), В(Ш). Контролем служит сыворотка, не содержащая антител, т. е. AB(IV) группы крови, антигены, содержащиеся в эритроцитах групп А(Н), B(III). О-отрицательный контроль не содержит антигенов, т. е. используют эритроциты группы 0(1). Реакция преципитации Эта реакция основана на выпадении в осадок комплекса растворимого антигена со специфическими антителами. Этот 120... [стр. 126 ⇒]

1.3 Реакция гемагглютинации при определении группы крови человека Введение. Обусловленное реакцией АГ-АТ видимое слипание эритроцитов называется г е м а г г л ю т и н а ц и е й (ГА). Механизм ГА определяется первичным связыванием специфических АТ с антигенными детерминантами на поверхности эритроцитов, что вызывает деформацию их клеточных мембран и исчезновение дзета-потенциала, в норме препятствующего спонтанной агрегации данных клеток. Эритроциты сближаются так, что поли- или бивалентные АТ образуют перекрестные связи с различными эритроцитами (рисунок 1а). Опосредованное АТ образование множественных поперечных связей между эритроцитами приводит к формированию их крупных конгломератов и макроскопически выражается как гемагглютинация. С использованием ГА можно выявлять антитела к различным антигенам мембраны эритроцитов и, соответственно, сами эритроцитарные антигены. В частности, реакция гемагглютинации лежит в основе определения групп крови человека по наличию агглютиногенов (антигенов) системы АВО на мембране эритроцитов, а также агглютининов (антител) – белков глобулярной фракции плазмы/сыворотки крови. Различные комбинации агглютининов и агглютиногенов формируют четыре группы крови (таблица 5). [стр. 11 ⇒]

Внимание! В случае если с использованием сывороток из двух разных серий получены различные результаты ГА, исследование признается ошибочным. Исследование необходимо повторить. В случае если гемагглютинация произошла во всех лунках (кровь предположительно относится к IV группе) необходимо в нижнюю, ранее незадействованную лунку планшета внести сыворотку IV группы и исследуемую кровь отнести к IV группе только, если и в этом случае реакция гемагглютинации даст отрицательный результат. Если результат ГА положителен, исследование признается ошибочным. Результат реакции зарисуйте и оформите в виде таблицы 6. Таблица 6 – Использование реакции гемагглютинации для определения группы крови Сыворотки, содержащие гемагглютинины... [стр. 14 ⇒]

РНГА обычно проводят в количественном варианте, результат которого оценивается последним титром (кратностью разведения – 1:10; 1:20 и т.д.) антител, еще способным вызывать реакцию непрямой гемагглютинации. Для этого исследуемую сыворотку прогревают 30 мин при 56 ºС для инактивации белков системы комплемента, истощают эритроцитами использованными для создания диагностикума в течение 1 часа при 37 ºС для удаления неспецифических гемагглютининов и затем разводят изотоническим раствором хлорида натрия до концентрации от 1:10 до 1:1280 от исходного, создавая серию последовательных разведений в U-образных лунках титрационной пластины. К каждому разведению сыворотки добавляют равный объем 1 % эритроцитов с адсорбированным на их поверхности антигеном. Учет результата проводят через 2 часа инкубации при 37 ºС и вторично через 16-20 часов инкубации при комнатной температуре. Наиболее часто реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации используется для выявления специфических антител в сыворотке крови при оценке напряженности поствакцинального иммунитета к ряду инфекций, для которых разработаны методы плановой иммунизации: столбняке, дифтерии, кори, эпидемическом паротите и др. Выявляемые титры антител в данном случае позволяют оценить уровень защищенности вакцинированного организма от действия возбудителей этих инфекционных заболеваний или их токсинов. Цель работы: Изучить реакцию непрямой (пассивной) гемагглютинации на примере определения титра антител к возбудителю кори. Методика выполнения работы (демонстрация). 1) Рассмотрите планшет для постановки реакции РHГА и оцените результат реакции в отдельных лунках. Оценка результата зависит от характера осадка эритроцитов (рисунок 3). При резко положительной реакции (3 плюса) эритроциты равномерно покрывают всю лунку пластины в виде «зонтика» с неровными краями; при реакции на 2 плюса на фоне склеившихся эритроцитов в центре имеется небольшое кольцо из осевших под действием силы тяжести, но несклеившихся эритроцитов; несколько меньшую степень агглютинации с большим количеством несклеившихся эритроцитов оценивают как положительную реакцию на 1 плюс; при отрицательной реакции скопление эритроцитов имеет вид маленького диска («пуговки»). Контролем специфичности реакции служит результат РПГА с заведомо иммунными сыворотками с установленным титром (положительный контроль). Контролем спонтанной агглютинации эритроцитов служат лунки со взвесью сенсибилизированных эритроцитов в неиммунной «нормальной» сыворотке (отрицательный контроль). Титром РНГА считается последнее разведение исследуемой сыворотки, еще вызывающей склеивание... [стр. 15 ⇒]

ЛФК — лечебная физкультура МНН — международное непатентованное название МРТ — магнитно-резонансная томография НИОТ — нуклеозидные/нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы ННИОТ — ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы НПВС — нестероидные противовоспалительные средства ОГЛ — омская геморрагическая лихорадка ОГВ — острый гепатит B ОГС — острый гепатит C ОДН — острая дыхательная недостаточность ОМО — организационно-методический отдел ОНГМ — отёк-набухание головного мозга ОПН — острая почечная недостаточность ОПЭ — острая печёночная энцефалопатия ОРВИ — острая респираторная вирусная инфекция ОРЗ — острое респираторное заболевание ОРИТ — отделение реанимации и интенсивной терапии ПДС — противодифтерийная сыворотка ПТИ — пищевая токсикоинфекция ПЦР — полимеразная цепная реакция РА — реакции агглютинации РАЛ — реакция агглютинации и лизиса РДС — респираторный дистресс-синдром РИФ — реакция иммунофлюоресценции РКА — реакция коагглютинации РЛА — реакция латекс-агглютинации РН — реакция нейтрализации РНГА — реакция непрямой гемагглютинации РНИФ — реакция непрямой иммунофлюоресценции РПГА — реакция пассивной гемагглютинации РСК — реакция связывания комплемента РТГА — реакция торможения гемагглютинации СМЖ — спинномозговая жидкость СОЭ — скорость оседания эритроцитов СТШ — синдром токсического шока СЭН — санитарно-эпидемический надзор ТОРС — тяжёлый острый респираторный синдром УЗИ — ультразвуковое исследование ФНО — фактор некроза опухоли ХГВ — хронический гепатит B ХГС — хронический гепатит C цАМФ — циклический 3′, 5′-аденозинмонофосфат ЦИК — циркулирующий иммунный комплекс ЦМВ — цитомегаловирус ЦМВИ — цитомегаловирусная инфекция ЦНС — центральная нервная система ЩФ — щелочная фосфатаза ЭАКП — энтероадгезивная кишечная палочка ЭБВ — вирус Эпстайна–Барр ЭГДС — эзофагогастродуоденоскопия ЭГКП — энтерогеморрагическая кишечная палочка ЭИКП — энтероинвазивная кишечная палочка ЭКГ — электрокардиография... [стр. 16 ⇒]

РА применяют для диагностики бруцеллёза (реакции Райта, Хеддльсона) , туляремии, лептоспироза [реакция агглютинации и лизиса (РАЛ) лептоспир], листериоза, шигеллёза, иерсиниоза, псевдотуберкулёза и др. Это наиболее исторически ранний метод серологической диагностики, имеющий сравнительно невысокую чувствительность и специфичность и вытесняемый более современными методами. Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации Для постановки реакции непрямой гемагглютинации [(РНГА) или реакции пассивной гемагглютинации (РПГА)] используют эритроциты животных (барана, обезьяны, морской свинки, некоторых птиц), сенсибилизированные антителами или антигеном методом инкубации взвеси эритроцитов и раствора антигена или иммунной сыворотки (γ-глобулиновой фракции). Диагностикумы, полученные на основе сенсибилизированных антигенами эритроцитов, называют антигенными эритроцитарными диагностикумами, например: эритроцитарные шигеллёзные диагностикумы, эритроцитарные сальмонеллёзные O-диагностикумы, эритроцитарные псевдотуберкулёзные, иерсиниозные, дифтерийные и др. Они предназначены для определения антител в серийных разведениях сывороток крови (рис. 5-5). [стр. 71 ⇒]

Диспансеризация Переболевшие брюшным тифом независимо от профессии и занятости после выписки из больницы подлежат диспансерному наблюдению в КИЗе поликлиники на протяжении 3 мес. Для своевременного выявления рецидива за реконвалесцентами устанавливают медицинское наблюдение с термометрией один раз в неделю в первые 2 мес и один раз в 2 нед в течение 3-го месяца. У всех переболевших брюшным тифом (кроме работников пищевых предприятий и лиц, приравненных к ним) в течение 3-месячного диспансерного наблюдения ежемесячно производят однократное бактериологическое исследование кала и мочи, а к концу третьего месяца дополнительно  — посев жёлчи и реакцию Vi-гемагглютинации. Далее эти лица состоят на учёте органов санитарноэпидемического надзора на протяжении двух лет. За этот период у них два раза в год производят бактериологическое исследование кала и мочи, а в конце срока наблюдения — посев жёлчи. При отрицательных результатах бактериологических исследований переболевших снимают с учёта. Реконвалесцентов брюшного тифа из числа работников пищевых предприятий и лиц, приравненных к ним, не допускают к работе по специальности в течение месяца после выписки из больницы. В это время, помимо медицинского наблюдения, необходимо проводить пятикратное бактериологическое исследование кала и мочи с интервалом 1–2 дня, однократный посев жёлчи и реакцию Vi-гемагглютинации. Лиц с положительной реакцией Vi-гемагглютинации не допускают к работе. У них проводят дополнительное бактериологическое исследование выделений не менее пяти раз и жёлчи — один раз. Только при отрицательных результатах бактериологического исследования и хорошем самочувствии таких реконвалесцентов допускают к работе по специальности. При получении отрицательных результатов реконвалесцентов допускают к работе в пищевые и приравненные к ним учреждения с обязательным ежемесячным бактериологическим исследованием кала и мочи в течение года и к концу третьего месяца — с посевом жёлчи и постановкой реакции Vi-гемагглютинации. В последующем эти лица состоят на учёте в КИЗе в течение 5 лет с ежеквартальным бактериологическим исследованием кала и мочи, а затем на протяжении всей трудовой деятельности у них ежегодно двукратно производят бактериологическое исследование кала и мочи. Хронические бактерионосители тифозных микробов пожизненно пребывают на учёте органов санитарно-эпидемического надзора и в КИЗе и два раза в год подвергаются бактериологическому исследованию и клиническому обследованию. На таком же учёте состоят и подлежат аналогичному обследованию реконвалесценты брюшного тифа, у которых во время пребывания в стационаре были выделены брюшнотифозные микробы из жёлчи. Хронических бактерионосителей, а также проживающих вместе с ними лиц отстраняют от работы на предприятиях пищевой промышленности, общественного питания и торговли, в медицинских, санаторно-курортных учреждениях, аптеках и др. [стр. 303 ⇒]

...колониеобразующая единица классические серологические реакции компьютерная томография клещевой энцефалит микобактерии туберкулеза минимальная подавляющая концентрация магнитно-резонансная томография метод флюоресцирующих антител нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы оральная полиомиелитная вакцина острая респираторная вирусная инфекция острая респираторная инфекция парааминосалициловая кислота противоботулиническая сыворотка полиорганная недостаточность противостолбнячная сыворотка противостолбнячный человеческий иммуноглобулин пищевая токсикоинфекция противотуберкулезный препарат полимеразная цепная реакция полиэтиленгликоль реакция агглютинации реакция агглютинации риккетсий радиоиммунный анализ реакция иммобилизации трепонем реакция иммунофлюоресценции реакция нейтрализации реакция непрямой гемагглютинации реакция непрямой иммунофлюоресценции реакция прямой гемагглютинации респираторно-синцитиальный вирус реакция связывания комплемента реакция торможения гемагглютинации спинномозговая жидкость тифопаратифозные заболевания тромбоэмболия легочной артерии ультрафиолетовое облучение хронический гепатит В цитомегаловирус энтероагрегативные кишечные палочки энтерогеморрагические кишечные палочки энтероинвазивные кишечные палочки энтеропатогенные кишечные палочки энтеротоксигенные кишечные палочки электроэнцефалография цервикальная интраэпителиальная неоплазия... [стр. 10 ⇒]

Лабораторные исследования, направленные на выявление и подтверждение катарально-респираторного синдрома Решающую роль в подтверждении диагноза заболеваний с катарально-респираторным синдромом играют методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний, при которых катарально-респираторный синдром является одним из ведущих синдромов. Методы диагностики: бактериологический, иммунофлюоресценции, реакции непрямой гемагглютинации, торможения гемагглютинации, пассивной гемагглютинации, РСК, ИФА, ПЦР. Информативен детальный осмотр зева, обязательно в условиях направленного освещения. Перечень основных нозологических форм инфекционных болезней, течение которых сопровождается развитием катарально-респираторно-го синдрома: • острые респираторные вирусные инфекции (парагрипп, аденовирусная инфекция, коронавирусная инфекция, риновирусная инфекция, респираторно-синцитиальная инфекция, риновирусная инфекция, реовирусная инфекция); • грипп; • энтеровирусные инфекции; • корь; • краснуха; • герпесвирусные инфекции (цитомегаловирусная инфекция, инфекционный мононуклеоз); • менингококковый назофарингит; • тяжелый острый респираторный синдром. [стр. 28 ⇒]

КППК — контагиозная плевропневмония коз КР — кольцевая реакция КРС — крупный рогатый -кот КТ — культура тканей КЧС — классическая чума свиней КЭ — куриный эмбрион ME — международная единица МКМ — мясокостная мука МПА — мясопептонный агар МПБмясопептонный бульон МППБ — мясопептонный печеночный бульон МРС — мелкий рогатый скот МФА — метод флуоресцирующих антител МЭБ — международное эпизоотическое бюро НИВС — научно-исследовательская ветеринарная станция НИСХИ — научно-исследовательский сельскохозяйственный институт НПО — научно-производственное объединение ПВИС — парвовирусная инфекция свиней ПГ-3 — парагрипп-3 ПЗР — показатель задержки роста ПМВ — парамиксовирус ПМИ — пармиксовирусная инфекция ППД — протеин-пурифаед-дериват (сухой очищенный) ПЦР — полимеразная цепная реакция РА — реакция агглютинации РАВС — реакция агглютинации с вагинальной слизью РБП — роз-бенгал проба РГА — реакция гемагтлютинации РГАд — реакция гемадсорбции РДП — реакция диффузионной преципитации РДСК — реакция длительного связывания комплемента РЗГА — реакция задержки гемагглютинации РЗГАд — реакция задержки гемадсорбции РЗР — реакция задержки роста РИД — реакция иммунодиффузии РИФ — реакция иммунофлуоресценции РИЭОФ — реакция иммуноэлектроосмофореза РМ — респираторный микоплазмоз РМА — реакция микроагглютинации РНАт — реакция нейтрализации антител РНГА — реакция непрямой гемагглютинации РНК — рибонуклеиновая кислота РРСС — репродуктивно-респираторный синдром свиней РСИ — респираторно-синцитиальная инфекция РСК — реакция связывания комплемента РТГА — реакция торможения гемагглютинации РТГАд — реакция торможения гемадсорбции РТНГА — реакция торможения непрямой гемагглютинации РЭС — ретикулоэндотелиальная система СОЭ — скорость оседания эритроцитов СПФ — свободный от патогенной флоры ССЯ — синдром снижения яйценоскости ХАО — хорион-алантоисная оболочка ЦНС — центральная нервная система ЦПД — цитопатогенное действие ЭЭС — энтеровирусный энцефаломиелит свиней ЭЭМС — энзоотический энцефаломиелит свиней BSE — Bovine spongiform encephalopaty (губкообразная энцефалопатия КРС) ELISA — иммуноферментный анализ РгР — прион... [стр. 5 ⇒]

Мембрана микоплазм характеризуется высокой биологической активностью. Она регулирует процессы метаболизма в клетке, энергетический обмен, рецепцию токсинов, обеспечивает адсорбцию эритроцитов, эпителиальных клеток, спермиев. Таким образом, клетки микоплазм имеют сложную структуру, причем по химическому составу и другим показателям они существенно не отличаются от бактерий, за исключением одной особенности — у микоплазм отсутствуют клеточная стенка и связанные с ней белковые и липидные компоненты. Поскольку микоплазмы не имеют клеточной стенки, они растут медленно, поэтому для их выделения, культивирования и поддержания необходимы специальные питательные среды и особые условия. Патогенные штаммы для репликации нуждаются в сыворотке крови млекопитающих или ее компонентах, экстракте сердечной мышцы, пептонном, дрожжевом экстракте, а также компонентах мембранных липидов или их предшественниках, содержащих фактор роста, идентифицированный как липопротеид. По типу дыхания микроорганизмы семейства Mycoplasmataceae — аэробы. Наряду с биохимическими тестами определенное значение при изучении таксономических особенностей и дифференциации представителей семейства Mycoplasmataceae имеет определение их чувствительности к антибиотическим веществам, воздействующим на цитоплазматическую мембрану и внутриклеточные протеины. Микоплазмы обладают сложной антигенной структурой. Антигены локализуются в мембране или цитоплазме. По химическому составу они могут быть полисахаридными, протеиновыми или гликолипидными. Мембранные антигены играют очень важную роль в реакциях между микоплаз-мами и макроорганизмом. Для изучения антигенных свойств широко применяют серологические методы. Наибольшее признание среди серологических реакций получили реакции агглютинации (РА), связывания комплемента (РСК) и задержки (угнетения) роста (РЗР). Рекомендуется также использовать реакции гемагглютинации (РГА), задержки гемагглютинации (РЗГА), торможения непрямой (косвенной) гемагглютинации (РТНГА), задержки (угнетения) метаболизма (РЗМ), а также реакцию агглютинации с латексом (латекс-РА) и др. Чувствительность этих микробов к физическим и химическим воздействиям характеризуется большой гетерогенностью, которая зависит от видовой принадлежности, среды обитания, фазы роста и некоторых других факторов. Патогенное действие микоплазм на организм животного определяется способностью этих микроорганизмов прикрепляться к клеткам хозяина. В этом процессе участвуют гликопротеиды микоплазм, а также специальные органеллы, обнаруженные у некоторых представителей видов (М. gallisepticum, М. pulmonis, М. alvi). В распространении этих микробов в организме важную роль играют их активные движения. Микоплазмы, преодолевая тканевый барьер, проникают в кровеносное русло. В этом процессе важную роль играет капсула, гликолипиды которой токсичны для макроорганизма: они снижают фагоцитоз и блокируют иммунокомпе-тентную систему. Некоторые виды микоплазм (М. gallisepticum, М. neuro-lyticum) образуют токсины, увеличивающие проницаемость эндотелия капилляров, что обусловливает отечность различных тканей организма. В итоге развивается хроническая инфекция, нарушается иммунологическая реактивность, изменяется мембрана клеток макроорганизма. 4.2. КОНТАГИОЗНАЯ ПЛЕВРОПНЕВМОНИЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА... [стр. 193 ⇒]

Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз на коронавирус-ную инфекцию крупного рогатого скота ставят комплексно на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатоми-ческих изменений и результатов лабораторных исследований. В предварительной диагностике особое внимание обращают на стадийность развития клинической картины (обычно кишечный синдром предшествует респираторному) и отсутствие выраженной лихорадки. Возбудитель выделяют из энтероцитов кишечника и клеток эпителия респираторного тракта. У больных животных большое количество вирусных частиц выходит с фекалиями, что позволяет использовать метод электронной микроскопии. Для повышения чувствительности метода, особенно при малом содержании в фекалиях вирусных частиц, к суспензии фекалий добавляют специфическую антисыворотку. Индикацию коронавируса крупного рогатого скота проводят методами электронной микроскопии и иммунофлуоресценции фекалий, криосре-зов и в инфицированной культуре клеток. Для идентификации коронави-русов применяют реакции иммунофлуоресценции (РИФ), диффузионной преципитации (РДП), нейтрализации (РН), гемагглютинации (РГА), торможения гемагглютинации (PITA) и непрямой гемагглютинации (РИГА), метод иммуноферментного анализа (ИФА). В последние годы наиболее эффективным методом считают использование моноклональных антител. Биологическая промышленность выпускает наборы для диагностики коронавирусной инфекции крупного рогатого скота. Доказательство этиологической роли коронавирусов в острой кишечной, респираторной или кишечно-респираторной инфекции телят осуществляют в ретроспективной диагностике с парными сыворотками крови по обнаружению 4-кратного прироста титра антител в РИГА (РТГА), РДП, РН. Иммунитет, специфическая профилактика. После переболевания стойкий иммунитет к коронавирусной диарее телят сохраняется около 1 года. Колостральный иммунитет имеет особое значение и обеспечивает устойчивость новорожденного теленка к вирусу или снижает тяжесть переболевания. Для специфической профилактики за рубежом применяют живые (для телят) и инактивированные вакцины. Телят вакцинируют перорально после рождения, а стельных коров — парентерально для создания моло-зивного иммунитета. Кроме того, используют мультивалентную бычью коронавирусную вакцину для перорально-назального применения, которая содержит вирус типов I, II, III. В нашей стране применяют живую ассоциированную вакцину «Комбо-вак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторносинцитиальной, рота- и коронавирусной инфекций, а также вакцины ВНИИЗЖ: бивалентную против ротавирусной и коронавирусной инфекций крупного рогатого скота, сорбированную инакти-вированную и аналогичную против рота-, корона- и реовирусной инфекций. Разработана также ассоциированная инактивированная гидроокись-алюминиевая вакцина против рота-, корона-, герпесвирусной и эшерихи-озной диареи новорожденных телят. 343Профилактика. Своевременная диагностика и предупреждение заноса вируса в благополучные хозяйства — основа противоэпизоотических мероприятий. Всех вновь поступающих животных карантинируют. Телят содержат изолированно. Необходимо соблюдать ветеринарно-санитар-ные правила в родильных отделениях, систематически проводить дезинфекцию. Лечение. Для лечения телят 3... 15-дневного возраста можно использовать гипериммунную сыворотку, полученную от животных-доноров. Целесообразно выпаивать больным телятам богатые специфическими анти-гемагглютининами коронавируса молоко и молозиво от вакцинированных коров. Это позволяет снизить заболеваемость в 4 раза, летальность — на1б...17%. [стр. 279 ⇒]

РА - реакция агглютинации PH - реакция нейтрализации РНГА - реакция непрямой гемагглютинации РНИФ - реакция непрямой иммунофлюоресценции РНК - рибонуклеиновая кислота РПГА - реакция пассивной гемагглютинации РСК - реакция связывания комплемента РТГА - реакция торможения гемагглютинации САК - СПИД-ассоциированный комплекс СК - саркома Капоши СМФ - система мононуклеарных фагоцитов СОЭ - скорость оседания эритроцитов СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита ТОРС - тяжелый острый респираторный синдром УЗИ - ультразвуковое исследование ФАП - фельдшерско-акушерский пункт ХГВ - хронический гепатит В ЦГЭ - центр гигиены и эпидемиологии ЦМВ - цитомегаловирус ЦНС - центральная нервная система ЦСО - центральное стерилизационное отделение ЭКГ - электрокардиограмма ЯМРТ - ядерно-магнитно-резонансная томография... [стр. 7 ⇒]

П. Руднева и А.И. Хочева). При невозможности приема левомицетина внутрь из-за бессознательного состояния или рвоты назначается левомицетина натрия сукцинат по 0,75 или 1,0 г 3 раза в сутки внутримышечно. При отсутствии эффекта от левомицетина или непереносимости его назначается ампициллин по 0,5-1,0 г 4 раза в сутки внутрь или внутримышечно либо ципрофлоксацин по 0,5 г 2 раза в сутки до 10-12-го дня нормальной температуры. В сочетании с антибиотиками можно использовать химиопрепараты - фуразолидон по 0,2 г 34 раза в день, бисептол (0,48 г) по 2 таблетки 2 раза в день. Патогенетическая терапия направлена на устранение интоксикации и проводится путем внутривенного капельного введения кристаллоидных (физиологический раствор, «Трисоль», «Ацесоль» и др.) и коллоидных (гемодез, реополиглюкин) растворов. П р а в и л а в ы п и с к и и з с т а ц и о н а р а . Выписка реконвалесцентов из стационара проводится после полного клинического выздоровления, получения отрицательного результата трехкратного бактериологического исследования кала и мочи и однократного желчи, а также отрицательной реакции Vi-гемагглютинации, но не ранее 2123-го дня нормальной температуры, если больному проводилась антибиотикотерапия, и 14-го дня, если антибиотики не применялись. Первое бактериологическое исследование проводится не ранее чем через два дня после отмены антибиотика, а последующие - с интервалом в 1-2 дня. Диспансерное наблюдение реконвалесцентов проводится в КИЗе в течение трех месяцев, а затем они состоят на учете в ЦГЭ: непищевики - в течение двух лет, а работники пищевых предприятий - до шести лет с периодическим бактериологическим и серологическим (реакция Vi-гемагглютинации) обследованием. В КИЗе в течение трех месяцев диспансерного наблюдения ежемесячно проводится бактериологическое исследование кала и мочи, а к концу третьего месяца - дополнительно посев желчи и реакция Vi-гемагглютинации. В КИЗе помимо клинического осмотра и бактериологического исследования проводится термометрия в первые 2 месяца 1 раз в неделю, третий 4а Зак. 2125... [стр. 106 ⇒]

— клещевой энцефалит — Лайм-боррелиоз — международные единицы — метод флуоресцирующих антител — натуральные киллеры — нестероидные противовоспалительные средства — непрямая реакция иммунофлюоресценции — острый гепатит С — острая дыхательная недостаточность — отделение инфекционно-паразитарных заболеваний и иммунопрофилактики ОКИ — острые кишечные инфекции ОРВИ — острые респираторные вирусные инфекции ОРЗ — острое респираторное заболевание ОРИТ — отделение реанимации и интенсивной терапии ОЦК — объем циркулирующей крови ПВТ — противовирусная терапия ПДС — противодифтерийная сыворотка ПЕГ-ИФН (ПИФН) — пегилированный интерферон ПИТ — палата интенсивной терапии ПКТ — прокальцитонин ПОЛ — перекисное окисление липидов ПРП — первичный рак печени ПТИ — пищевые токсикоинфекции ПЦР — полимеразная цепная реакция РАЛ — реакция агглютинации латекса РДПА — реакция диффузной преципитации в агаровом гене РДС — респираторный дистресс-синдром РИА — радиоиммунный анализ РИФ — реакция иммунофлюоресценции РМА — реакция микроагглютинации РН — реакция нейтрализации РНГА — реакция непрямой гемагглютинации РНК — рибонуклеиновая кислота РНП — рибонуклеопротеид РПГА — реакция пассивной гемагглютинации РСВ — респираторно-синцитиальный вирус РСВЗ — респираторно-синцитиальное вирусное заболевание РС-инфекция — респираторно-синцитиальная инфекция РСК — реакция связывания комплемента РТПГА — реакция торможения пассивной гемагглютинации РЭМА — реакция энзим-меченых антител СИБР — синдром избыточного бактериального роста СОЭ — скорость оседания эритроцитов СПОН — синдром полиорганной недостаточности СРБ — С-реактивный белок СРК — синдром раздраженной кишки ССВО — синдром системного воспалительного ответа ССВР — синдром системной воспалительной реакции сссДНК — ковалентно замкнутая циркулярная константная дезоксирибонуклеиновая кислота ТГС — тромбогеморрагический сидром ТОРС — тяжелый острый респираторный синдром 6... [стр. 6 ⇒]

Столбняк новорожденных возникает даже в том случае, если матери считались иммунизированными. Объяснением этого являются: неправильная схема иммунизации матери, слабая эффективность вакцин, недостаточный иммунный ответ у матери, ослабленный перенос антител через плаценту, поступление большого количества столбнячного токсина через плаценту. Для диагностики столбняка используют методы обнаружения столбнячной палочки и ее токсина из раны, а после родов или абортов — из влагалища и матки. Для определения токсина применяют реакцию нейтрализации гемагглютинации (РНГА) и реакцию нейтрализации токсина на мышах. Существует теория естественного иммунитета против столбняка, приобретенного в течение жизни человека. Предполагается, что иммунитет формируется благодаря присутствию столбнячных бактерий в пищеварительном тракте и всасывания инактивированного токсина или его фрагментов. Титры естественных антител крайне низки, и резистентность, связанная с ними, не имеет существенного значения в эпидемиологии столбняка. Столбнячный анатоксин, используемый в виде моновакцины или в качестве одного из компонентов комплексной вакцины, вызывает образование нейтрализующих IgG-антител. Гуморальный иммунитет является основой противостолбнячной резистентности, развивающейся после введения столбнячного анатоксина. Антитела нейтрализуют образующийся в инфицированный ране токсин. Одна доза столбнячного анатоксина, вводимого первично, обеспечивает лишь слабую защиту. Спустя 2−4 нед после второй инъекции антигена уровень антител превышает минимальный защитный титр. Троекратное введение вакцин обеспечивает напряженный иммунитет на протяжении по крайней мере 1−5 лет. Ревакцинация, проводимая через год, сохраняет иммунитет в течение 7−10 лет. Нарушение формирования иммунитета на введение столбнячного анатоксина может быть при СПИДе, малярии и других заболеваниях. Для определения противостолбнячных антител используют реакцию нейтрализации токсина in vivo, реакцию непрямой гемагглютинации и ИФА. Реакция нейтрализации обладает высокой чувствительностью (0,001 МЕ/мл), с ее помощью определяют главным образом IgG-антитела. Реакция гемагглютинации проста, выявляет преимущественно IgM-антитела, обладающие способностью связываться с токсином, но не нейтрализовать его. Широко... [стр. 156 ⇒]

ПЦР — полимеразная цепная реакция РА — реакция агглютинации РАГА — реакция агрегат-гемагглютинации РАЛ — реакция агглютинации лептоспир РАР — реакция агглютинации риккетсий РИФ — реакция иммунофлюоресценции РКА — реакция коагглютинации РЛА — реакция латекс-агглютинации РМЛ — реакция микроагглютинации и лизиса лептоспир РН — реакция нейтрализации РНГА — реакция непрямой гемагглютинации РНИФ — реакция непрямой иммунофлюоресценции РПГА — реакция пассивной гемагглютинации РСК — реакция связывания комплемента РТГА — реакция торможения гемагглютинации РТПГА — реакция торможения пассивной гемагглютинации СМЖ — спинномозговая жидкость CРБ — C-реактивный белок ТОРС — тяжелый острый респираторный синдром УВЧ — ультравысокочастотный УФО — ультрафиолетовое облучение ЦМВ — цитомегаловирус ЦМВИ — цитомегаловирусная инфекция ЦМК — цитомегалическая клетка ШСД — шоковый синдром Денге ЭНМГ — элекронейромиография... [стр. 11 ⇒]

Диагностикумы, полученные на основе эритроцитов, сенсибилизированных антигенами, называют антигенными эритроцитарными диагностикумами. Они предназначены для определения антител в серийных разведениях сывороток крови. Например, эритроцитарные шигеллезные диагностикумы, эритроцитарные сальмонеллезные О-диагностикумы. Соответственно, диагностикумы на основе эритроцитов, сенсибилизированных специфическими иммуноглобулинами, называются антительными (иммуноглобулиновыми) диагностикумами и служат для выявления антигенов в различном материале. Например, эритроцитарный иммуноглобулиновый дифтерийный диагностикум для РНГА, применяемый для выявления дифтерийного экзотоксина коринебактерий в жидкой питательной среде при посеве в нее материала из носа и ротоглотки. РПГА применяется для диагностики как бактериальных (брюшной тиф, паратифы, дизентерия, бруцеллез, чума, холера и др.), так и вирусных (грипп, аденовирусные инфекции, корь и др.) инфекций. – Реакция торможения гемагглютинации (РТГА). Метод применяется для титрования противовирусных антител в сыворотках крови, а также с целью установления типовой принадлежности выделенных вирусных культур. РТГА может быть использована для диагностики тех вирусных инфекций, чьи возбудители обладают гемагглютинирующими свойствами. Принцип метода состоит в том, что сыворотка, содержащая антитела к конкретному типу вируса, подавляет его гемагглютинирующую активность и эритроциты остаются неагглютинированными. – Реакция торможения (задержки) пассивной гемагглютинации (РТПГА). В РТПГА участвуют три компонента: иммунная сыворотка, антиген (исследуемый материал) и сенсибилизированные эритроциты. Если в исследуемом материале содержится антиген, специфически реагирующий с антителами иммунной стандартной сыворотки, то он связывает антитела иммунной (стандартной) сыворотки, и при последующем добавлении эритроцитов, сенсибилизированных антигеном, гомологичным сыворотке, гемагглютинация не наступает. РТПГА применяют для обнаружения микробных... [стр. 61 ⇒]

...невралгия тройничного нерва основной белок миелина острые нарушения мозгового кровообращения острый рассеянный энцефаломиелит однофотонная эмиссионная компьютерная томография объем циркулирующей крови порфобилиноген периферическая вегетативная недостаточность потенциал действия двигательных единиц прогрессирующая мультифокальная лейкоэнцефалопатия прогрессирующий надъядерный паралич периферическая нервная система позитивные острые волны потенциал фибрилляций полимеразная цепная реакция позитронно-эмиссионная томография реакция иммобилизации трепонем реакция иммунофлюоресценции реакция непрямой гемагглютинации реакция пассивной гемагглютинации реакция связывания комплемента реакция торможения гемагглютинации субарахноидальное кровоизлияние семейная амилоидная невропатия синдром вегетативной дистонии слуховые вызванные потенциалы слуховые вызванные потенциалы ствола мозга системная красная волчанка синдром неадекватной секреции антидиуретического гормона соматосенсорные вызванные потенциалы снохогидения транзиторная ишемическая атака транскраниальная допплерография трансформирующий ростовой фактор ультразвуковая допплерография ультразвуковое исследование узел заднего корешка фибромиалгия фактор некроза опухоли фосфорорганические соединения хроническая воспалительная демиелинизирующая полирадикулоневропатия центральное венозное давление центральное время моторного проведения цитомегаловирусная инфекция центральная нервная система цереброспинальная жидкость черепно-мозговая травма экспериментальный аллергический энцефаломиелит электромиограмма электронейромиограмма эпилептический статус эссенциальный тремор эхокардиограмма эхоэнцефалограмма электроэнцефалограмма 13... [стр. 12 ⇒]

— реакция иммобилизации трепонем — реакция иммунофлюоресценции — реакция непрямой гемагглютинации — реакция пассивной гемагглютинации — реакция связывания комплемента — реакция торможения гемагглютинации — субарахноидальное кровоизлияние — семейная амилоидная невропатия — синдром вегетативной дистонии — слуховые вызванные потенциалы — слуховые вызванные потенциалы ствола мозга — системная красная волчанка — синдром неадекватной секреции антидиуретического гормона — соматосенсорные вызванные потенциалы — транзиторная ишемическая атака — транскраниальная допплерография — трансформирующий ростовой фактор — ультразвуковая допплерография — узел заднего корешка — фактор некроза опухоли — фосфорорганические соединения — хроническая воспалительная демиелинизирующая полирадикулоневропатия — центральное венозное давление — центральное время моторного проведения — цитомегаловирусная инфекция — цереброспинальная жидкость — черепно-мозговая травма — экспериментальный аллергический энцефаломиелит — электромиограмма — электронейромиограмма — эхокардиограмма — эхоэнцефалограмма — электроэнцефалограмма... [стр. 18 ⇒]

Развитию инфекции способствует способность этих микроорганизмов противостоять бактерицидным свойствам мочи и вырабатывать гемолизин. Бактерии прикрепляются к эпителию с помощью фимбрии — нитевидных белковых структур, расположенных на их поверхности. Фимбрии различают по сродству к олигосахаридам на поверхности эпителиальных клеток, способности к гемагглютинации и типу блокирующих ее моносахаридов. Фимбрии типа 1 агглютинируют эритроциты морской свинки. Поскольку этот процесс блокирует Dманноза, гемагглютинацию, которую вызывают штаммы с фимбриями типа 1, называют чувствительной к D-маннозе. Рфимбрии агглютинируют человеческие эритроциты и не связываются с эритроцитами морской свинки. D-манноза на этот процесс не влияет, поэтому гемагглютинацию, которую вызывают штаммы с Р-фимбриями, называют нечувствительной к D-маннозе. Р-фимбрии связываются с остатками дигалактозы антигена Р, определяющего группу крови системы Р. Аналогичные гликолипидные антигены имеются в эпителии мочевых путей и почечных канальцев. Способность бактерий прикрепляться к эпителию влияет на локализацию и, следовательно, тяжесть инфекции мочевых путей. По данным Дж. Каллениус и со-авт., при обследовании 97 детей с инфекциями мочевых путей и 82 здоровых детей Рфимбрии были обнаружены у 91 % штаммов Escherichia coli, выделенных из мочи больных острым пиелонефритом, у 19% штаммов, выделенных у больных с острым циститом, у 14% штаммов, выделенных при бессимптомной бактериурии, и только у 7% штаммов, выделенных из кала здоровых детей. Похожие результаты получены при исследовании возбудителей первичного острого пиелонефрита у женщин. При вторичном пиелонефрите, возникающем на фоне органических или функциональных изменений мочевых путей, частота выделения штаммов с Р-фимбриями ниже. Так, при рецидивирующих инфекциях мочевых путей на фоне пузырно-мочеточникового реф-люкса у большинства выделяемых штаммов Escherichia coli Р-фимбрии отсутствуют. [стр. 234 ⇒]

Оценка результатов, полученных при исследовании крови на принадлежность к группе по системе АВО Если гемагглютинация происходит в капле с сыворотками I (О), III (В), но не происходит с сывороткой II (А), причем результат аналогичен с сыворотками двух сывороток, это означает, что исследуемая кровь принадлежит III (B) группе по системе АВО. Если гемагглютинация происходит в капле с сыворотками I (О), II (А), но не происходит с сывороткой III (В), это означает, что исследуемая кровь принадлежит II (А) группе по системе АВО. Но возможна и такая ситуация, когда гемагглютинация не происходит ни с одной из исследуемых сывороток, причем обеих серий. Это означает, что исследуемая кровь не содержит агглютиногенов и принадлежит к I (О) группе по системе АВО. Если же агглютинация происходит со всеми сыворотками, причем обеих серий, это означает, что исследуемая сыворотка содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к IV (АВ) группе по системе АВО. [стр. 63 ⇒]

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) используется для диагностики вирусных болезней. Некоторые вирусы обладают гемагглютинирующими свойствами, т.е. эти вирусы могут связываться с эритроцитами и образовывать осадок склеившихся эритроцитов на дне пробирки или лунки планшета. Избирательное блокирование гемадсорбции с помощью специфических антител является основой для проведения реакции торможения гемагглютинации, которая широко используется в лабораторной практике. Таким образом, РТГА основана на феномене предотвращения (торможении) иммунной сывороткой гемагглютинации эритроцитов вирусами и используется для выявления и титрования противовирусных антител. Она служит основным методом серодиагностики гриппа, кори, краснухи, эпидемического паротита, клещевого энцефалита и других вирусных инфекций, возбудители которых обладают гемагглютинирующими свойствами. Пример, РТГА для диагностики гриппа и парагриппозной инфекции. Парные сыворотки от больного исследуют в одном опыте. Титром сыворотки считают ее наибольшее разведение, в котором наблюдается полное ингибирование гемагглютинации вируса. Диагностически достоверным считается не менее, чем 4-кратное увеличение титров антител в постинфекционной сыворотке по сравнению с сывороткой, взятой в острой фазе заболевания. Типирование вируса проводят в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с набором типоспецифических сывороток (H0N1, H1N1, Н2N2, H3N2 и др.). Результаты реакции учитывают по отсутствию гемагглютинации. w. [стр. 11 ⇒]

Занятие 7. Тема: Иммунодиагностика. Серодиагностика. Иммуноиндикация. Иммунодиагностика - это использование иммунологических методов для диагностики заболеваний. В основе ее лежит использование реакций иммунитета. Реакции иммунитета - реакции между антигенами и антителами. Эти реакции специфичны, и позволяют по результату реакции выявлять либо антитело (серодиагностика), либо антиген (иммуноиндикация, в том числе серологическая идентификация культур бактерий или вирусов). Реакции иммунитета бывают простые (двухкомпонентные) и сложные (многокомпонентные). К первым относятся реакции агглютинации и ее модификации (пассивной гемагглютинации, латекс-агглютинации) и преципитации, ко вторым - РСК, ИФА, РИА, реакции потребления (нейтрализации) антигенов, антител и др. Серодиагностика - самостоятельный метод диагностики инфекционных заболеваний. Его цель - обнаружение антитела в сыворотке обследуемого и наростания их титра. Известный компонент реакции - диагностикум (микробный, эритроцитарный, латексный). Диагностическое значение имеет не столько сам факт обнаружения антитела, сколько наростание их количества (титра). Оно выявляется при исследовании парных (взятых в разные сроки болезни) сывороток. Иммуноиндикация - метод диагностики, имеющий целью обнаружение микробных (или иных) антигенов в исследуемом материале. Для серодиагностики и иммуноиндикации могут быть использованы различные реакции иммунитета. Медицинская промышленность выпускает широкую номенклатуру тестсистем для реализации принципов серодиагностики и иммуноиндикации методами иммуноферментного анализа, пассивной гемагглютинации, латексагглютинации, ко-агглютинации, радиоиммунными и иммунофлюоресцентными методиками. Задание: Познакомиться с диагностическими тест-системами для проведения исследования методом иммуноферментного анализа. Провести исследование крови донора на наличие антигена вируса гепатита В (HBsAг) методом иммуноферментного анализа. Провести реакцию пассивной гемагглютинации для серодиагностики сыпного тифа. [стр. 222 ⇒]

Сведения, полученные с помощью электронного микроскопа, были значительно расширены с помощью рентгеноструктурного анализа кристаллов и псевдокристаллов вирусов. Совершенствование электронных микроскопов завершилось созданием сканирующих микроскопов, позволяющих получать объемные изображения. С использованием метода электронной микроскопии изучена архитектура вирионов, особенности их проникновения в клетку хозяина. В этот период была открыта основная масса вирусов. В качестве примера могут быть приведены следующие: 1931 г. – вирус гриппа свиней и вирус западного энцефаломиелита лошадей; 1933 г. – вирус гриппа человека и вирус восточного энцефаломиелита лошадей; 1934 г. – вирус паротита; 1936 г. – вирус рака молочной железы мышей; 1937 г. – вирус клещевого энцефалита. 40-е годы. В 1940 г. Хогланд с коллегами установили, что вирус осповакцины содержит ДНК, но не РНК. Стало очевидным, что вирусы отличаются от бактерий не только размерами и неспособностью расти без клеток, но и тем, что они содержат только один вид нуклеиновой кислоты – ДНК или РНК. 1941 г. – американский ученый Херст на модели вируса гриппа открыл феномен гемагглютинации (склеивания эритроцитов). Это открытие легло в основу разработки методов выявления и идентификации вирусов и способствовало изучению взаимодействия вируса с клеткой. Принцип гемагглютинации положен в основу ряда методов: РГА – реакция гемагглютинации – применяется для обнаружения и титрования вирусов; РТГА – реакция торможения гемагглютинации – применяется для идентификации и титрования вирусов. 1942 г. – Херст устанавливает наличие у вируса гриппа фермента, который позднее идентифицирован как нейраминидаза. 1949 г. – открытие возможности культивирования клеток животных тканей в искусственных условиях. В 1952 г. Эндерс, Уэллер и Роббинс получили Нобелевскую премию за разработку метода культуры клеток. Введение в вирусологию метода культуры клеток явилось важным событием, давшим возможность получения культуральных вакцин. Из широко применяемых в настоящее время культуральных живых и убитых вакцин, созданных на основе аттенуированных штаммов вирусов, следует отметить вакцины против полиомиелита, паротита, кори и краснухи. Открыты вирусы: 1945 г. – вирус Крымской геморрагической лихорадки; 1948 г. – вирусы Коксаки. 50-е годы. В 1952 г. Дульбекко разрабатывает метод титрования бляшек в монослое клеток эмбриона цыпленка, что позволило ввести в вирусологию количественный аспект. 1956–1962 годы. Уотсон, Каспар (США) и Клуг (Великобритания) разрабатывают общую теорию симметрии вирусных... [стр. 471 ⇒]

: реакцией прямой гемагглютинации Фельдшер-лаборант методом иммуноферментного анализа: Фельдшер-лаборант полуавтоматизированный расчет Фельдшер-лаборант автоматизированный расчет Фельдшер-лаборант методом непрямой иммунофлюоресценции Фельдшер-лаборант определение антител к туберкулезным антигенам: Фельдшер-лаборант реакцией прямой гемагглютинации Фельдшер-лаборант определение суммарных антител (Ig G, A, M) к антиге- Фельдшер-лаборант нам M. tuberculosis методом иммуноферментного анализа с полуавтоматизированным расчетом Определение антител к нативной ДНК латекс-тестом Фельдшер-лаборант Определение ревматоидного фактора в сыворотке крови: реакция гемагглютинации (Ваалер-Розе) Фельдшер-лаборант латекс-тест Фельдшер-лаборант Идентификация моноклональных белков методом им- Фельдшер-лаборант мунофиксации Реакция деструкции тучных клеток Фельдшер-лаборант Глава 7. Бактериологические исследования Исследование на аэробные и факультативные анаэробные Врач лабораторной микроорганизмы в крови (культуральное исследование) диагностики; фельдшер-лаборант Исследование крови на аэробные, факультативно- Врач лабораторной анаэробные микроорганизмы с помощью автоматизи- диагностики; фельдшер-лаборант рованных систем Исследования на аэробные и факультативные анаэроб- Врач лабораторной ные микроорганизмы в спинномозговой жидкости диагностики; фельдшер-лаборант (культуральное исследование) Исследование спинномозговой жидкости на аэробные, Врач лабораторной факультативно-анаэробные микроорганизмы с помо- диагностики; щью автоматизированных систем фельдшер-лаборант Исследования на аэробные и факультативные анаэробные Врач лабораторной микроорганизмы в мокроте и промывных водах бронхов диагностики; фельдшер-лаборант (культуральное исследование, количественный метод) Исследование на аэробные, факультативно-анаэробные Фельдшер-лаборант микроорганизмы в мокроте и промывных водах бронхов с идентификацией до вида с использованием автоматизированных систем Исследования на аэробные и факультативные анаэроб- Врач лабораторной ные микроорганизмы в моче (культуральное исследо- диагностики; вание, полуколичественный метод) фельдшер-лаборант Исследование на аэробные, факультативно-анаэробные Фельдшер-лаборант микроорганизмы в моче с идентификацией до вида с использованием автоматизированных систем... [стр. 146 ⇒]

Титры, установленные с помощью RPR, не коррелируют полностью с титрами VDRL, и при последующем количественном определении титров (для оценки эффективности проводимого лечения) следует пользоваться каким-либо одним тестом. Для выявления специфических антител против трепонем существуют три стандартных метода: реакция абсорбции флюоресцирующих антител к трепонемам (FTAABS), реакция микрогемагглютинации для выявления антител к Т. pallidum (МНА-ТР) н реакция гемагглютннации трепонем на сифилис (HATTS). Последний гемагглютинационный тест широко используется в Канаде и в Европе, но не получил распространения в Соединенных Штатах Америки. Для постановки реакции FTA-ABS сыворотка больного предварительно разводится с субстанцией, содержащей антигены непатогенных спирохет (сорбент) для того, чтобы связать групповые антитела, которые могут образовываться в организме в ответ на вегетирование в нем оральных или генитальных спирохет — сапрофитов. Затем абсорбированная сыворотка больного помещается на стекло, на котором фиксирована Т. pallidum. Если в сыворотке больного присутствуют специфические антитела к возбудителю сифилиса, они связываются с высушенными фиксированными спирохетами, а затем выявляются при добавлении меченного флюоресцеином античеловеческого гамма-глобулина и последующем исследовании препарата методом флюоресцентной микроскопии. В реакциях гемагглютинации Т. pallidum (МНА-ТР, НАТТ, и ТРНА) также используются сорбентоподобные разведения для связывания групповых антител к спирохетам. Специфические антитела к возбудителю сифилиса выявляются с помощью агглютинации покрытых Т. pallidum бараньих или индюшиных эритроцитов. Наиболее специфичным лабораторным тестом является тест иммобилизации возбудителя, при котором иммобилизация живых Т. pallidum осуществляется с помощью иммунной сыворотки и комплемента. Однако эта реакция весьма трудоемка, а потому в США она используется только в научно-исследовательских лабораториях. Обе реакции -— гемагглютинации и FTA-ABS — очень специфичны и в случае применения их для подтверждения положительных результатов реагинового теста высокоэффективны для диагностики сифилиса. Однако даже эти реакции могут давать от 1 до 2% ложноположитсльных результатов при массовых скрининговых обследованиях населения. Относительная чувствительность реакций VDRL, FTA-ABS и МНА-ТР на различных стадиях течения сифилитической инфекции отражена в табл. 122-2. Нетрепонемные реакции оказываются неэффективными примерно у 30% больных первичным или поздним сифилисом. На ранних стадиях первичного сифилиса максимального выявления антител можно добиться, либо применяя тест FTA-ABS, либо просто повторяя реакцию VRDL через каждые 1--2 нед, если результаты первичной постановки этой реакции были отрицательными. Однако результатов одного реагинового теста недостаточно при подозрении на поздний симптоматический сифилис, в этом случае следует использовать более чувствительный FTA-ABS-тест. При первичном сифилисе реакции гемагглютинации оказываются даже менее чувствительными, чем реагиновые тесты, но при других стадиях заболевания они так же чувствительны, как FTA-ABS. При вторичном сифилисе все нетрепонемные н трепонемные реакции достаточно чувствительны, и отрицательный их результат фактически исключает диагноз сифилиса у больного с наличием подозрительных очагов на коже и слизистых оболочках (необходимо учитывать, что 1—2% больных вторичным сифилисом не реагируют или слабо реагируют в реакции VDRL с неразведенной сывороткой; при более высоких разведениях можно получить положительный результат—феномен проагглютинационной зоны — прозоны). [стр. 1164 ⇒]

Патогенез гриппозного миозита также неизвестен, хотя сообщалось о наличии в пораженных мышцах вируса гриппа. Во время пандемии гриппа 1918—1919 гг. встречались случаи развития миокардита и перикардита. Эти данные основываются главным образом на результатах гистопатологических исследований. Однако впоследствии сообщения о подобных осложнениях встречались нерегулярно. У лиц, страдающих заболеваниями сердца, во время остро протекающего гриппа наблюдали изменения ЭКГ, которые чаще относили на счет усугубления основного заболевания, а не на счет гриппозного поражения миокарда. Возможные поражения центральной нервной системы характеризуются энцефалитом, поперечным миелитом и синдромом Гийена—Барре. Этиологическая связь вируса гриппа с указанными расстройствами не установлена. Кроме осложнений, затрагивающих специфические системы органов, описанных выше, каждая вспышка гриппа выбирает определенные группы лиц высокого риска (лица пожилого возраста, страдающие хроническими заболеваниями), у которых развитие инфекционного процесса сопровождается прогрессивным ухудшением функции сердечнососудистой системы, легких и почек, приводя в ряде случаев к необратимым изменениям и смерти. Эти летальные исходы включаются в общий счет избыточной смертности, сопровождающей вспышки гриппа А. Лабораторные исследования. В острый период заболевания лабораторная диагностика основана на выделении вируса из материала мазка из глотки, смывов из носоглотки или из мокроты. Вирус обычно обнаруживают в культуре тканей или, реже, в амниотической полости куриных эмбрионов в течение 48—72 ч после инокуляции. Используя методы иммунофлюоресценции, вирусные антигены можно обнаружить несколько ранее в культуре тканей или непосредственно в слущенных клетках носоглотки, полученных при смывах. Тип вируса гриппа (А или В) определяют с помощью методов иммунофлюоресценции или подавления гемагглютинации. Подтип гемагглютининов вируса гриппа A (H1, H2 или Н3) можно установить также, используя методы подавления гемагглютинации с подтипоспецифическими антисыворотками. Серологические методы диагностики требуют сравнения титров антител в сыворотке, полученной в острую фазу заболевания и через 10—14 дней после его начала. Однако чаще значение серологических методов ограничивается ретроспективными исследованиями. Диагностическим критерием острой инфекции является 4-кратное или более повышение титра антител, установленное методом подавления гемагглютинации, фиксации комплемента, или достоверное их повышение при использовании твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). Тесты фиксации комплемента в целом менее чувствительны, чем другие серологические методы. Однако, поскольку они позволяют обнаружить типоспецифические антигены, их можно рассматривать как наиболее информативные при отсутствии подтипоспецифических реагентов. Остальные лабораторные тесты в целом менее информативны при постановке специфического диагноза гриппозной инфекции. Число лейкоцитов существенно меняется на протяжении заболевания: на ранних стадиях оно обычно ниже нормальных значений, а затем возвращается к норме или слегка повышается. В тяжелых случаях вирусной и бактериальной инфекции развивается выраженная лейкопения, в то время как лейкоцитоз более 15•109/л заставляет заподозрить вторичную бактериальную инфекцию. Дифференциальная диагностика. Дифференцировать грипп от острых респираторных заболеваний, вызванных различными респираторными вирусами или Mycoplasma pneumoniae, на основании одних лишь клинических данных, полученных у каждого отдельного больного, достаточно трудно. Тяжелый стрептококковый фарингит или начало бактериальной пневмонии могут имитировать острый грипп, хотя для бактериальных пневмоний, как правило, нехарактерен самоограничивающийся цикл. Важным диагностическим признаком бактериальной пневмонии служит наличие гнойной мокроты, в которой после окрашивания по Граму обнаруживают патогенные бактерии. Тот факт, что вспышки гриппа возникают преимущественно в зимние месяцы, также способствует постановке правильного клинического диагноза. Если местные органы здравоохранения сообщают о повышении активности гриппозной инфекции в популяции, то с высокой степенью вероятности можно говорить о том, что острое респираторное вирусное заболевание, сопровождающееся повышением температуры тела, имеет гриппозную природу. Наличие таких типичных признаков гриппа, как внезапное начало и доминирование системных симптомов, подтверждает это. [стр. 1226 ⇒]

На протяжении трех месяцев ежемесячно проводится бактериологическое однократное исследование кала и мочи.  при положительном результате бактериологического исследования в течение трех месяцев после выписки из стационара обследуемый расценивается как острый носитель.  на четвертом месяце наблюдения проводится бактериологическое исследование желчи и сыворотки крови в реакции прямой гемагглютинации с цистеином. При отрицательных результатах всех исследований переболевшего снимают с диспансерного наблюдения.  при положительном результате серологического исследования проводят пятикратное бактериологическое исследование кала и мочи. В случае отрицательных результатов оставляют под наблюдением в течение одного года.  через один год после выписки из стационара однократно исследуют бактериологическим методом кал, мочу и сыворотку крови в реакции прямой гемагглютинации с цистеином. При отрицательных результатах исследования переболевшего снимают с диспансерного наблюдения. Среди бактерионосителей брюшного тифа проводятся мероприятия: 1) у транзиторных бактерионосителей в течение трех месяцев проводят пятикратное бактериологическое исследование кала и мочи. При отрицательном результате однократно исследуют желчь. В конце наблюдения однократно исследуют сыворотку крови в реакции прямой гемагглютинации с цистеином. При отрицательном результате всех исследований к концу третьего месяца наблюдения их снимают с учета. При положительных результатах бактериологического и серологического исследований расцениваются как острые бактерионосители; 2) за острыми бактерионосителями в течение двух месяцев после выявления проводится медицинское наблюдение с термометрией и в течение трех месяцев ежемесячно однократно проводится бактериологическое исследование кала и мочи. В конце третьего месяца проводят бактериологическое исследование кала и мочи – пятикратно, желчи – однократно и серологическое исследование сыворотки крови в реакции прямой гемагглютинации с цистеином. При отрицательных результатах бактериологических и серологических исследований обследуемого снимают с диспансерного наблюдения. При положительном результате серологического исследования и отрицательных результатах бактериологического исследования кала и мочи продолжают наблюдение в течение одного года. Через один год однократное исследование сыворотки крови в реакции прямой гемагглютинации с цистеином, кал и мочу – бактериологическое исследование, однократно. При положительном результате серологического исследования исследуются кал и моча пятикратно, желчь однократно. При отрицательных результатах исследований обследуемого снимают с диспансерного наблюдения. При положительном результате обследуемого расценивают как хронического бактерионосителя; 3) хронические бактерионосители состоят на учете в территориальном подразделении ведомства государственного органа в сфере санитарно-эпидемиологического благополучия населения, порядок их обследования в течение жизни определяется эпидемиологом. Хронических бактерионосителей обучают приготовлению 17... [стр. 17 ⇒]

Для выявления неполных антител, например к резус-антигену эритроцитов в сыворотке крови беременной женщины, реакция ставится в два этапа: 1) к двукратным разведениям испытуемой сыворотки добавляют эритроциты, содержащие резус-антиген, и выдерживают при 37 °С в течение часа; 2) к тщательно отмытым после первого этапа эритроцитам добавляют кроличью античеловеческую анти-глобулиновую сыворотку (в заранее оттитрованном рабочем разведении). После инкубации в течение 30 мин при 37 °С результаты оценивают по наличию гемагглютинации (положительная реакция). Необходимо ставить контроль ингредиентов реакции: 1) антиглобулиновая сыворотка + заведомо сенсибилизированные специфическими антителами эритроциты; 2) обработанные нормальной сывороткой эритроциты + антиглобулиновая сыворотка; 3) обработанные исследуемой сывороткой резус-отрицательные эритроциты + антиглобулиновая сыворотка. № 76 Реакция пассивной гемагглютинации. Компоненты. Применение. Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использовании эритроцитов (или латекса) с адсорбированными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соответствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. Компоненты. Для постановки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавливают впрок, обрабатывая формалином или глютаральдегидом. Адсорбционная емкость эритроцитов увеличивается при обработке их растворами танина или хлорида хрома. Антигенами в РНГА могут служить полисахаридные АГ микроорганизмов, экстракты бактериальных вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие вещества. Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обладающие высокой адсорбирующей активностью. Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гормона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительности к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях. Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается значительно более высокой чувствительностью и специфичностью, чем реакция агглютинации. Ее используют для идентификации возбудителя по его антигенной структуре или для индикации и идентификации бактериальных продуктов — токсинов в исследуемом патологическом материале. Соответственно используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные антительные диагностикумы, полученные путем адсорбции специфических антител на поверхности танизированных (обработанных танином) эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый объем 3 % суспензии нагруженных антителами эритроцитов. При необходимости реакцию ставят параллельно в нескольких рядах лунок с эритроцитами, нагруженными антителами разной групповой специфичности. Через 2 ч инкубации при 37 °С учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов (без встряхивания): при отрицательной реакции появляется осадок в виде компактного.диска или кольца на дне лунки, при положительной реакции — характерный кружевной осадок эритроцитов, тонкая пленка с неровными краями. № 77 Реакция коагглютинации. Механизм, компоненты. Применение. Реакцию коагглютинации применяют для определения антигенов с помощью антител, адсорбированных на белке А клеток стафилококка (антительный диагностикум). Белок А имеет сродство к Fc-фрагменту иммуноглобулинов, поэтому такие бактерии, обработанные иммунной диагностической сывороткой неспецифически адсорбируют антитела сыворотки, которые затем взаимодействуют активными центрами с соответствующими микробами, выделенными от больных. В результате коагглютинации образуются хлопья, состоящие из стафилококков, антител диагностической сыворотки и определяемого микроба. Механизм. Основан на том, что находящийся на поверхности золотистого стафилококка белок А селективно реагирует с Fcфрагментом IgGl, G2, G4, оставляя свободными антидетерминанты Ат, которые, взаимодействуя с гомологичным Аг, вызывают агглютинацию стафилококков. Для постановки КОА применяют коммерческие стафилококковые реагенты, содержащиеся в ампулах или высушенные в лунках полистироловых пластин или предметных стекол. К реагенту добавляют 0,01-0,1 мл исследуемой культуры или растворимого Аг, инкубируют при комнатной температуре 10-30 мин (в условиях постановки реакции на стекле) или 18 -20 ч (в условиях постановки реакции в капиллярах). Учет проводят так же, как при обычной РА. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени просветления жидкости. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмечается в разведении, близком к титру диагностической сыворотки. Одновременно учитывают контроли: сыворотка, разведенная изотоническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка. № 78 Реакция торможения гемагглютинации. Механизм. Компоненты. Применение. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) - метод идентификации вируса или выявления противовирусных антител в сыворотке крови больного, основанный на феномене отсутствия агглютинации эритроцитов препаратом, содержащим вирус, в присутствии иммунной к нему сыворотки крови. Реакция торможения гемагглютинации(РТГА) основана на блокаде, подавлении антигенов вирусов антителами иммунной сыворотки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты. РТГА применяют для диагностики многих вирусных болезней, возбудители которых (вирусы гриппа, кори, краснухи, клещевого энцефалита и др.) могут агглютинировать эритроциты различных животных. [стр. 49 ⇒]

Серологические исследования применяют также для идентификации антигенов микробов, различных биологически активных веществ, групп крови, тканевых и опухолевых антигенов, иммунных комплексов, рецепторов клеток и др. При выделении микроба от больного проводят идентификацию возбудителя путем изучения его антигенных свойств с помощью иммунных диагностических сывороток, т. е. сывороток крови гипериммунизированных животных, содержащих специфические антитела. Это так называемая серологическая идентификация микроорганизмов. В микробиологии и иммунологии широко применяются реакции агглютинации, преципитации, нейтрализации, реакции с участием комплемента, с использованием меченых антител и антигенов (радиоиммунологический, иммуноферментный, иммунофлюоресцентный методы). Перечисленные реакции различаются по регистрируемому эффекту и технике постановки, однако, все они основаны на реакции взаимодействия антигена с антителом и применяются для выявления как антител, так и антигенов. Реакции иммунитета характеризуются высокой чувствительностью и специфичностью. Особенности взаимодействия антитела с антигеном являются основой диагностических реакций в лабораториях. Реакция invitroмежду антигеном и антителом состоит из специфической и неспецифической фазы. В специфическую фазу происходит быстрое специфическое связывание активного центра антитела с детерминантой антигена. Затем наступает неспецифическая фаза — более медленная, которая проявляется видимыми физическими явлениями, например образованием хлопьев (феномен агглютинации) или преципитата в виде помутнения. Эта фаза требует наличия определенных условий (электролитов, оптимального рН среды). Связывание детерминанты антигена (эпитопа) с активным центром Fab-фрагмента антител обусловлено ван-дер-ваальсовыми силами, водородными связями и гидрофобным взаимодействием. Прочность и количество связавшегося антигена антителами зависят от аффинности, авидности антител и их валентности. № 85 Диагностикумы. Получение, применение. В диагностических целях при обнаружении антител в сыворотке крови больных, реконвалесцентов и бактерионосителей используются серологические реакции. Для постановки таких реакций применяются диагностикумы - препараты, содержащие взвесь обезвреженных микроорганизмов или определенные антигены. Необходимость использования диагностикумов для серологических реакций связана не только с явным их преимуществом перед живыми культурами микробов (безопасность в работе), но еще и потому, что для приготовления диагностикумов подбираются штаммы микроорганизмов с высокой чувствительностью к антителам и способностью длительно сохранять антигенные свойства. Для инактивации микроорганизмов при приготовлении диагностикумов чаще всего используются химические вещества, особенно формалин, являющийся лучшим консервантом. Убитые нагреванием микробы хуже сохраняют антигенные свойства и применяются редко. В серологических реакциях (реакции агглютинации, реакции пассивной гемагглютинации, реакции связывания комплемента, реакции торможения гемагглютинации) для выявления специфических антител применяются: бактериальные, эритроцитарные и вирусные диагностикумы. Бактериальные диагностикумы могут содержать инактивированную микробную взвесь или отдельные антигенные компоненты бактерий: О, Н или Vi-антигены и используются в реакциях агглютинации. Эритроцитарные диагностикумы представляют собой эритроциты (обработанные танином или формалином) с адсорбированными на них антигенами, извлеченными из бактерий, и применяются в РПГА (реакции пассивной гемагглютинации). В том случае, когда РПГА используется для выявления антигена в выделениях больных, в тканях и др., применяют «антительные диагностикумы», т. е. эритроциты, сенсибилизированные антителами. Вирусные диагностикумы — препараты, содержащие инактированные вируссодержащие жидкости (культуральные, из куриных эмбрионов или организма животных, зараженных соответствующим вирусом), применяются в РСК (реакции связывания комплемента), реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и реакции нейтрализации. В настоящее время в лабораториях используются следующие диагноста кумы. 1. Бактериальный диагностикум сальмонелл тифа. Применяется в реакции агглютинации для обнаружения антител в сыворотке больных. 2. Сальмонеллезные О-диагностикумы содержат О-антигены различных групп сальмонелл (инактивированных 15%-ным раствором глицерина). Применяются для выявления О-аптител при сальмонеллезных инфекциях в реакции агглютинации с сывороткой больных. 3. Сальмонеллезные Н-монодиагностикумы. Используются в реакции агглютинации для определения заболевания в прошлом (анамнестическая реакция агглютинации) и реже с диагностической целью. 4. Vi — брюшнотифозный диагностикум. Применяется в реакции агглютинации при выявлении брюшнотифозного бактерионосительства. 5. Единый бруцеллезный диагностикум — взвесь бруцелл (инактивированных фенолом), подкрашенная метиленовым синим. Применяется для определения антител в сыворотках крови больных бруцеллезом людей и животных в реакциях агглютинации Райта и Хеддльсона. 6. Эритроцитарный сальмонеллезный О-диагностикум — взвесь эритроцитов с адсорбированными на них О-антигенами различных групп сальмонелл. Используется для постановки РПГА с сывороткой больного при уточнении клинического диагноза сальмонеллеэной инфекции. 7. Эритроцитарный Vi-диагностикум — эритроциты, сенсибилизированные очищенным Vi-антигеиом S. typhi, применяется в РПГА при выявлении брюшнотифозного бактерионосительства. [стр. 52 ⇒]

После заражения эмбрионов отверстия в скорлупе заливают парафином и переносят их в термостат, где инкубируют в течение 72 ч при температуре 37,5°C. В процессе инкубации их овоскопируют один раз в сутки, погибшие эмбрионы до вскрытия сохраняют в холодильнике при 4°C. На третий день инкубации все погибшие и выжившие эмбрионы вскрывают после предварительного их охлаждения при 4°C в течение 8 ч. 7. Перед вскрытием скорлупу над воздушным пространством дезинфицируют. Затем на границе с пугой стерильными ножницами срезают скорлупу, осторожно пинцетом снимают подскорлупную оболочку, разрывают хорионаллантоис, отгибая в стороны на края скорлупы разорванные участки мембраны. Из одного куриного эмбриона можно собрать 6...9 мл эмбриональной жидкости. 8. Контроль на стерильность взятых образцов эмбриональной жидкости производят путем посева 0,2 мл ее на МПА и МПБ. Посевы выдерживают в термостате в течение 5 сут. Помимо того, взятые из каждого эмбриона образцы эмбриональной жидкости проверяют на гемагглютинирующую активность. При наличии гемагглютинации и отсутствии бактериального загрязнения образец взятой жидкости титруют в реакции гемагглютинации. Если титры ГА выделяемого вируса низки, проводят еще 2...3 дополнительно слепых пассажа его на куриных эмбрионах. При отсутствии ГА активности выделяемого вируса после 2...3 пассажей дальнейшее выделение вируса из данного образца исследуемого материала прекращают. Идентификацию выделенного вируса проводят в реакции торможения гемагглютинации с заведомо известными типоспецифическими сыворотками вируса гриппа лошадей. II. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВИРУСА В РЕАКЦИИ ТОРМОЖЕНИЯ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (РТГА)... [стр. 125 ⇒]

В каждую лунку добавляют по 0,2 мл 1%ной суспензии эритроцитов. Необходимо ставить контроль на спонтанную агглютинацию эритроцитов (к 0,2 мл физиологического раствора добавляют 0,2 мл 1%ной суспензии эритроцитов). 22. Доски с лунками встряхивают и оставляют при комнатной температуре, учет реакции проводят через 30 мин. 23. Положительная реакция гемагглютинации оценивается по форме осадка эритроцитов, которые осаждаются не только на дне, но и на стенках, образуя «зонтик». В случае отрицательной реакции так же, как и в контроле, эритроциты оседают под действием тяжести, образуя на дне лунки диск с ровными краями. 24. Титром вируса считается его наибольшее разведение, при котором наблюдается еще и агглютинация эритроцитов, что и соответствует 1 АЕ. 25. После того как определен титр гемагглютинации вновь выделенного вируса, переходят к постановке реакции торможения гемагглютинации. Последняя основана на способности специфических антител нейтрализовать гемагглютинирующую активность вируса. 26. Для постановки реакции торможения гемагглютинации готовят рабочую дозу вновь выделенного вируса, в 0,2 мл которого содержится 4 АЕ вируса. С этой целью исходный вирус разводят физиологическим раствором во столько раз, сколько получают от деления на 4 цифры, указывающей гемагглютинирующий титр. Например, если титр гемагглютинации 1:128, рабочее разведение будет 128 : 4 = 32, т. е. в 0,2 мл разведенного 1:32 вируса будет содержаться 4 АЕ. Для его приготовления необходимо взять 31 мл физиологического раствора и добавить 1 мл исходного вируса. Перед постановкой основного опыта проверяют правильность выбора 4 АЕ. Для этого (рис. 10) берут 5 лунок, в первую и вторую наливают 4 АЕ по 0,2 мл, т. е. выбранное разведение вируса, после чего во вторую, третью, четвертую, пятую лунки наливают по 0,2 мл физиологического раствора. После пипетирования из второй лунки переносят 0,2 мл в третью, из третьей после смешивания 0,2 мл переносят в четвертую, а затем в пятую, из пятой... [стр. 128 ⇒]

...е. добавляют к содержимому по 1,0 см3 физиологического раствора. Сухая масса должна полностью раствориться при встряхивании в течение 3...5 мин и представлять собой гомогенную взвесь желтоватого цвета. 3.2. Сыворотки в ампулах (флаконах) разводят дистиллированной водой в соотношении 1:10. Сухая сыворотка должна растворяться при встряхивании в течение 3...5 мин и представлять собой прозрачную жидкость розоватокремового цвета. Разведенную сыворотку прогревают на водяной бане при температуре 56°C в течение 5 мин. Надосадочную часть сыворотки собирают для постановки РТГА. Разведенные антигены и сыворотки хранят при температуре от 2 до 8°C не более 24 ч. 3.3. Приготовление 1%ной суспензии эритроцитов петуха. Для получения 1%ной суспензии эритроцитов используют петухов старше 6 мес. Взятие крови у петухов производят из подкрыльцовой вены. Набирают необходимое количество крови в стеклянную пробирку с 2...3%ным раствором лимоннокислого натрия на физиологическом растворе (pH от 7,2 до 7,4) в соотношении 2:1. Полученную кровь трижды отмывают физиологическим раствором, осаждая эритроциты на центрифуге в течение 10 мин при 1500 об/мин. Из осадка эритроцитов готовят 1%ную суспензию, которую хранят при температуре от 2 до 8°C не более 4 сут. 3.4. Идентификация выделенного из патологического материала больных лошадей вируса в реакции торможения гемагглютинации (РТГА). 3.4.1. С целью выделения вируса используют носовые смывы от больных лошадей в первые 2...3 дня от начала заболевания. Для идентификации вируса в РТГА используют вируссодержащий материал с титром гемагглютинации не ниже 1:8. 3.4.2. Постановка реакции гемагглютинации. Реакция гемагглютинации является подготовительным этапом в постановке реакции торможения гемагглютинации. [стр. 135 ⇒]

Вначале готовят двукратные разведения вируссодержащего материала (или антигена из набора при исследовании сыворотки крови лошадей) от 1:2 до 1:1024. Для этого в ряд лунок вносят физиологический раствор в объеме 0,2 см3, 0,025 см3 для микрометода. Затем в первую лунку вносят по 0,2 см3 (0,025 см3) вируса, трехкратно пипетируют и переносят 0,2 см3 (0,025 см3) смеси во вторую и так далее до требуемого разведения. Из последней лунки 0,2 см3 (0,025 см3) смеси удаляют в дезинфицирующий раствор. В каждую лунку добавляют по 0,2 см3 (0,025 см3) 1%ной суспензии эритроцитов. Необходимо ставить контроль на спонтанную агглютинацию эритроцитов (к 0,2 см3 (0,025 см3) физиологического раствора добавляют 0,2 см3 (0,025 см3) 1%ной суспензии эритроцитов). Планшеты с лунками встряхивают и оставляют при температуре 18...20°C, учет реакции проводят после полного оседания эритроцитов в контроле. 3.4.3. Учет реакции. Положительная реакция гемагглютинации оценивается по форме осадка эритроцитов, которые оседают, образуя «зонтик». В случае отрицательной реакции, так же как и в контроле, эритроциты оседают, образуя на дне лунки «пуговку». Титром вируса считается его наибольшее разведение, при котором наблюдается агглютинация эритроцитов. 3.4.4. Постановка реакции торможения гемагглютинации. После того как определен титр гемагглютинации вновь выделенного вируса (или антигена из набора), переходят к постановке реакции торможения гемагглютинации. Последняя основана на способности специфических антител тормозить гемагглютинирующую активность вируса. 3.4.4.1. Для постановки реакции торможения гемагглютинации готовят рабочую дозу вновь выделенного вируса. С этой целью выделенный вирус разводят физиологическим раствором во столько раз, сколько получают от деления титра, полученного в РГА, на 4. Например, рабочее разведение будет 128 : 4 = 32, т. е. в 0,2 см3 (0,025 см3) разведенного 1:32 вируса будет содержаться 4 АЕ. Для его приго... [стр. 136 ⇒]

Смотреть страницы где упоминается термин "гемагглютинация": [449] [459] [471] [662] [34] [2] [303] [108] [109] [110] [112] [136] [54] [55] [56] [57] [58] [2] [10] [65] [5] [39] [3] [3] [27] [44] [295] [7] [18] [28] [119] [11] [222] [29] [20] [21] [5] [6] [85] [8] [18] [2] [364] [364] [2] [10] [999] [1015] [4] [1]