Справочник врача 21

Поиск по медицинской литературе


Sarcina lutea




При приготовлении паюсной икры применяют посол ее теплым насыщенным раствором соли, с последующим уплотнением икорной массы. При такой обработке уменьшается содержание влаги в продукте и повышается устойчивость паюсной икры при хранении. Зернистую икру просаливают «сухим» способом. Эта икра как более влажная сохраняется хуже, чем паюсная. В 1 г слабосоленой икры содержится 5·104 клеток, в соленой – 1·104. Видовой состав микрофлоры икры очень разнообразен. В нем преобладают главным образом палочковидные мезофильные сапрофиты. Наиболее часто встречаются E. coli, Proteus vulgaris, Pseudomonas fluorescens, Bac. mycoides, Micrococcus candidas, Sarcina lutea и др. Кроме бактерий в свежесоленой икре обнаружены актиномицеты, дрожжи, мицелиальные грибы (А.И. Куликов). При правильном хранении зернистой икры при температуре от минус 2 до минус 4 °С наблюдается снижение численности содержащихся в ней микроорганизмов. Под... [стр. 266 ⇒]

Кроме того, лактобактерии стимулируют фагоцитоз, синтез Ig, ИЛ-1, ИФН, ФНО, колонизацию облигатной флоры. Лактобактерии участвуют в коррекции биохимических процессов в кишечнике с участием протеолитических активных микроорганизмов, рециркуляции желчных кислот и холестерина, сохранении баланса состава микробных популяций после приема антибиотиков. Они подавляют рост следующих бактерий: Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, P. f lourescens, Salmonella typhosa, S. s chottmuelleri, Sarcina lutea, Shigella dysenteriae, S. p aradysenteriae, Serratia marcescens, Staphylococcus aureus, Streptococcus faecalis, S.lactis, Vibrio comma. [стр. 23 ⇒]

В последнее время в лабораториях Green и Racker изучали полностью реконструированные внутренние мембраны митохондрий из составных частей (субъединиц) повторяющихся единиц: головки, палочки и базальной пластинки (Zalkin, Racker, 1965; Kopaczyk et al,, 1967, 1968; Oda, 1967; Racker, 1967). Повторяющиеся единицы, описанные Fernandez-Moran (1964), выделяли с помощью легкого озвучивания, при этом свободно отделялись две части — головки и палочки. В лаборатории Racker изолированные головки добавляли к оставшейся после фрагментации базальной части мембраны. Базальная часть мембраны в этих опытах не разделялась на отдельные базальные пластинки и представляла внутреннюю мембрану митохондрий без грибовидных тел. При реконструкции мембран головки взаимодействовали с базальной частью с восстановлением АТФ-азной активности (Racker, 1967). После реконструкции мембран под электронным микроскопом головки имели вид сферических частиц диаметром 85 А, сидящих на мембране. Была изучена реконструкция одного типа элементарных частиц, а именно содержащего в базальной части цитохромоксидазу (комплекс IV). Для этого выделенные базальные пластинки комплекса IV комбинировали с другими компонентами повторяющихся единиц головка + палочка. Электронномикроскопические исследования показали, что при реконструкции одной цитохромоксидазы образуются гладкие везикулы, а при добавлении головок или головка + палочка появляются грибовидные структуры (Kopaczyk et al., 1968). РЕКОНСТРУКЦИЯ МЕМБРАН БАКТЕРИИ Впервые реконструировали бактериальную мембрану Razin и сотрудники в 1965 г. При воздействии додецил сульфата натрия на мембрану Mycoplasma происходила фрагментация мембран на частицы с константой седиментации 3,35. При последующем удалении детергента диали2 зом против буфера, содержащим ионы Mg +, происходило образование мембран, очень похожих на исходные. При повторной фрагментации и реагрегации полученных реконструированных мембран снова образовывались фрагменты с коэффициентом седиментации 3,35 и мембраны. В том же году Brown выделил мембраны из бактерий Sarcina lutea, а затем, фракционировав их с помощью озвучивания на компоненты с коэффициентом седиментации 5S и 70S, реконструировал мембрану из этих фрагментов в присутствии ионов Mg2+. Интересно, что фрагменты с коэффициентом седиментации 70 S при диализе без ионов Mg2* диссоциировали на компоненты с коэффициентом седиментации 5 S. В присутствии ионов Mg2+ эти частицы реагрегировали с образованием крупных компонентов с коэффициентом седиментации 30 S (Brown, 1965), Реагрегацшо мембран изучали также Butler и сотрудники (1967) на мембранах Micrococcus lysodeikticus. Эти мембраны были диссоциированы с помощью додецил сульфата натрия на очень мелкие субъединицы, которые реагрегировали в мембранообразиые структуры при диализе против раствора низкой ионной силы в присутствии Mg2*... [стр. 34 ⇒]

Necator americanus (инфекционные личинки). Notocotylus quingqserislis Onchocerca volvulus (опухоль) Paragonimus Westermanii взрослый Passalurus ambiguus Pelomyxa carolinensis Plasmoduim cynomolgi Plasmodium falciparum мазок Plasmodium vivax мазок Platynosomum fastosum взрослый Pneumocystis carnii (легкие) Prosthogonimus macrorchis (яйца) Sarcina lutea Sacrocystis Schistosoma haematobium Schistosoma japonicum яйца Schistosoma mansoni Stephanurus dentalus (ova) Stigeoclonium Strongyloides (личинка форм филарйи) Strongyloides parasitic (женск.) Toxocara (яйца) Toxoplasma (челов. происхождения) Trichinella spiralis (мышцы) Trichomonas muris Trichomonas vaginalis Trichuris sp. (муж.) Trypanosoma brucei Trypanosoma cruzi (ткани мозга) Trypanosoma equiperdum Trypanosoma gambiense Trypanosoma lewisi (мазок крови) Trypanosoma rhodesiense Urocleidus... [стр. 306 ⇒]

Sarcina Lutea Serratia Marcescens Shigella dysenteriae Shigella flexneri Shigella soonei Shigella paradisenteriae Spirillum rubsum Staphylococcus epidermidis Staphylococcus albus Staphylococcus faecalis Staphylococcus aureus Staphylococcus hemolyticus Streptococcus lactis Streptococcus viridans Vibrio cholerae Bacteriophage (E. coli) Influenza virus Hepatitis virus Poliovirus (Poliomyelitis) Rotavirus Tobacco mosaic virus Aspergillus flavus (yellowish green)... [стр. 53 ⇒]

Свежая, ничем не законсервированная икра быстро подвергается микробиальной порче. Основной метод консервирования — посол. При приготовлении паюсной икры применяют посол теплым насыщенным раствором соли, с последующим уплотнением икорной массы. Зернистую икру просаливают «сухим» способом, поскольку у зернистой икры влажность выше. Она сохраняется хуже паюсной. Видовой состав микрофлоры икры очень разнообразен. В нем преобладают главным образом палочковидные мезофильные сапрофиты. Наиболее часто встречаются Е. coli, Proteus vulgarus, Pseudomonas fluorescens, Вас. mycoides, Micrococeus Candidas, Sarcina lutea и др. Кроме бактерий в свежесоленной икре обнаруживаются дрожжи, плесневые грибы, актиномицетьт. При правильном хранении зернистой икры при температуре —2—4°С численность микроорганизмов снижается. Согласно действующей нормативной документацией в 1 г продукта должны отсутствовать БГКП, золотистый стафилококк, сульфитредуцирующие клостридии. Патогенные микроорганизмы, в том числе сальмонеллы должны отсутствовать в 25 г продукта. Нерыбные продукты моря — ракообразные и моллюски являются скоропортящимися продуктами. Помимо высокой обсемененности микроорганизмами причиной их быстрой порчи является активные воздействие ферментов самих животных. Качественный и количественный состав микрофлоры ракообразных и моллюсков различается в зависимости от места их обитания, сезона и способа улова. Микробиальная обсемененность КМАФАнМ свежевыловленных креветок колеблется от 102до 106 клеток на 1 г. Мясо живых крабов содержит мало бактерий от единиц до нескольких сотен на 1 г. Для ракообразных характерно наличие беспоровых аэробных мезофильных и психотропных бактерий родов Pseudomonas, Moraxella, Micrococeus, а также Vibrio. В свежевыловленных крабах и креветок условно-патогенные микроорганизмы обычно отсутствуют. Микробиальная обсемененность свежевыловленных моллюсков-мидий, устриц, кальмаров, морских гребешков колеблется от 102 до 104 клеток на 1 г. Некоторые моллюски добывают в районах загрязненных сточными водами, поэтому в микрофлоре этих моллюсков встречаюся энтерококки, кишечная палочка, протей, перфрингенс и др. условно-патогенные микроорганизмы. У всех морепродуктов нормируется содержание парагемолитического вибриона. 186... [стр. 186 ⇒]

Isolation/Purification The cultures were extracted with ethyl acetate. The extract was dried, filtered and evaporated.The residue was dissolved in a small volume of chloroform and added to a column of Merck silica gel (70-325 mesh ASTM). After an initial wash of the column with benzene-chloroform (1:2, then 1:3, v/v), a yellow band was eluted by chloroform. Evaporation of this fraction yielded a yellow oil which crystallized on titration with n-hexane. Biological Activity Stemphone was toxic to 10-day-old chick embryos; 100~g injected into the yolk sac gave 33% mortality (control 5%) within 24 hours. Stemphone also killed zebrafish larvae (average LCs0 at 24 hours was 1.6~g/ml), and inhibited growth of Bacillus megaterium and Sarcina lutea at levels of 10~tg per cup in a cylinder plate assay. Spectral Data UV:... [стр. 1000 ⇒]

Fungal Source Penicillium patulum (19. urticae), strain No. 562 from mixed feed. Isolation/Purification Extracted with ethyl acetate and chromatographed on silica gel. The substance was eluted with benzene-ethyl acetate (85:15 to 75:25, v/v); crystallized from isopropyl ether-n-hexane and toluene, followed by sublimation. Biological Activity Had no inhibitory effect (46mg/ml) on Bacillus megaterium, B. subtilis, B. cereus, Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Sarcina lutea, Micrococcus flavus, and Saccharomyces cerevisiae. Spectral Data UV:... [стр. 1801 ⇒]

Основным источником загрязнения атмосферного воздуха микроорганизмами является почва. Микрофлора воздуха: • пигментообразующие кокки (Micrococcus roseus, M. flavus, M. candicans); • сарцины (Sarcina flava, S. alba, S. rosea); • спорообразующие бациллы (Bacillus subtilis, B. mycoides, B. mesentericus); • актиномицеты; • грибы (Penicillium, Aspergillus, Mucor). Микрофлора воды Микрофлора воды зависит от ее происхождения. Микрофлора подземных вод малочисленна, а в артезианских скважинах в 1 мл воды содержатся единичные бактерии. С экологической точки зрения всю микрофлору водоемов можно разделить на две группы: 1) автохтонную (или водную); 2) аллохтонную, попадающую извне, при загрязнении различных источников. Автохтонная флора — это микроорганизмы, живущие и размножающиеся в воде. Формируется за счет микрофлоры почвы: • аэробные кокки (Micrococcus candicans, Micrococcus roseus, Sarcina lutea); • псевдомонады (Pseudomonas fluorescens); • протеи; • лептоспиры; • анаэробные бактерии (Bacillus cereus, Bacillus mycoides, Chromobacterium violaceum, бактерии рода Clostridium). Микрофлора пищевых продуктов В продуктах питания различают специфическую и неспецифическую микрофлору. Специфическая микрофлора — это культурная раса микроорганизмов, которая используется для приготовления продукта и является обязательным звеном в технологии его получения. Такие микроорганизмы изучаются микробиологами, работающими в лабораториях соответствующих предприятий пищевой промышленности. Санитарный микробиолог должен знать специфическую микрофлору для того, чтобы уметь отличить ее от неспецифической, загрязняющей продукты. [стр. 50 ⇒]

После охлаждения на поверхность рыбы попадают плесневые организмы из воздуха, где преобладает споровая флора. Микробное число жареной рыбы до упаковки в ящики не превышает 100 в 1 грамме. При упаковке микробная обсемененность возрастает. В рыбных жареных котлетах после двух суток хранения при 50С микробное число составляет 500 в 1 грамме. Порчу мяса рыбы вызывают бактерии родов Pseudomonas, Vibrio, которые способствуют разрушению кишечной ткани и появлению гнилостного специфического запаха. Порчу филе из свежей рыбы вызывают бактерии родов Achromobacter, Pseudomonas и другие. C.perfringens является главным виновником бомбажной порчи консервов из мелких рыб с томатной заливкой. При изготовлении консервов мелкую рыбу этих пород не разделывают, что приводит к развитию этого микроорганизма и быстрой порче продукта. Вздутие банок и гнилостную порчу рыбных консервов могут вызвать такие микроорганизмы как C.sporogenes, плоскокислую порчу консервов вызывают Bacillus megaterium, Bacillus stearotermophilus. При употреблении жареной рыбы или рыбных консервов возникают пищевые токсикоинфекции вызываемые чаще всего Bacillus cereus. Кроме того, рыба может служить механическим носителем возбудителей таких инфекционных болезней человека, как брюшной тиф, холера, туберкулез. В пастеризованной рыбе были обнаружены M.candida, M.luteus, Sarcina lutea, B.subtilis , B.cereus. Тело рыбы, как правило, покрыто слизью, которая содержит большое количество гликопротеидов, являющихся благоприятной средой для размножения микроорганизмов. В тоже время в сравнение с мясом патогенные микроорганизмы обсеменяют рыбу значительно реже. Свежая рыба Практически у только что выловленной рыбы число микроорганизмов в различных биотопах у одной особи примерно одинаковое, хотя у разных рыб может существенно колебаться: в кишечнике 104-108 клеток в 1,0 грамме содержимого, а на жабрах и чешуе 104-107 на 1,0см2 поверхности; колебание микроорганизмов у рыб может иметь и сезонный характер с двумя пиками: в марте – апреле и в июле – ноябре. Основные обитатели поверхности рыбы Flavobacterium, Pseudomonas, Achromobacter, Corynebacterium, Proteus, Vibrio parahaemolyticus, микрококки, БГКП, бациллы, клостридии, грибы. Антимикробная устойчивость тканей рыбы меняется после смерти, слизь на чешуе превращается в питательный субстрат для бактерий, а микроорганизмы кишечника, жабр проникают в мышцы, и наступает гниение рыбы, которое идет в несколько фаз: размножение микробов на поверхности рыб, активное гниение с распадом белков. При длительном хранении свежую рыбу нужно охладить, заморозить, засолить. Перед этим продукт подвергается первичной обработке: рыбу тщательно моют, что значительно уменьшает ее микробную обсемененность, удаляют жабры (зябрят), обезглавливают, потрошат, вторично моют и филетируют. При этом филе может контаминироваться микроорганизмами... [стр. 86 ⇒]

Почва является главным резервуаром и естественной средой обитания микроорганизмов в природе. Суммарное количество микроорганизмов в почве составляет 109−1010 микробных клеток в 1 г почвы. Качественный состав микрофлоры почвы очень разнообразен: множество видов бактерий (преимущественно спорообразующих), актиномицетов, спирохет, архебактерий, простейших, синезеленых водорослей, микоплазм, грибов, вирусов. Распределение микробов в почве неравномерно. Наиболее обильна микрофлора на глубине 10−20 см. В составе микрофлоры почвы принято выделять так называемые физиологические группы микроорганизмов, которые участвуют в различных этапах постепенного разложения органических веществ. 1. Бактерии-аммонификаторы (образуют аммиак из органических соединений). 2. Нитрифицирующие бактерии (окисляют аммиак до нитритов и нитратов). 3. Азотфиксирующие бактерии (усваивают атмосферный азот и синтезируют азотсодержащие органические соединения). 4. Бактерии, расщепляющие клетчатку и вызывающие различные виды брожений (молочнокислое, спиртовое, маслянокислое, уксусное и др.) 5. Бактерии, участвующие в круговороте серы, железа, фосфора и других элементов. Микрофлора воды. Факторы, влияющие на количество микробов в воде. Микрофлора воды Микрофлора воды зависит от ее происхождения. Микрофлора подземных вод малочисленна, а в артезианских скважинах в 1 мл воды содержатся единичные бактерии. С экологической точки зрения всю микрофлору водоемов можно разделить на две группы: 1) автохтонную (или водную); 2) аллохтонную, попадающую извне, при загрязнении различных источников. Автохтонная флора — это микроорганизмы, живущие и размножающиеся в воде. Формируется за счет микрофлоры почвы: • аэробные кокки (Micrococcus candicans, Micrococcus roseus, Sarcina lutea); • псевдомонады (Pseudomonas fluorescens); • протеи; • лептоспиры; • анаэробные бактерии (Bacillus cereus, Bacillus mycoides, Chromobacterium violaceum, бактерии рода Clostridium). 58. Воздух как фактор распространения патогенных микроорганизмов. Показатели микробной загрязненности воздуха и микробиологические методы оценки санитарно- бактериологического состояния воздуха закрытых помещений. Микрофлора воздуха Воздух представляет собой среду, в которой микроорганизмы не способны размножаться. Это связано с отсутствием в воздухе питательных веществ и недостатком влаги. Жизнеспособность микроорганизмов в воздухе обеспечивается нахождением их в частицах воды, слизи, пыли. Воздух закрытых помещений и атмосферный значительно различаются по... [стр. 68 ⇒]

Басқа микроорганизмдерге жарық қуаты зиянды әсер етіп, оларды жояды. Жарықтың бактерицидтігі толқын ұзындығына байланысты болады: ол неғұрлым қысқа болса, оның қуаты да соғұрлым көп боп келеді. Тікелей түскен күн сәулесінің әсерінен көптеген микробтар, әсіресе патогенді түрлер (туберкулез қоздырғышы 3-5 са­ғатта, аусыл вирусы 1 сағатта) залалсыздандырылады. Күн сәулесі мол жерде, микробтарда аз болады. Сәулелендіру фотохимиялық тотық­тыру процесін күшейтеді, оның мик­робтарға әсері оттегі немесе оңай тотығатын заттар бар жерде артады. Микробтардың жарыққа сезімталдығы әртүрлі. Толқын ұзындығы 234 нм болатын сәуле ішек таяқшасының, 265 нм – Staphilococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, 281 нм – Serratia marcescens сияқты бактериялардың тіршілігін тоқ­татады. Пигменттер түзетін микробтар (ашық сары – Sarcina lutea, қара меланин – Aspergillus niger) жарық әсеріне төзімдірек болып келеді. Иондаушы радиацияға логарифмдік өсу фазасындағы бөлі­нуші жасушалар өте сезімтал. Жасушаларды ұзын толқынды сәуле­лермен алдын ала өңдеу олардың радиорезистенттілігін (сәулелен­ді­руге төзімділігін) арттырады. Осылайша,... [стр. 78 ⇒]

Микрофлора воды Автохтонная флора (водная) – это микроорганизмы, живущие и размножающиеся в воде. Микробное население отражает состав микрофлоры почвы, с которой вода соприкасается.  Аэробы: Micrococcus roseus, Sarcina lutea, Bacteroides aqualitis, Pseudomonas fluorescens.  Анаэробы: Bacillus cereus, Bacillus micoides Аллохтонная флора – это микроорганизмы, попавшие извне при загрязнении водоемов, в том числе и патогенная... [стр. 35 ⇒]

Микрофлора воды  Автохтонная флора (водная) – это микроорганизмы, живущие и размножающиеся в воде. Микробное население отражает состав микрофлоры почвы, с которой вода соприкасается.  Аэробы: Micrococcus roseus, Sarcina lutea, Bacteroides aqualitis, Pseudomonas fluorescens.  Анаэробы: Bacillus cereus, Bacillus micoides  Аллохтонная флора – это микроорганизмы, попавшие извне при загрязнении водоемов, в том числе и патогенная... [стр. 34 ⇒]

Посев, произведенный таким образом, дает возможность дифференцировать подвижные виды микроорганизмов от неподвижных. Задание 4. Изучить культуральные свойства микроорганизмов воздуха. Среди микроорганизмов воздуха закрытых помещений наиболее часто при засеве на плотные среды обнаруживаются бактерии родов Micrococcus (M.roseus, M. flavus, M.candicam, M. lutea), Sarcina (S. flava, S. alba, S. rosea), Bacillus... [стр. 74 ⇒]

Ашық су тоғандарында микроорганизмдердің сандық байланыстары әр түрлі шектерде өзгеріп отырады: 1мл–де бiрнеше он шақты, жүздеген, миллионға дейін болады, бірақ ол оның ластануының дәрежесi, метеорологиялық шарттардың ауысымына, суқұбырдың түрлеріне, маусым және тағы басқаларына байланысты болады. Сутоғандарының барлық микрофлорасын экологиялық тұрғыда екi топқа бөлуге болады: 1. аутохтонды (немесе сулы) аллохтонды, әр түрлі көздерден ластану кезінде Аутохтонды флора - суда өмiр сүретін және көбейетiн микроорганизмдер. Судың микробтарын топырақтың микрофлорасының құрамын бейнелеп көрсеткендіктен, , топырақта өте көп таралған микробтар табылады. Суда өмір сүруге бейімделген микроорганизмдер кұрамында тұрақты болатын микроорганизмдерді судың арнайы флорасы деп атайды.. Оларға аэробты кокктар жатады: Micrococcus candicans, Micrococcus roseus, Sarcina lutea Pseudomonas fluorescens, Proteus , Leptospira өкiлдерi. Таза ластанбаған сутоғандарында оттегiні қажетсінбейтін бактерия аз. Көбінесе Serratia marcescens, Bacillus cereus, Bacillus mycoides, Chromobacterium violaceum, Clostridium және басқалары болады. Су түбінде және жағалаудағы аймақта микробтар саны көп болады, себебі жаңбыр суы және жағажайдың топырағынан бактериялардың көптеп түсуінен болады. Судың микроорганизмдері табиғаттағы заттар айналымында түбегейлi рөл ойнайды. Су тоғандарындағы биологиялық белсенділік жазғы-күзгi мерзiмде ең жоғары дәрежеде болады. Сапробтық Су тоғандарының өздiгiнен тазаруы жануар және өсiмдiк тектес және патогендiк микроорганизмдерден ластанып қалатын органикалық субстраттарынан босау процессі болып табылады. Бұл үрдiс тек қана органикалық ластанудан кейін жүргізіледі және органикалық заттарды шапшаң жiктеуге сондай-ақ әр түрлi бактериялар санының азаюына алып келген сапрофиттер су микрофлорасы тiршiлiгін белсендiріп, органикалық заттардың тез ыдырауынан бактериялар санынын азаюына әкеледі. Судың өздiгiнен тазаруы микроорганизмдердің болуымен және органикалык заттармен қаншалықты судың ластану үрдістерінің көлемі болып табылады. Өздiгiнен тазаруға су тоғанындағы микроорганизмдердің тұрақты түрлерiнің болуымен сипатталады. Дегенмен биоценоздағы сандық және сапалы байланыстары тұрақсыз, ол органикалық заттардың, яғни сапробтық қасиетіне байланысты сипатталады. «Сапробтық» термині грекше (sapros - шiрiген) су тоғандарының ерекшелiктері кешенi, судағы тиiстi микроорганизмдердің дамуымен анықталады, яғни түрлi мөлшерде органикалық заттардың болуы қажет. 65... [стр. 65 ⇒]

Помимо различных веществ и ферментов, широко представленных не только в фагоцитах, но и в любых клеточных системах организма, в фагоцитах содержатся некоторые вещества, имеющие прямое отношение к их фагоцитарной деятельности. Таких бактерицидных веществ в настоящее время известно три: лизоцям [Флемминг (A. Flemming, 1922, 1932)], фагоцнтин (Хирш (Y. Hirsch, 1956, 1959)] и лейкин [Скарнес (R. Skarnes, 1956), Хирш, 1959]. Среди указанных веществ наиболее хорошо изучен лизоцим. Он является ферментом ацетиламинополисахаридазой, обладающим ^итическим и бактерицидным действием. Лизоцим быстро лизирует микробные виды со стенками, состоящими из веществ, чувствительных к его ферментативному действию (Micrococcus lysodeikiicus, Sarcina lutea, Вас. subtilis и др.). Кроме того, лизоцим обладает ингибиторным и летальным действием в отношении более широкого круга микроорганизмов (протей, стафилококк, пневмококк, дизентерийные бактерии др.), однако в этих случаях он часто действует не самостоятельно, а комбинируясь с другими факторами. Так, по данным Ралстона и Эльберга (D. Ralston, S. Elberg, 1961), лизоцимподобиое вещество, извлеченное из моноцитов нормальных кроликов, совместно с добавленным к нему глицином вызывает гибель бруцелл овечьего типа. В полиморфноядерных лейкоцитах содержатся большие количества лизоцима, примерно около 1 мг на 1 г сухого веса клеток. 50% лизоцима содержится в нейтрофильных гранулах (Карновски, 1962). Вопрос о содержании лизоцима в макрофагах пока остается открытым. Лейкин и фагоцитин являются сложными веществами белковой или пептидной природы. Лейкин действует преимущественно на грамположительные бактерии, в то время как объектом действия фагоцитина являются грамотрицательные микроорганизмы. Фагоцитин был выделен Хиршем из нейтрофилов кролика, где он содержится в большом количестве, также преимущественно в нейтрофильных гранулах (Карновски, 1962). Значительно меньше его имеется в нейтрофилах человека и морской свинки, а в лейкоцитах мышей и крыс он вообще не был обнаружен. [стр. 162 ⇒]

Гиппократ (456 г. до н.э.) полагал, что во время эпидемий воздух содержит особые болезнетворные испарения – «миазмы». Около 2 тыс. лет назад римский философ-материалист Лукреций Кар (99-55г. до н.э.) считал, что у каждой инфекции есть особые «семена». Римский ученый энциклопедист Марк Теренций Варро (116 -27 г. до н.э.) предполагал наличие мельчайших существ в воздухе. Ему приписывается высказывание о том, что эти существа невозможно видеть глазом; они витают в воздухе, проникают в тело через рот и нос и причиняют людям тяжкие страдания. Доказать существование микроорганизмов в атмосферном воздухе впервые удалось лишь в XIX в. французскому ученому Луи Пастеру. Изучая вопросы самозарождения жизни (1860 г.), он определял содержание микроорганизмов в воздухе комнат, улиц, гор. Для этого кончик трубки, отходящей от стеклянной колбы с питательной средой, отламывал, а после того воздух проникал в колбу, быстро запаивал трубку и взбалтывал. Через некоторое время питательная среда изменялась, становилась мутной («прорастала»). Это означало, что в неё проникли микроорганизмы из воздуха. В настоящее время установлено, что воздух – неблагоприятная среда для микроорганизмов, так как в нем нет питательных веществ, постоянной оптимальной для микроорганизмов температуры, часто отсутствует влага, губительно на микроорганизмы действуют солнечные лучи. Жизнеспособность микроорганизмов в воздухе обеспечивается нахождением в нем частиц воды, слизи, пыли, кусочков почвы, на которые они оседают. Микроорганизмы в воздухе распространены неравномерно. Например, их больше в центре города, так как они адсорбируются на поверхности плотных частиц и остаются в воздухе во взвешенном состоянии. Меньше микроорганизмов в воздухе на окраинах, над полями, лесами, озерами, морями, высоко в горах. Тем не менее, микроорганизмы, главным образом споры фитопатогенных грибов, обнаружены даже в облаках. На больших высотах встречаются микроорганизмы, образующие пигменты, которые повышают их устойчивость к неблагоприятным условиям жизни, особенно к ультрафиолетовым излучениям. Выше 2 - 4 км над уровнем моря микроорганизмы не обнаружены. В воздух микроорганизмы попадают главным образом из почвы, в жилые и животноводческие помещения – вместе с наружным воздухом, с пылью, поднимающейся с пола. Чаще всего в воздухе встречаются споры бактерий, аскоспоры дрожжей, конидии грибов и актиномицетов. Кроме того, в воздухе время от времени обнаруживаются и некоторые относительно устойчивые неспорообразующие микроорганизмы, например Micrococcus luteus, Sarcina lutea, Achromobacter, а также бактерии из группы кишечной палочки (Escherichia coli). [стр. 4 ⇒]

Существует множество вод, которые имеют различное происхождение, и поэтому в них формируются специфические условия обитания для микроорганизмов. Различают: пресные поверхностные воды естественных водоемов - озер, рек, ручьев и искусственных – прудов, водохранилищ; подземные воды – почвенные и грунтовые, ключевые, артезианские, колодезные; соленые воды океанов, морей и озер; атмосферные воды, сформированные из дождя или снега. По характеру использования водные ресурсы подразделяются на питьевую воду, воду плавательных бассейнов, хозяйственный и медицинский лед. Природные воды загрязняются сточными водами муниципалитетов, пищевых и сельскохозяйственных предприятий, биотехнологических производств. Помимо этого загрязнение природных водоемов может происходить за счет попадания в них большого количества талых и дождевых вод. Микрофлора водоемов складывается из микроорганизмов двух больших групп – автохтонных (присущих) воде и аллохтонных (привнесенных) в нее извне. Автохтонная микрофлора водоемов обычно представлена аэробными микрококками (Micrococcus roseus, Micrococcus candicans), сарцинами (Sarcina lutea), псевдомонадами (Pseudomonas fluorescens). Кроме того, в воде активно развивается вульгарный протей и сапротрофные лептоспиры. Из анаэробов выделяют бациллы (Bacillus mycoides, Bacillus cereus) и клостридии различных видов. Микроорганизмы вод играют существенную роль в круговороте веществ в природе. Благодаря им происходит расщепление органических веществ, попадающих в водные бассейны. В свою очередь продукты жизнедеятельности микроорганизмов служат питательной средой для других организмов, обитающих в воде. Краткая микробиологическая характеристика некоторых видов вод Речная вода. Содержание микроорганизмов в реках тесно связано с сезонностью, то есть возрастает весной и осенью (в период половодий и дождей) за счет попадания в воду органических веществ. Кроме того, на содержании микроорганизмов в реках отражается состояние той территории, по которой протекают река и ее притоки. Так, в верховьях рек вода обычно чистая, а при протекании через крупные населенные пункты с развитой промышленностью обычно довольно сильно загрязняется. Озерная вода. Микрофлора озер очень разнообразна по своему составу, так как в них обитают представители практически всех таксономических групп: бактерии, грибы, водоросли, простейшие. Их количество... [стр. 78 ⇒]

...flourescens; — Salmonella lyphosa; — S. schottmuelleri; — Shigella dysenteriae; — S. paradysenteriae; — Sarcina lutea; — Serratia marcescens; — Staphylococcus aureus; — Streptococcusfaecalis; — S. lactis; — Vibrio comma. рые в процессе жизнедеятельности образуют органические кислоты, что приводи(» сниж ению p H -среды киш ечника и препятствует размножению патогенной, п и и т стной и газообразуюшей микроф лоры киш ечника. [стр. 868 ⇒]

В оффицинальной медицине существует множество растений, обладающих противогрибковым действием, одним из них являются листья шалфея (Folia Salviae), которые содержат от 0,5% до 2,5% эфирного масла, в состав которого входит цинеол (до 15%), l-α-туйон, d-β-туйон, d-α-пинен, сальвен, d-борнеол (8-14%), d-камфора, цедрен. Кроме того, листья содержат дубильные вещества, флавоноиды, урсоловую и олеаноловую кислоты, витамин Р, никотиновую кислоту, горечи, фитонциды, уваол, парадифенол. В работе Dragan T. (Chemical Composition and Antimicrobial Characteristic of the Essential Oils Obtained from the Flower, Leaf and Stem of Salvia officinalis L. // Journal of Essential Oil Research. Vol.14, N6, 2002) была изучена антибактериальная активность масла на следующих микроорганизмах: Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Sarcina lutea, Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus niger. Выявлено, что концентрация масла, которая останавливала рост В. Subtilis, составляла 2%, St. Aureus - 0,2%, E. coli и Р. Aeruginosa - 4%. На другие штаммы микроорганизмов масло также оказывало антибактериальное действие. [стр. 1 ⇒]

А 61 К 31/00 фзоудоротванный кокнтот ссср ао денни нэобротеннй н открытн11 Опубликовано 07 01.82,Бюллетень № 1 (53) УДК 615 . 771, .7(088.8) Дата опубликования описания. 09.01.82 Иностранцы Накао Исида, Хироси 11аеда, фудзио Сузуки, и Итуро Иицутани (Япония ) (72) Авторы изобретения Иностранная бирма "Кирин Сиграм Лимитед" (Япония ) (71) Заявитель (5ч) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕГ1ЕСТВА KS-2-А, ОБЛАДАЧЦЕГО ЧРОТИВООПУХОЛЕВ :П1 И АНТИ101КРОБНЫМ ДЕ11СТВИЕИ Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается получения веществ, обладающих противоопухолевым и антимикробным действием. Целью изобретения является получение вещества KS-2-А, обладающего противоопухолевым и анткмикробным действием. Цель достигается тем, что штамм Daeda1еа dickinsu KSDD 6(FERM-P N 3993), Lentinus edodes KSLE 7 (FERM-P N 399") KSLE 28 (Fi R11-P N 4196) культивируют в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, в аэробных условиях при 25 4 С и экстрагируют целевой продукт из биомассы горячей водой или 5%-ным водным раствором хлористого натрия при 80-100 С при перемешивании. В качестве питательной среды используют любую обычную среду, которая содержит глюкозу, крахмал, органические кислоты, в качестве источ ника углерода — полипептон, дрожжевой экстракт, мочевину, в качестве источника азота — витамин и неорганические соли, для лучшего эффекта до-. бавляют кукурузный экстракт или бар» ду ° Питательную среду подвергают фильтрованию или центрифугированию. Полученный мицелий подвергают затем экстракционной обработке. Целесообразно экстракционной обработке подвергать тонко измельченный полученный мицелий с использованием для этого горячей воды или разбавленных водных раст15 воров соли при 60-130 С, предпочтительно от 80 до 100 С, причем такие растворы содержат приблизительно 5% хлористого натрия. Такую экстракционную обработку удобно проводить с пер ремешиванием в течение примерно от 5 мин до 3 ч, предпочтительно в тече, ние 30-60 мин. После отделения твер-, дого материала экстракт, если это необходимо, подвергают осадительной об-; об работке с использованием гидрофильно-, 897099 го растворителя, например метанола или этанола. Полученньп(таким образом осадок собирают фильтрованием или центрифугированием с последующей лиофилизацией с получением вещества KS ° Это вещество KS растворяют в воде,добавляют в приготовленный раствор равный объем насыщенного. водой фенола, и конечную смесь подвергают интенсивному встряхиванию в холодных ус- 10 ловиях, в результате чего получают водный спой. В этот водный слой дo авляют насыщенный водой фенол, и за тем цикл встряхивания и центрифугирования повторяют дважды. Полученные 1 таким образом водные слои объединяют и затем добавляют в них диэтиловый эфир. 1 онечную смесь подвергают встряхиванию и собирают водный слой. Остаточный серный эфир из водного 20 слоя удаляют барботированием через него газообразного азота. В полученный таким образом водный слой добав.ляют четыре объема чистого этанола. Полученный в результате этого осадок 2 растворяют в буфере 0,01 М трис-соляная кислота (рН 6,95), а конечньп( раствор заливают в целлюлозную колонну, которую предварительно активируют и обрабатывают указанным буфером. 0 Этим же буфером осуществляют элюирование из колонны. Фракции, которые содержат вещество KS-2-А, собирают и после диализа и пиофилизации в виде белого аморфного порошка получают вещество KS-2-А. Вещество KS-2-А обладает следующими физико-химическими свойствами. Элементарный анализ, Е: С 39,5; Н6 5; й!,1. Зольность: следы (0,42). Молекулярный вес: 9000+3000 (путем ультрафильтрования); 7000-9000 (центрифуг .рованием по градиенту равновесной плотности); 8000 †30 (согласно методу поляризации флюоресциена) . Внешний вид — белый аморфный порошок. Температура разложения 185 С 50 (данные основаны на измерении температуры побурения в соответствии с капиллярным методом с применением си ликонового масла МГ-ЗО). УФ-спектрограмма. Отсутствуют какие-либо конкретные полосы максимуS5 мов поглощения. рН водного раствора этого вещества составляет 7,25. Р Растворимость. Вещество растворимо в воде, нерастворимо в этаноле, ацетоне, н-гексане, н-бутаноле, феноле и других органических растворителях. Удельное вращение плоскости поляризации света 25 с(3д е67,о е2,0е (в воде), (C= 0,452ö Гомогенность . Центрифугирование вещества KS-2-А осуществляют с линейным градиентом 5-20Е хлористого цезия в буфере 0,1 М трис-соляная кислота 1(рН 7,2) при скорости вращения 38000 об/мин и температуре 4 С в те-. чение 15 ч. Предлагаемое вещество яв( ляется гомогенным. Сравнительные экс перименты по седиментации с вирусными нуклеиновыми кислотами показывают, что предлагаемое вещество не включает в себя вирусных частиц, РНК или ДНК. Электрофорез осуществляют. на ,ацетате целлюлозы с использованием буфера 0,1 И уксусная кислота-пиридин (рН 3, 5). Для сравнения используют хондроитин. По истечении 30 мин электрофореза при токе 0,6 мА/см и напряжении 160 В хондроитинсульфат двигается в направлении катода, проявляя подвижность, равную 4 см/30 мин, тогда как вещество KS-2-А двигается в направлении анода с небольшой скорос" тью в течение 90 мин (подвижность см в 90 мин). Данное вещество явля-. ется электрофоретически гомогенным. Кроме того, электрофорез, осуществленный в тех же самых условиях, что и указанные, за исключением того, что в данном случае в качестве буфера используют систему 1 M пиридин-уксусная кислота (pH 7,0), подтверждает, что данное вещество является гомогенным. Цветная реакция: Фенольно-сернокислотная реакция Положительная Антроновая реакция Положительная Реакция Молиша Положительная Реакция Элсон-Моргена Отрицательная Карбазол-сернокислотная реакция Положительная. Реакция с реагентом Фолина-Сьокарто Положительная Биуретовая реакция Положительная Реакция с ФИТЦ (флуоросцеинизотиоцианат ) Положительная Окрашивание толуидиновым голубым О Отрицательная Нингидриновая реакция Положительная Сахарный состав Вещество KS-2-A подвергают кислотному гидролизу с последующим аль- % дитолированием и затем ацетилированием, после чего газохроматографическим путем определяют сахарный состав . Это вещество состоит в основном из маннозы и содержит небольшое количество глюкозы и галактиозы, а также незначительные количества арабинозы и ксилозы, причем весовое содержание этих компонентов соответственно 74:12:12:1:1. !% Аминокислотный состав. 10 мг вещества KS-2-А помещают в вакуумную камеру совместно с добавленными к нему 3 мл 6 н. соляной кислоты, после чего его подвергают кис- 20 лотному гидролизу при 110 С в тече- 1ние 22 ч. Затем в роторном испарите-, ле удаляют соляную кислоту и с помощью автоматического аминокислотного анализатора осуществляют анализ 23 на аминокислоты. К содержащимся аминокислотам в основном относятся треонин, серии, глутаминовая кислота, ала и аммиак. Кроме того, в небольших количествах содержатся аспарагиновая кислота, пролин, глицин, валин и лизин. В виде следов или в ничтожно малых количествах содержатся метионин, изолейцин, лейцин, тирозин, фенилаланин, гистидин, аргинин и цистин. Вещество KS-2-А не оказывает непосредственного цитотоксического эффекта на клетки опухоли. При введении вещества KS-2-А в тело живого ор- ганизма оно улучшает защитную функцию организма и косвенно ослабляет рост опухолевых клеток, что в дальнейшем приводит к ликвидации этих опухолевых клеток. Кроме того, вещество KS-2-А не проявляет никакого бактерицидного или противовирусного действия. Однако в том случае, когда это вещество KS-2-А вводят в живой организм, оно улучшает защитную функцию организма и, следовательно, косвенно ингибирует рост бактерий и вирусов в живом организме, Вещество KS-2-А способно эффективно излечивать людей и животных от многих инфекционИ ных заболеваний, в частности от вирусного катара верхних дыхательных путей, гриппа, герпеса, коровьей оспы, энцефаломиокардита, инфекционных 99 а гепатитов, бепгенства, а также заболеваний, вызванных микроорганизмами. Pseudomonas, Candida, Listeria, Staphylococcus, Streptococcus, 0iplococcus, Neisseria, Escherichia соli, Micobacterium tuberculosis, Shiro- . chaetales H Protosoa. Пример 1. Микроорганизм Daedalеа dick1пз1i KSDD 6 (ГЕКИ-P N 0.3994) культивируют в 10 л среды, которая содержит барду, в аэробных условиях (1,8 об./об./мнн ) при 24 С в течение 11 дней. Затем питательную среду подвергают центрифугированию, в результате чего получают 38 г мицелия. Полученгпгй таким образом мицелий смешивают с 10 л горячего 5Х-ного раствора хлористого натрия и кипятят в течение 60 мин с последую- щим отделением верхнего слоя и осадка. Затем вггделенный таким образом верхний слой смешивают с этиловым спиртом в таком соотношении, что конечная концентрация этилового спирта составляет 707, и оставляют стоять в течение ночи в холодной темной комнате. Выпавший осадок собирают и лиофилизируют с получением 4 г вещества KS. Это вещество KS обладает следующими физико-химическиии свойствами. Элементарный анализ tc помощью С-Н-N-метра), Е: С 18,6 2,37.; -Н 2,8 0,4; N 1,3 .0,2. Зольность — 1О, 5 1, ЗЖ. Молекулярный вес (определяют с помощью колонки с биогелем ряда P u Амикон-ультра — фильтрования) приблизительно 70000. Температура разложения 300 С или выше. Растворимо в воде, нерастворимо в этаноле, н-бутаноле, ацетоне и гексане. Цветная реакция 1с использованием 1Х-ного водного раствора вещества к ): Антроновая реакция Положительная Реакция Морган-Элссна Отрицательная Карбазол-сернокислотная реакция Положительная рН водного раствора вещества KS находится в интервале от 6 до 7. Внешний вид: белый аморфный порошок. Аминокислотный состав (на !00 г), r: аргинии 0,4+0,05; лизин О,Я 0,06; гистилин 0,4+0,05; фенилаланин 0,2— 897099 «+0,03; тирозин 0, 0,03;лейцин 0,3+ 0,04; изолейцин О,ЗЫ,04; метионин 0,1 0,01; валин 0,4+0,05; алании 0,640,08; глицин О,.".. 0, 1; пролин 0,6- 0,8; глутаминовая кислота 1,2 + +0,2; серии 14-0,1; треонин 0,8 0,1; асапарагиновая кислота 140,1; триптофан 0,06+0,01; цистин. 0,3 0,04. Сахарный состав (определяют газохроматографическим путем), 7.: глюкоза 574 6; галактоза Ы0,5, манноза 26 3; ксилоза 8+0,8, арабиноза 5 0,3. Пример 2. Вещество KS, полученное в ходе проведения процесса примера 1, растворяют в воде и в этот1 раствор добавляют равный объем насыщенного водой фенола. Затем эту смесь подвергают встряхиванию на холоду, после чего подвергают центрифугированию с получением водного слоя. В этот водный слой добавляют водонасыщенный фенол и затем встряхивание и разделение центрифугирбванием повторяют дважды. Полученные таким образом водные слои объединяют друг с другом с последуюцим добавлением этилового эфира. Полученную массу подвергают встряхиванию, а затем собирают водный спой. Остаточный диэтиловый эфир иэ воды удаляют барбатироваиием через нее газообразного азота. В полученный водньп слой добавляют четыре объема чистого этанола. После этого смесь оставляют стоять в течение ночи в холодной темной комнате. Полу- З ченный таким образом осадок растворяют в буфере 0,01 М трис-соляная кис лота 1 рН 6,95 ), а приготовленный раствор заливают в -колонку с целлюлозой Эктеола, которую предваритель- 40 но активируют и обрабатывают буфером. Затем элюирование продукта из колонки осуществляют тем же самым буфером. Фракции, которые характеризуют содержание KS-2-А, собирают и после диализа и лиофилизации получают 0,7 r вещества KS-2-А. Пример 3 ° Микроорганизм .ent1nus eo1odes KSL Е 28 (FERN-P N 0.4196) подвергают культивированию путем встряхивания в среде, которая о содержит барду, при 24 С в течение 14 дней, после чего конечную питательную среду выливают в 10 л среды, 55 приготовленной разбавлением барды до удельного веса 1,012-1,020, с после-, дующим культивированием в ней при 24 С в аэробных условиях (1,8 об./ /об/мин ) н течение 11 дней. Затем конечную питательную среду подвергают центрифугированию, в результате чего получают 38 r мицелия. Полученный таким образом мицелий смешивают с 10 л горячего 57. †но раствора хлористого натрия и кипятят в течение 60 мин с последующим отделением верхнего слоя и выпавшего осадка. Полученный таким образом верхний слой смешивают с этиловым спиртом в таком соотношении, что конечная концентрация этилового спирта 707., и оставляют стоять в течение ночи в холодной темной комнате. Таким образом, получают осадок, вещества КЯ. Полученное по изложенному вещество KS растворяют э воде и в приготовленный раствор добавляют равный объем водонасыщенного фенола. Конечную массу подвергают встряхиванию в холодных условиях, после чего .подвергают центрифугированию с получением водного слоя. В этот водный слой добавляют насыщенного водой фенола и дважды повторяют операции встряхивания и разделения центрифугированием. Полученные таким путем водные слои объединяют друг с другом, а затем добавляют в них диэтилового эфира. Полученную конечную массу подвергают встряхиванию и собирают водный слой. Остаточный диэтиловый эфир из водного слоя удаляют барботированием через него газообразного азота. В конечный водный слой добавляют четыре объема чистого этанола. Конечную 1чассу оставляют стоять в течение ночи в холодной темной комнате. Полученный таким образом осадок растворяют в буфере 0,01 И трис-соляная кислота (рН 6,95), а конечный раствор заливают в колонку с целлюлозой Эктеола, которую предварительно активируют и обрабатывают указанным буфером. Элюирование продукта из колонки осуществляют этим же буфером. Фракции, которые характеризуются содержанием вещества KS-2-А, собирают, подвергают диализу и лиофилизируют. Таким образом получают 0,7 г вещества KS-2-А. Пример 3 (экспериментальный). Асцитные опухолевые клетки саркомы 180 отбирают с помощью шприца и разбавляют в 10 раз физиологическим раствором поваренной соли. Затем приготовленную таким образэм суспензию внутримышечно вводят в левое бедро мышам 40 001 (Qg) в количестве по 0,1 мл (1О+ клеток на каждую 0,1 мл) 10 897099 Доза, мг/кг Показательь эффективнос Средин вес Вес опухолевых частей, г мертость, опухолевых частей ти 100 50 0,09 0,21 1,0; 03; 02; 0,15, а у других четырех мышей имелись только следы опухолей 0,02 0,05 0,05; 0,4, у остальных 6 мышей имелись 10 только следы опухолей У всех 8 мышей имелись только следы опухолей l,01 2,20 34; 26; 48; 68, у остальных 4 мышей имели с ь следы опухолей 0,1 2,17 100 100 1,8; 3,0; 0,7; 3,4 18;23;20;25 Показатель эффективности — средний вес опухолевых частей у мышей той группы, которым давали лекарственное средство/средний вес опухолевых частей у мышей контрольной группы. На каждую особь. По истечении 24 ч вещество KS-2-А, полученное в ходе проведения эксперимента примера 3, растворяют в физиологическом растворе поваренной соли и перорально вводят в виде 12 порций через каждые 24 ч в организм мышей четырех групп, каждая из которых включает по 8 особей, причем каждой мьпчи карый раз дают в зависимости от группы соответственно по 100, 10, 1 или 0,1 мг/кг. Иышам Контрольная группа (Физиологический раствор поваренной соли) Аналогично приведенные результаты достигаются также в случае использования вещества KS. Пример 4 (экспериментальный). По истечении 24 ч после единовременного введения внутрибрюшинно контрольной группы дают перорально только физиологический раствор поваренной соли в тех же соответственно порциях и таким же точно путем. По истечении 7 недель после введения первых порций вещества KS-2-А умерщвляют индивидуальных мышей и определяют вес удаленных опухолевых частей. Полученные при этом результаты сведены в табл. 1. Таблица 1 или.перорально мьппам по 200 мк/кг вещества KS-2-А каждой ьапли интраперитонеально вводят по 10 опухолевых асцитных клеток Эрлиха. После этого отмечают число дней, в течение которых выживают мппи. В ходе проведения 11 897099 эксперимента используют весом по 20 r и в возрасте приблизительно 6 недель, 12 Таблнца2 Число выживших животных от общего количества Свыше 56,6 4/IO 23, 27, 28, 29, 29, 30, 100, 100, 100, 100 Интраперитонеальный свыше 26, 26, 27, 27, 28, 30, 30, свыше 100 100, 100 22, 23, 24, 25, 25, 25, 25, 26, 26, 26 Свыше 49,4 3/IO Через рот 10 О/10 24,7 Контрольный 10 эксперимент ,физиологический раствор поваренной соли) Т а б л и ц а 3 нее Число Сред число дней выживания выживших жи ечение вотные вотных от общего числа Вещество KS KS-2-А в дозировке 10 мг/мл 24, 24, 25, 26, 30 25,8 О/5 26, 26. 271 28, 31 То же, в дозе 2 мг/мл 27,6 0/5 Аналогичные результаты достигаются ;с использованием вещества KS. Пример 5 (экспериментальный1). асцитные опухолевые клетки Эрлиха, 25 взятые у мыши, несколько раз промывают средой RPM1-1640, не содержащей сыворотки, в течение 5 мин при скорости вращения 1800 об/мин, после чего концентрацию клеток доводят до уф 1 х 10 клеток/мл с использованием той же самой среды. Одновременно с этим вещество KS-2-А растворяют в той же самой среде с получением растворов концентрации 10, 2 мг/мл и 400 мкг/мл и 1 мл каждого из приготовленных таким образом растворов вещества KS-2-А добавляют в 1 мл указанной суспензии клеток Эрлиха и затем подвергают культивированию в уг- «> лекислотном инкубаторе в течение 2 ч при 37 С. В процессе такого культивирования пробирку несколько раз встряхивают. После этого каждую кульПолученные результаты сведены в табл. 2. туру подвергают центрифугированию при екорости вращения 1800 o6/мин в течение 5 мин с последующей промывкой средой RPMI †16. Полученные таким образом таблетки клеточной массы сус— пендируют в 2 мл указанной среды. По 0,2 мл каждой из приготовленных таким образом суспензий интраперитонеально вводят мышам DDI в возрасте 6 недель по 5 особей в каждой группе. При этом отмечают число дней, в течение которых выживают животные. Полученные результаты сведены в табл. 3. Число дней выживания животных в индивидуальных группах оказывается практически идентичным числу дней, в течение которых выживают животные контрольной группы; это указывает на то, что вещество KS-2-А не оказывает никакого непосредственного цитотоксического действия на раковые клетки., 14 897099 Продолжение табл, 3 Среднее число дней выживания Число Число дней, в течение особей которых выжили животные мышей Число выживших Лечение животных от общего числа То Же, в дозе 400 мкг/мл 5 О/5 25, 25, 25, 30, 30 27,0 RPHl-1640 (контрольный эксперимент) 5 24, 25, 26, 28, 32 О/5 27,0 Лечений мышей, имеющих опухоЧисло Число дней, в течение особей которых животным удамышей лось выжить Среднее число дней выживания Число выжив ли ших особей от общего числа Свьппе 70,0 5/10 Макрофаг мышей,!О вылеченных веществом KS-2-А 26, 40, 43, 45, 46, свыше 100, 100, IOO, 100, 100 О/О Макрофаг мыши, 10 которую не подвергалн лечению 24, 26, 27, 28, 29 30, 31, 32, 34, 35 29,6.О/ I O Только среда 10 БАРМ!+!640 26, 26, 27, 28, 28 28, 29, 29, 30, 31 28,2 Пример 6- (экспериментальный) . Мьппам 00! (с весом тела 20 r и в возрасте 6 недель) интраперитонеально вводят по 200 мг/кг вещества KS-2-А и по.истечении 24 r средней RPN1-1640, не содержащей сыворотки, вымывают перитонеальные эксудативные клетки. Затем вымытые эксудативные клетки подвергают культивированию в углекислотном инкубаторе в течение 2 ч. После этого не обладавшие адгезионной способностью клетки направляют в отход, а обладавшие адгезионной способностью клетки дважды или трижды промывают средой ВРМ1-1640, подогретой до 37 © С. Эти клетки, которые прочно прилипают к чашке Петри, собирают с использованием трипсина и ЭДТК, в результате чего получают мак1рофаг, вьделенньш из организма мышей, вылеченных веществом KS-2-А. Одновременно с этим других мышей DD1 в возрасте 6 недель заражают асцитны.ми опухолевыми клетками Эрлиха путем интраперитонеального введения в организм каждой особи по 10 клеток. Интраперитонеально в организм этих мышей вводят упомянутый макрофаг эа 24 ч до их заражения опухолевыми клетками, а затем им вводят в общей сложности 10 раз через интервалы в 3 дня: каждьп раз от 5 х 10 до l х 10 клеток. При этом отмечают число дней, в течение которых животным удалось выжить Полученные результаты сведены в табл. 4 ° Таблица 4 15 8970 Пример 7 (экспериментальный). Трансформированный акклиматизированный клеточный материал Fif †, приготовленньп с концентрацией 1 х 1О клеток/мл с использованием среды МЕМ S Игла, в которую добавляют 107 плодной сыворотки теленка (ПСТ), загружают в 3 различных склянки для культивирования а, в,и с. В склянке а культивирование проводят без какого-либо добавления в нее макрофага. Процесс культивирования в .склянке 4 проводят в присутствии i х 10 клеток/мл неактивированного макрофага, полученного в процессе экспериментального при- 15 мера 6. Процесс культивирования в склянке с проводят в присутствии 1 х 10 клеток/мл макрофага, полученного от мыши, которую лечат веществом KS-2 — А, в соответствии с изложен- 20 ным в экспериментальном примере 6. Процесс культивирования проводят при 37 0 С в атмосфере 57. углекислого газа в течение 72 ч. По истечении 24, 48 и 72 ч с помощью камеры для подсчета кровяных телец определяют число клеток FH-ÇÀ. Макрофаг, активированный веществом KS-2-А, оказывает ингибирующее действие на рост раковых клеток. 30 Пример 8 (эксперименталь— ный}. 40 мышам РР! среднего веса 22 г интраперитонеально вводят по 200 мг/кг вещества KS-2-А (группа 1). В организм других 40 мышей DDI через рот вводят по 500 мг/кг вещества KS-2-Л (группа 2). По истечении 4, 8, 12, 16, 20, 24, 28 и 32 ч из каждой группы мышей отбирают по 5 особей и умерщвляют с 40 последующим взятием крови. Полученную таким образом кровь подвергают центрифугированию со скоростью вращения 3000 об/мин в течение 10 мин с получением сыворотки. Титр интер- 4S ферона измеряют в клетке мыши штамча 1.-10 без тимидинкиназы и везикулярного стоматичного вируса (ВСВ). Титр интерферона получают посредством определенного эффекта цитофатитной вирусной защиты (ЦВЗ), который достигается посредством разбавленной сыворотки крови. Укаэанный титр интерферо99 !6 I на откалиброван относительно международной интерфероновой единицы. Пример 9 (экспериментальный). В организм мышей DDI четырех групп (среднего веса 20 r и в возрасте примерно 6 недель) интраперитонеально вводят по 200, 100, 50 и 25 мг/кг вещества KS-2 †. По истечении 24 ч после введения этого вещества у мьппей каждой группы берут кровь для определения титра циркулирующего интерферона. Полученные результаты приведены ниже. Интраперитонеальное Титр интерферовведение вещества на/мл KS-2-А в дозировке, мг/кг 200 800 100 800 50 800 25 80 Эти образцы интерферона проявляют такие общие свойства интерферона, как чувствительность к трипсину, специфичность видов паразитов в отношении хозяина. Пример 10 (экспериментальный). Микроорганизм Listerià monoсуСопепез!s, выделенный из организма пациента, который был заражен листериозом, суспендируют в дистиллированной воде с концентрацией 10 виру8 сов/мл, после чего эту суспензию используют для заражения инъекций в хвостовую вену мышей из расчета по 0,1 мл/особь. 3а 24 ч до заражения листериозом в организм мышей интраперитонеально вводят по 0,5 мл раствора вещества KS-2-А, В различных группах мышей дозировка вещества KS-2-A составляет при этом от 5 до 425 мг/кг на каждую индивидуальную особь. B организм мышей контрольной группы интраперитонеально вводят по 0,5 мл физиологического раствора соли. После этого отмечают количество мышей, которые выживаю;- в течение 20 дней после их заражения, а затем определяют выживаемость в процентах. Полученные таким образом результаты сведены в табл. 5. 897099 18 Т аблиц а 5 тепень Число особей, использованыживаеости жи отных,X ных в опы тах 425 100 141 100 87,5 100 26,3 (контрольный эксперимент) Таблица 6 Число животных Число осо- бей, выживСтепень выживаемости ших в течение 20 дней после заживотных, Ж ражения 425 100 87,5 141 87,5 l 00 87,5 26,3. 0 (контрольный эксперимент) Доза вещества KS-2-А при интраперитонеальном введении в организм, мк/кг Пример 11 (эксперименгальный). В ходе проведения данного эксперимента осуществляют то же самое лечение, что и описанное в экспериментальном примере 10, за исключением того, что в этом случае вещество KS-2-А вводят в организм иышей через Доза вещества, KS-2-А при введе нии в организм через рот,мг/кг Число особей, которые выжили в течение 20 дней после их з аражения рот в дозировке от 5 до 425 мг/кг. При этом отмечают число особей, которые выжили в течение 20 дней после щ их заражения, и раСсчитывают выживаемость животных в процентах. Полученные таким образом результаты сведены в табл. 6 19 897099 Пример 12 (экспериментальный ). Микроорганизм Pseudcnonas aeru glnosa> Bb+pJ1eHHblH из мочи больного лейкемией, подвергают культивированию при 37 и С в течение 24 ч, после . S чего клеточную массу суспендируют в дистиллированной воде в концентрации 10 вирусов/мл с последующим заражением путем инъекции в хвостовую вену 26 мьппей DDI (самки весом по 20 г в возрасте 6 недель) в дозировке по 0,1 мл/особь. За 24 ч до инъекционного заражения в организм мышей той группы, которая предназначена для ле Таблица 7 Число дней, прожитых животными после заражения Средняя продолжительЧисло Выживаевыжив- мость жиших в вотных,7 теченость жизни, дни ние 20 дней М 2; 2; 3; 3; свьяпе 14, Свыше свыше 14; 14; 14; 14; 10,7 свьппе 14; 14; 14; 14, 14 150 10 71 1; 1; 1; 1; 2; 2; 3; 2,3 0 3; 4; (контрольный эксперимент) Пример 13 (экспериментальный). Непосредственное антибактериальное действие вещества KS-2-А исслсдуют дисковым пульпо-диффузионным методом с использованием различных бактерий и водного раствора вещества KS-2-А концентрацией 1000 мкг/мл. Как Видно из данных таблицы, вещество KS-2-А не проявляет непосредственной антибактериальной активности. Ниже приведены значения минимальной ингибирующей концентрации (1П!К ) использованных микроорганизмов. Pseudomonas aeruginosa мкг/мл С вьппе 000 К1ebs i l l а pneumoni ае, мкг/мл Listeria monocytogeпеЗ, мкг/мл Еscherichià col i, мкг/мп Staphylococcus aureus 209-Р, мкг/мл Свыше 1000 Candida albicans, мкг/мп То же Доза вещества Число KS-2-А, мг/кг особей чения, интраперитонеально вводят по 0,5 мл водного раствора, содержащего 150 мг/кrt вещества KS-2-А, тогда как в организм животных контрольной груп-. пы вводят только по 0,5 мг физиологи" ческого раствора поваренной соли (интраперитонеально) . Отмечают число животных, которые выжили в течение 20 дней после их заражения, и затем определяют степень выживаемости,в процентах ° Полученные результаты сведень! в табл. 7 ° Candida tropicalis, мкг/мл Candida pseudotropicalis, мкг/мл Candida uti11s, мкг/мл Sacch ггomyces cerevisial Br-60, мкг/мл Hansenula anomaliа, мкг/мл Proteus ОХ-!9, мкг/мл Вас!1lus subtilis, мкг/мл Shigella зоппе1, мкг/мл Sarcina lutea, мкг/мл П р и и е р 14 (экспериментальный) ° В ходе проведения эксперимента мышей DDI весом 14- 16 г заражают введением в их организм intranadellу вирусов гриппа и лечат внутривенным или пероральным введением вещества KS-2-А в дозировке 200 мг/кг. В ходе проведения контрольного эксперимента в организм контрольных животных 21 897099 22 интраперитонеально вводят по 50 мг/кг 1 ч до заражения мьппей вирусом, одновиразола или 0,5 мл физиологического временно с их заражением вирусом по раствора поваренной соли. Далее on- истечении 1, .3 и 6 ч после их заражеределяют число дней, прожитых живот- ния и затем дважды в день в течение ньяи и степень их выживаемости в про- З последующих 4 дней. В качестве вируцентах. Как вещество KS-2-А, так и са гриппа используют адаптированный виразол вводят в организм в виде со- к мышам вирус гриппа штамма А /Кумаответствующих растворов в физиологи- мото/У /Н / в 10 дозах LD У. 5O ческом растворе поваренной соли в об- Полученные при этом результаты щей сложности 15 раз, а именно за >6 представлены в табл. 8. Таблица 8 Лекарственное Способ введения Число Средняя продол- Выживаесредство в организм особей жительность, дни мость мышей, 7 Интраперито- 25 Свыше 2Q неально Вещество KS-2-А, 200 мг/кг То же 25 Свыше 19 20 Свьппе 16,9 Перорально Интраперитонеально Виразол, 50 мг/кг Контрольный опыт 50 9,2 50 9,2 Интраперитонеально Полученные таким образом результа— ты сведены в табл. 9. .Предложенный способ позволяет получить вещество, обладающее противоопухолевым и антимикробным действием. Пример 15 (экспериментальный). В ходе проведения данного эксперимента исследуют токсичность вещества К 2 -2-А. Таблиц а9 Пероральный спосо введения, мг/кг Интраперитонеаль ный способ введе ния, мг/кг Подо пыт но животное нутриенное ведение организм, r/êã 875 Свьппе 12500 Свыше 2000 Мьппь, LD 2083 Крыса,LD Морская свинка,LD Свьппе 600 Свыше 2000 с я тем, что штамм Daedalea dickin" з11 KSDD 6 (FERti-P N 3993), Lentinus edodos KSLE 7 (FERH"P N 3994) или Lentinus edodes KSLE 28 (ГЕКИ-Р Формула и зобретения Способ получения вещества, обладающего противоопухолевым и антимикробиым действием, о т л и ч а ю щ и й— 897099 24. Составитель С. Малютина Редыстор М. Дыпын Техред T.Ìàòo÷êà . Корректор N. 111ароши Заказ 11741/4б Тираж 716 Подписное . ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035 Москва, Ж-35 Рабская наб.д д. 4/5 Филиал ППП "Патент",. r. Ужгород, ул. Проектная, 4 и 4196) культивируют в питательной среде, содерпкащей источники углерода, азота и минеральные соли, в азробных условиях при 25 С и экстрагируют целевой продукт из биомассы горячей водой или 5Х-ным водным растворби хлористого натрия при 80-100 С при перемешивании.              [стр. 1 ⇒]