Справочник врача 21

Поиск по медицинской литературе


Рга




ЛеЪение При гшпнкшии ЯЧОв еобхоДпм сиЬ ПгешСсЬ кЛени иЬ гш ЗаТь еецеЬй атгивь ци и ПЭиеиЬ с уШи фп о Як срс Ги ше ииГеа кции ГаГД бьвт ЕО дГ ЛЧи в ослаи кО ДнкГ ссаа ПЬх рГа ТЬ саПк ПЯиЛи ЛцеУ саи взбкДея Лг ПрцокитеЛЬсЬ сеанс ассака ци ассак ЛЬ рГа сЛБа иквобрцеис ЧяЯесЯ вЕЬ ег еЕи стбке р рьО молчн кеЛеЗЬ Ьскпу иЬ к ЯЧк асси Леги раЗи и аД ПЦЬе аЕПГЛаиние среи Зад... [стр. 257 ⇒]

Двадцать третья Объединенная Российская гастроэнтерологическая неделя Уважаемые коллеги! Российская гастроэнтерологическая ассоциация (РГА) приглашает Вас принять участие в работе очередного съезда врачей-гастроэнтерологов страны – Двадцать третьей Объединенной Российской гастроэнтерологической недели. Гастронеделя состоится в Москве с 9 по 11 октября 2017 года в Российской академии народного хозяйства и государственной службы при Президенте РФ по адресу: проспект Вернадского, д. 84 (ст. метро «Юго-Западная»). Программа Недели включает в себя обсуждение широкого круга теоретических и практических проблем современной гастроэнтерологии, эндоскопии, гепатологии, педиатрии, нутрициологии и других смежных с гастроэнтерологией дисциплин. Большинство приглашенных докладчиков – признанные отечественные и зарубежные лидеры мнения. В рамках Объединенной Российской гастроэнтерологической недели в нескольких залах будут проходить научные симпозиумы. Как и на предыдущих Неделях будет продолжено обсуждение стандартов и порядков оказания специализированной медицинской помощи и клинических рекомендаций по специальности «Гастроэнтерология»; лучшие специалисты проведут клинические симпозиумы Российской гастроэнтерологической ассоциации и выступят с лекциями мастер-класса. Планируется представление коллективов и школ, в течение многих лет развивающих отечественную медицину. В период проведения Гастронедели будет работать выставка современных лекарственных препаратов, медицинской техники и технологий, применяемых в гастроэнтерологии и лечебном питании, и специализированных изданий. Перед Неделей с 6 по 8 октября 2017 года будет проведена 104 Осенняя сессия Национальной школы гастроэнтерологии, гепатологии РГА. Вход на научные заседания Гастронедели свободный. Почтовый адрес для переписки и справок: 119146, Москва, а/я 31, «ГАСТРО». Телефоны для справок: +7 926 213-25-52. Электронная почта: fin.fin@ru.net , rga-org@yandex.ru. Адреса в интернете: www.gastro.ru , www.liver.ru. [стр. 78 ⇒]

Присутствие вируса в исследуемом материале определяют с помощью методов индикации и идентификации. Индикация вирусов, т.е. неспецифическое обнаружение факта инфицирования, основано на выявлении биологических свойств вирусов и особенностей их взаимодействия с чувствительными клетками. Идентификация означает установление вида или типа вируса. Она осуществляется в основном с помощью иммунных реакций или молекулярногенетических методов (ПЦР и др.). Вирусы можно культивировать в организме восприимчивых к ним лабораторных животных (белые мыши, хомячки, кролики, обезьяны и др.), которых заражают вируссодержащим материалом различными способами в зависимости от тропизма вирусов (подкожно, внутримышечно, интраназально, интрацеребрально и т.д.). Наличие вирусов выявляют по развитию у животных клинических проявлений заболевания, патоморфологическим изменениям органов и тканей, а также на основании реакции гемагглютинации (РГА) с вируссодержащим материалом. РГА основана на способности многих вирусов склеивать (агглютинировать) эритроциты своими гл и ко протеиновыми шипами (гемагглютининами). Другой моделью культивирования вирусов являются куриные эмбрионы (5—12-дневные), которых заражают исследуемым материалом в различные полости и ткани зародыша. Таким образом можно культивировать вирусы гриппа, герпеса, натуральной оспы и др. Свидетельством репродукции вирусов в куриных эмбрионах являются специфические поражения оболочек и тела эмбриона (оспины, кровоизлияния), гибель эмбриона, положительная РГА с вируссодержащей жидкостью, полученной из полостей зараженного зародыша. Часто вирусы культивируют на культуре клеток. Метод культур клеток был впервые разработан в 1949 г. Дж. Эндерсом и соавт., получившими за разработку техники культивирования вируса полиомиелита Нобелевскую премию в 1954 г. Изолированные клетки, полученные из различных органов и тканей человека, животных, птиц и других биологических объектов, размножают на искусственных питательных средах в специальной лабораторной посуде. Широко распространены культуры клеток из эмбриональных и опухолевых (злокачественно перерожденных) тканей, обладающих по сравнению с нормальными клетками взрослого организма более активной способностью к росту и размножению. [стр. 113 ⇒]

4. Культивирование вирусов Культивирование вирусов человека и животных проводят с целью лабораторной диагностики вирусных инфекций, для изучения патогенеза и иммунитета при вирусных инфекциях, а также для получения диагностических и вакцинных препаратов. Вирусы культивируют на трех биологических моделях: в организме лабораторных животных, в развивающихся эмбрионах птиц (чаще на куриных эмбрионах) и культурах клеток (тканей). Выращенные вирусы определяют с помощью методов индикации и идентификации. Индикация вирусов, т.е. обнаружение факта их репродукции, основана на выявлении различных биологических свойств вирусов и особенностей их взаимодействия с чувствительными клетками. Идентификация (определение вида, типа) вирусов осуществляется, в основном, с помощью иммунологических реакций, основанных на взаимодействии антигенов вирусов и соответствующих им антител (см. «Реакции иммунитета»). Лабораторных животных (взрослых или новорожденных белых мышей, хомяков, кроликов, обезьян и др.) заражают исследуемым вируссодержащим материалом различными способами (подкожно, внутримышечно, интраназапьно, интрацеребрально и т.д.) в зависимости от тропизма вирусов Использование животных для культивирования вирусов в диагностических целях весьма ограничено из-за видовой невосприимчивости животных ко многим вирусам человека, контаминации животных посторонними микробами, а также по экономическим и этическим соображениям. О репродукции вирусов в организме животных судят по развитию у них видимых клинических проявлений заболевания, патоморфологическим изменениям органов и тканей, а также на основании реакции гемагглютинации (РГА) с суспензией из органов, содержащих вирусы. РГА основана на способности многих вирусов вызывать склеивание (агглютинацию) эритроцитов человека, птиц и млекопитающих в результате взаимодействия вирусных белков (гемагглютининов) с рецепторами эритроцитов. Куриные эмбоионы (5— 12-дневньте) заражают путем введения исследуемого матери... [стр. 73 ⇒]

ЧАСТЬ I. Общая микробиология 3.4. Культивирование вирусов Культивирование вирусов человека и животных проводят с целью лабораторной диагностики вирусных инфекций, для изучения патогенеза и иммунитета при вирусных инф екциях, а также для получения диагностических и вакцинных препаратов. Вирусы культивируют на трех биологических моделях: в организме лабораторных животных, в развивающихся эмбрионах птиц (чаще на куриных эмбрионах) и культурах клеток (тканей). Выращенные вирусы определяют с помощью методов индикации и идентификации. Индикация вирусов, т. е. обнаружение факта их репродукции, основана на выявлении различных биологических свойств вирусов и особенностей их взаимодействия с чувствительными клетками. Идентификация (определение вида, типа) вирусов осуществляется, в основном, с помощью иммунологических реакций, основанных на взаимодействии антигенов вирусов и соответствующих им антител (см. «Реакции иммунитета»). Лабораторны х ж ивотных (взрослых или новорож денны х белых м ы ш ей, хом яков, кроликов, обезьян и др.) заражают исследуемым вируссодержащим материалом различны ми способами (подкожно, внутримыщ ечно, интраназально, интрацеребрально и т. д.) в зависимости от тропизма вирусов. И спользование животных для культивирования вирусов в диагностических целях весьма ограничено из-за видовой невосприим чивости животных ко многим вирусам человека, контаминации животных посторонними микробами, а также по эконом ическим и этическим соображениям. О репродукции вирусов в организме животных судят по развитию у них видимых клинических проявлений заболевания, патоморфологическим изменениям органов и тканей, а также на основании реакции гемагглютинации (РГА) с суспензией из органов, содержащих вирусы. РГА основана на способности м ногих вирусов вызывать склеивание (агглютинацию) эритроцитов человека, птиц и млекопитающих в результате взаимодействия вирусных белков (гемагглютининов) с рецепторами эритроцитов. Куриные эмбрионы (5-12-дневны е) заражают путем введения исследуемого матери... [стр. 75 ⇒]

Разные родственные микроорганизмы могут агглютинироваться одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, что затрудняет их идентификацию. Поэтому используются адсорбированные агглютинирующие сыворотки, из которых удалены перекрестно реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыворотках сохраняются антитела, специфичные только к данному виду микроорганизма. Реакция гемагглютинации (РГА) Различают прямую и непрямую РГА. При прямой гемагглютинации происходит подавление вирусов антителами иммунной сыворотки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты. Эту реакцию широко используют для диагностики некоторых вирусных инфекций, например гриппа. При реакции непрямой гемагглютинации (РИГА) происходит склеивание эритроцитов при адсорбции на них определенных антигенов. При этом эритроциты оседают на дно пробирки в виде фестончатого осадка. РИГА применяют для диагностики различных инфекционных заболеваний, для выявления чувствительности к лекарственным препаратам и гормонам. Для определения групп крови применяется реакция агглютинации эритроцитов, при этом используются антитела к группам крови А(Н), В(Ш). Контролем служит сыворотка, не содержащая антител, т. е. AB(IV) группы крови, антигены, содержащиеся в эритроцитах групп А(Н), B(III). О-отрицательный контроль не содержит антигенов, т. е. используют эритроциты группы 0(1). Реакция преципитации Эта реакция основана на выпадении в осадок комплекса растворимого антигена со специфическими антителами. Этот 120... [стр. 126 ⇒]

Нагруженные антигеном частицы (эритроциты ) склеиваются при добавлении сывороток, содержащих антитела. Эритроциты можно нагружать не только антигенами, но и антителами. В таком случае диагностикумы можно использовать для обнаружения антигенов в биологических жидкостях. Реакция нейт рализации ( PH) п редлож ен а Г. Р ам он ом в 1929 г. как реакция ф локуляции. В ее основе лежит способность антител (антитоксинов) специфически подавлять (нейтрализовать) биологическую активность антигена (токсина). PH , как правило, в основном применяют для определения вида или типа токсигенных микроорганизмов, таких как возбудители ботулизма, злокачественного отека и др. Техника постановки реакции несложная. Патологический материал или микробную культуру вначале проверяют на наличие токсина путем заражения лабораторных животных, затем в пробирке соединяют с антитоксической сывороткой (стандартный диагностикум) определенного вида или типа, смесь оставляю т на 30 м инут при 37 °С для контакта антигена и антител. Д ля установления результата реакции смесью заражают лабораторных животных. Помутнение жидкости в пробирках не является достаточным основанием для оценки реакции. Показатель положительной P H — отсутствие гибели животных (в смеси произош ла нейтрализация антигена токсина антителами антитоксической сы воротки). В противном случае реакция будет отрицательной. С помощью PH можно выявлять и специфические антитела в сыворотках крови животных при использованиистандартного антигена. Реакция гемагглютинации (РГА) открыта Г. Херстом, М. МакКлилендом и Л. Хейером в 1941 г. Гемагглютинации — способность эритроцитов агглютинироваться (склеиваться и выпадать в осадок) при воздействии микробного антигена гемагглютинина. РГА применяют для установления гемагглютинирующих свойств микроорганизмов. Техника постановки реакции чрезвычайно проста. М икробную культуру в пробирках соединяют со взвесью эритроцитов из крови кур или млекопитающ их и оставляю т на 30—60 минут при комнатной температуре, затем производят учет реакции. Показатель положительной РГА — просветление жидкости и образование на дне пробирки осадка из эритроцитов в виде зонтика. При отрицательной РГА эритроциты не агглютинируются, жидкость в пробирках остается мутно-розового цвета; с течением времени эритроциты оседают, образуя компактный осадок в центре дна пробирок. [стр. 101 ⇒]

Клинические рекомендации Тактика (алгоритм) ведения пациентов, страдающих абдоминальной болью Российская гастроэнтерологическая ассоциация (РГА) и  Национальная школа гастроэнтерологов, гепатологов в  2005 г. в  помощь практикующему врачу разработали и популяризировали ступенчатый алгоритм выбора препаратов для купирования хронической боли в  животе в  зависимости от ее интенсивности и ведущего механизма развития [11]. Сложность рассматриваемой проблемы, необходимость исключения ошибок дифференциального диагноза, ответственность за лечебную тактику, разработка клинических рекомендаций РГА для большого числа гастроэнтерологических заболеваний (www.gastro.ru) обеспечили актуальность и своевременность создания подробного алгоритма диагностики и  лечения абдоминальной боли (cм. рисунок). Первый этап алгоритма заключается в  общеклиническом обследовании больного. Применение метода опроса даст возможность определить в том числе длительность боли, что имеет важнейшее значение для выбора тактики ведения пациента. Так, наличие абдоминальной боли продолжительностью менее 6 месяцев позволяет отнести ее к  разряду «острой» или «подострой» и  требует детального обследования больного с  привлечением при необходимости хирурга, уролога, гинеколога и  других специалистов. В  неотложном обследовании нуждаются лица, страдающие париетальной болью. В  этом случае боль носит локальный характер, сопровождается локальным или диффузным напряжением мышц брюшной стенки, усиливается при любом сотрясении тела (подпрыгивании, кашле, резком изменении положения тела). Источник ее возникновения  — брюшина, что собственно следует и  из названия данного типа боли. Подозрение на иррадиирущий характер боли также должно сопровождаться тщательным обследованием. Психогенная боль является, по сути, всегда диагнозом исключения и при подозрении на ее наличие также требуется подробное обследование больного. В случае выявления у  пациента висцеральной боли следующим этапом служит анализ полученных при физикальном обследовании данных. Он включает общеклинические исследования крови, мочи, биохимический анализ с  оценкой таких показателей, как билирубин, аминотрансферазы (аланиновая и аспарагиновая), щелочная фосфатаза, гамма-глутамилтранспептидаза, С-реактивный протеин, креатинин, мочевина, липаза, амилаза крови и мочи. Необходимо также исследовать кал на яйца глистов методом обогащения, провести рентгенологическое исследование грудной клетки, оценить результаты электрокардиографии, у  женщин провести гинекологическое обследование. Необходимым на этапе скрининга является... [стр. 5 ⇒]

Почезерье. Што́бы зе́рнышко-то в ля́гу (поговорка). Труфаногоры. Ко́дерьга  — ру́цей весной, а ле́том только ля́га така́ суха́. Ф Ку́шкопалы на Е́домы на горы́. Церкова Гора.  5.  Овраг. Бежу́ на уго́р-то, с уго́ра видно, где в ля́гах, му́ргах таких скот лежит. Валдокурье. За до́мом, через наволо́к ля́га больша́, ля́га что и му́рга, одно и тоже. + В му́ргах мы на грё́мушке сиди́м, а там ля́га, круго́м их гром. Вонга. Му́рга, ля́га больша́ была́, падуно́к вы́пал, земля́ провали́лась. Кулой. 6.  Дырка, лунка. Со фсем ко́рнем вы́пал зуп, так и ляга оста́лась. Березник. У ей зу́ба-то в ро́те нет, ля́га одна́, ко́рень то́лько. Подрадье. 7. Ля́гой, в знач. нареч. О форме лодки с покатыми бортами. А середи́на у ей [лодки] ля́гой. Церкова Гора. ЛЯЖБИ́НА, ж. Лужа, рытвина с водой. Ляга, лужа така́, ляжби́на, где вода́-то стои́т. Ёркино. ЛЯ́ЖКА, ж. 1. То же, что ляга (во 2-м знач.). А ля́га то́же ни́ско ме́сто, то́лько ме́ньше, ма́ленька ля́шка. Кеврола. 2. Ля́шки, мн. Ямки, выбоины на дороге. Уго́ры да ля́шки трясё́т больно. Усть-Ежуга. МА́КА, ж. Крёстная мать. Ма́ка  — это у нас хрё́стну мать так зову́т. + Ма́кой звали крё́сную потому́ как с де́тству привы́кли так звать. Леуново. МА́ЛИЦА, ж. Верхняя одежда из овчины мехом внутрь, надеваемая че... [стр. 150 ⇒]

Веркола. Мату́рник, ис корне́й-то мату́рили. Мо́ты кра́сили. Пе́стряди тка́ли, бу́рой цвет полуця́лся. Земцово. С этого мото́вила наснимам мо́ты. Кеврола. Про́стень мота́м на мотови́ло, намота́ш мот, про́сней два́цать смота́ш. + А пото́м со снова́льни сни́меш, уш э́та пря́жа моты́ называ́ецца. Козлово. Моты́ вы́белят на снегу́, дак нити белы становяця. Моты  — это пря́ди. Напря́дено изо льна. С мотови́ла сни́мут его́. Леуново. Два мо́та напря́ла, носки́ сы́ну свяжу́. Нюхча. 2.  Клубок ниток, пряжи. Смота́й в мот ни́тки-то, я вну́цку носки́ свяжу́. Нюхча. Ниток напрядём, смотам в мот. Сульца. Вот ни́тки-то намота́м и на мот. Шиднема. МУ́РГА, ж. 1.  Большая яма с водой. Му́рга фсегда́ с водо́й, бес воды́  — яма. + В му́ргах во́ду берё́м. Му́рга и ля́га  — это одно́ и то же. Вонга. Му́рга — така́ я́ма, в ней вода́, больша́, не высыха́ фсё ле́то. В ей ры́пка ростё́, линьки́. + Мо́чим мы лён, в мургу и опуска́ем, это яма, ф которой дё́ржыца во́ды, яма никогда не высыха́ет. Кеврола. Му́рга — э́то я́ма така́, с водо́й, и́ли вода́ высыха́т, му́рги фсе опкоси́ли. Ля́га и му́рга одина́ково. Козлово. У нас му́рги есь, я́мы, вода́ в йих, никогда́ не высыха́. Шардонемь. 2. Водоём, оставшийся после половодья на заливном лугу. Му́рги  — таки озё́ра, озё́ра на лугу́. Не одно́ о́зеро му́рги, одно́ так му́рга. В му́ргах кув... [стр. 154 ⇒]

Шотово. 3.  Овраг. В му́ргах мы на грё́мушке сиди́м, а там ля́га, круго́м их гром. + В  му́ргах мно́го быва́т костя́нки. + Му́рги, я́мы ря́дом с водо́й, а вре́менно вы́падёт, ино́й рас по́лные. Хоть воды́ нет, фсё равно́ му́рга. Окру́жнось глубо́кая. + Му́рга, ф той му́рги траву́ коси́ла. Вонга. Му́рга, ля́­га больша́ была́, падуно́к вы́пал, земля́ провали́лась была́. Кулой. У му́рги, му́рга — э́то така́я я́ма, вы́мытая водо́й. Летопала. 4.  Низкое место, впадина, яма. Ма́ма, ты говори́ла уе́хали они́, а они́ иду́т по му́рге. Айнова Гора. Лес-то у нас ра́не хоро́ший был, без му́рги, ро́вно ме́сто было. Валдокурье. Му́рги здесь нет, е́кого ме́ста, у нас фсё бо́льше песо́к, му́рга  — я́ма глубо́ка. Веркола. У нас их [ямы] му́ргами вообще́ и называ́ют. Вонга. В му́рге дом-то его́, му́рга так э́то я́ма и есть. Кеврола. У нас и я́мы есть, и́х му́ргами зову́т. Ра́зно зовё́м. + Поди́те му́сор в му́ргу вы́киньте, там я́мка така́ возля́ кла́дбишша есть. Кузомень. Му́рга  — ни́ско ме́сто. Церкова Гора. Му́рги — я́мы в лесу́. Чакола. 5. Глубокое место в реке. В Пи́неге-то му́рги иногда́ больши́е быва́ют, мо́жно в йих утону́ть. Валдокурье. МЯ́НЮШКИ, мн. Ягнята. Мя́нюшки, а в колхо́зе ягня́та. Сульца. МЯ́ЧИЩЕ, ср. Молодежное игрище, гулянка. ▭  Меци́ще. З башмаками шля́нцаты цулки́ обу́ём, на меци́шше ходи́ли. Кеврола. НАБАСКО́, нареч. На показ, на смотрины (о невесте). Неве́сту наре́дя и... [стр. 154 ⇒]

РУ́СТИК, м. Доска для обшивки стен дома. Дома́ для красоты́ и хране́ния мы ру́стиком обшыва́м. Ру́стик — э́то обшы́вочная доска́. Валдокурье. Дома́-то для ви́да мы ру́стиком обшыва́м. Чучепога. РУСТО́ЙКА, ж. Сорт леса низшего качества. Русто́йка, таки́ то́неньки брёвна, худо́й сорт. Юрола. РЮ́ЖА, ж. Ставная рыболовная снасть — мережа. Схо́диш ры́пки доста́неш загру́зиш хот вё́ршей хоть рюжей. + Така́ же бу́де рю́жа, а там мерё́шкой зовут. Веркола. Ешшо́ рю́жами ло́вят. Кеврола. Рю́жа  — э́то така́ кру́гла на обруца́х. Мере́жей бо́льше зову́т. Летопала. Рю́жа-то сеть така́, ры́бу ловить. + Рю́жа-то  — сеть, обтя́нута на желе́зных обруча́х (рисунок 1). Нюхча. Рюжа сеть така, тоже рыбу ловить. Шиднема. САМОЕ́ДЫ, мн. Ненцы. Чума́. Самоя́дами зва́ли носи́ли. Топе́рь ненци. Вихтово. Де́вка с ва́ми была́, дак она́ как самое́дка, нос как бу́лка, лицо́ шыро́ко. Самое́ды-то не́нцы и́ли немцы, нацыя така́. Кузомень. При царе́-то мно́го на́ций бы́ло тут, и зыря́ны, и эсто́нцы, и не́нцы  — по-на́шему самое́ды. Чучепога. ▭  Самоя́ды. На козу́ле, пря́ник тако́й, оле́шку нарису́ют или самое́тку. Самоя́ды в тундре ро́с­тят оле́неф. Не́нцы называ́ют их сейча́с. Леуново. СА́РГА, ж. 1. Тонкая дранка, прутья, используемые для вязки, плетения корзин, рыболовных снарядов. Са́рга де́лаецца из церё́муховой ви́цы. Айнова Гора. Вё́ршой ры́бу ло́вят. [стр. 168 ⇒]

СВАЛ — СВОЕДЕЛЬЩИНА  Вьют еи ис са́рги, ис са́рок (рисунок 1). Богатка. Вё́рша она́ ис са́рог, ры́бу ло́вим вё́ршами, таки́ кру́глы как корзи́ны. + Ис са́рги вё́ршы плету́т да решо́та. То́нка така́ ви́чка из ё́лки стро́жут. Валдокурье. Вся́кие корзи́нки сам де́лаю из са́рги. + Вё́рша сплетё́на с са́рок. Вонга. Са́ргу-то, шыть-то кото́рой, де́лаю са́рга называ́еця, ращепля́ть на са́ргу-то (рисунок  2). Кобелево. Са́рги, лучи́ны таки́е ис сосны́ отде́лываются, а из них полоту́хи, корзи́ны да пехтеря́ плету́т. Кузомень. Са́рга черё́мхова. Полоту́ха из бере́ста, опшы́та черё́мховой са́ргой, ви́цёй. Кучкас. Берё́м сосно́во бревно́ и стрё́жым из него́ са́рги  — таки́ то́нки пруто́цки, из них вё́ршы де́лам, а сплета́м корня́ми и́ли ви́цей. Чучепога. Са́рги наре́жем с сосны́ и де́лаем корзи́ны. + Са́рги из де́рева дерём, из сосны́. Пряму́ сосну́ нако́лют и деру́т. Слои отделяют. Юрола. ▭  Саро́га. Са́роги ис со́сны де́лают, э́то сосна́ на са́рги идё́т то́лько. Козлово. Ве́рши — э́то ис саро́к сплетё́ны. Саро́га  — это ис де́рева плетё́м, ис коре́нь­еф. Летопала. ▲  Тонкий прут, используемый для укрепления косы на косовище. Коса́, косьё́, пя́тка, носо́к, са́ргой привьёш. Жабей. Ру́цька-то косы́, кото́ро в руках дёржат, обви́ть са́ргой. Труфаногоры. 2. Плоская, узкая палочка для сдирания бересты. Па́лоцька така́ ис сухо́ва де́рева, берё́сту е́ю здира́м. Веркола. 3. Мн. Решето из дранки, прутьев ивы. Тако́ решо́то есь  — так там... [стр. 169 ⇒]

Роль сов ме ст ной т рудов ой де ят е льност и и языка в происхож де нии ч е лов е ч е ского сознания. О снов ные направ ле ния филоге не т ич е ского разв ит ия сознания. Пробле ма налич ия сознания у ж ив от ных. В озникнов е ние и разв ит ие сознания ч е лов е ка в онт оге не зе . С амосознание лич ност и какв ысший уров е нь разв ит иясознанияч е лов е ка. Э т апы разв ит ия самосознания. Понят ие Я -конце пции. С амооце нка лич ност и и е е функции. В иды самооце нок. В озникнов е ние и формиров ание самооце нки в онт оге не зе . С амоот ноше ние . О браз-Я . У ров е нь прит язаний. С в язь уров ня прит язаний с самооце нкой лич ност и. Разв ит ие самосознания и особе нност и самооце нки в ст уде нч е ском в озраст е . С т руктура психики. С оот ноше ние и в заимосв язь сознания и бе ссознат е льного. О бщ ая характе рист ика бе ссознат е льного. О снов ные направ ле ния изуч е ния бе ссознат е льного в зарубе ж ной и от е ч е ст в е нной психологии (психоанализ, когнит ив наяпсихология, грузинскаяшкола изуч е ния бе ссознат е льного). О собе нност и не осознав ае мых психич е ских проце ссов . Изме не нные сост ояния сознания (сон, гипноз, ме дит ация, алкогольное и наркот ич е ское опьяне ние и др.). Т е ма 4. Д ИНА М ИК А ИНТ Е Л Л Е К Т У А Л Ь НО ГО РА ЗВ ИТ ИЯ С Т У Д Е НТ О В В ПЕ РИО Д О БУ Ч Е НИЯ В В У ЗЕ Понят ие « инт е лле кт», е го соот ноше ние с понят иями « умст в е нное разв ит ие » и « обуч ае мост ь». Д инамика разв ит ия инт е лле ктуальных характе рист ик ст уде нт ов в проце ссе их обуч е ния в в узе . В лияние пола на инт е лле ктуальное разв ит ие ст уде нт ов . В озраст ные аспе кты инт е лле ктуального разв ит ияст уде нт ов . О бщ е е инт е лле ктуальное разв ит ие и спе циальные способност и к профе ссиям, приобре т ае мым в в узе . Пробле ма св язи уров ня инт е лле ктуального разв ит ия ст уде нт а и е го акаде мич е ской успе в ае мост и. Т е ма 5. ПС ИХ О Л О ГИЧ Е С К ИЕ О С НО В Ы О РГА НИЗА Ц ИИ И С А М О О РГА НИЗА Ц ИИ У Ч Е БНО Й Д Е Я Т Е Л Ь НО С Т И С Т У Д Е НТ О В Понят ие де ят е льност и в психологии, е го общ ая характе рист ика. С оот ноше ние понят ий « актив ност ь», « пов е де ние », « де ят е льност ь». Пре дме т ност ь – глав ный ат рибут де ят е льност и. С оциальная, общ е ст в е нноист орич е ская природа ч е лов е ч е ской де ят е льност и. О сознанный и опосре дов анный характе р де ят е льност и. Психологич е ская ст руктура де ят е льност и: уров е нь особе нной де ят е льност и – уров е нь де йст в ия – уров е нь опе рации (А .Н. Л е онт ье в ,... [стр. 8 ⇒]

Быстрая и Идентифика ускоренная ция вирусов диагностика Грипп Ортомиксовирусы ИФ, ИФА, РИА, 1. Куриные эмбрионы 1. РГА, РТГА, РН обнаружение 2. Клеточные культуры 2.РГадс, РТГадс, антител класса РГА, РТГА, ИФ, IgM РН, РСК РГадс, РТГадс, Клеточные культуры ОРЗ Вирусы парагриппа ИФ, ИФА, обнаружение РГА, РТГА, РН, антител класса ИФ IgM Респираторносинцитиальный ИФ, ИФА ИФ, РН, РСК Клеточные культуры Аденовирусы ЭМ, ИФ, ИФА, Клеточные культуры РТГА, РСК, РН МГ Реовирусы Нет 1.РН, РТГА, ИФ Клеточные культуры Новорожденные мыши 2. РН, РСК Нет Клеточные культуры 1.РН, РТГА ЭнтеровирусПикорнавирусы Новорожденные мыши 2. РН, РСК ные инфекции (энтеровирусы типов 1-71) Нет методов, доступных для практической Гастроэнтериты Ротавирусы, вирус ИЭФ, ИФА, РИА, МГ лаборатории Норфолка, калицивирусы, астровирусы, коронавирусы,... [стр. 207 ⇒]

ИЭМ, ИФА, Нет методов, доступных для практической РИА, лаборатории обнаружение антител IgM ВИЭФ, РОПГА, Нет методов, доступных для практической ИФА, РИА лаборатории ИФА, РОПГА Клеточные культуры РГА, РТГА, РПГА, ИФ Новорожденные мыши РСК, РН РОПГА, ИФА Клеточные культуры РГА, ИФ, РН, РСК Новорожденные мыши РН ЭМ, ИФ, РИА Куриные эмбрионы Бляшки на ХАО Клеточные культуры Включения, ИФ, РГадс, РТГадс ИФ, ИФА, ИЭМ, 1. Куриные эмбрионы 1. Изменения ХАО, РН цитология, МГ (для некоторых штаммов) 2. РН, ИФ, ИФА 2. Клеточные культуры 3. РН 3. Мыши Цитология Мыши РН (тельца Бабеша Негри), ИФ... [стр. 208 ⇒]

В Л И Я Н И Е Б А Н И НА Р А ЗЛ И Ч Н Ы Е О РГА Н Ы Г С И С ТЕ М Ы Ч Е Л О В Е Ч Е С К О Г О О РГА НИЗМА 1 1. Сердечно-сосудистая система. Пребывание здоровых или больных людей в парной приводит к существенным сдвигам деятельности сердечно-сосудистой системы Частота сердечных сокращений повышается и достигает 100-160 ударов в минуту, то есть повышается на 60-70% по сравнению с показателями до посещения баня В бане усиливается периферическая циркуляция крови вследствие снижения периферического сопротивления и открытия артериовенозных шу нтов в сосудах кожи. В связи с изменениями температуры кожных покровов и внутренних органов при нахождении в парной изменяется циркуляция крови во всех системах и органах тела. Сердечный выброс повышается в 1,5-1.7 раза. При этом время кровотока уменьшается почти в 2 раза В парильне... [стр. 85 ⇒]

Положительный диагноз на ВГБК ставят на основании результатов исследования патологического материала в двух реакциях: РГА и РДСК, или РГА и ИФА. Обнаружение специфического антигена в одной из указанных пар реакций является достоверным доказательством для постановки диагноза на ВГБК. При положительном результате исследования сывороток крови кроликов можно поставить ретроспективный диагноз о том, что на данной ферме имела место вспышка ВГБК среди кроликов. Окончательный диагноз в лаборатории может быть поставлен (при наличии диагностических наборов, инструментария, посуды, квалифицированного персонала) в течение 2-3 часов. Дифференциальный диагноз. ВГБК необходимо дифференцировать от пастереллеза, сальмонеллеза, колибактериоза, миксоматоза, эймериоза, отравления, солнечного и теплового ударов, «синдрома коричневой печени европейских зайцев». Пастереллез - бактериальная инфекция, протекающая в виде эпизоотии или небольших вспышек. Течение болезни сверхострое, острое, подострое и хроническое. Болеют кролики с 40-дневного возраста в любое время года. Клинические признаки: повышение температуры тела до 41-42°С, затрудненное дыхание, насморк, чихание, позднее понос. Патоморфологические изменения: многочисленные точечные кровоизлияния на всех серозных и слизистых оболочках, а также полосчатые геморрагии между кольцами трахеи. В печени имеются некротические очажки. Отмечается пневмония с выпотом серозного и геморрагического экссудата в грудную полость. Лечебное действие оказывают гипериммунная противопастереллезная сыворотка и антибиотики. Сальмонеллез - бактериальная инфекция, протекаю361... [стр. 361 ⇒]

4.2.19 Сидя жертвует посвятительную молитву. Ведь посвятительная молитва — это и в самом деле здешняя (земля). Поэтому никто не жертвует посвятительную молитву стоя. Ведь посвятительная молитва и в самом деле здешняя (земля). Вот и жертвует он (посвятительную молитву), сделавшись теперь здешней именно (землей). Поэтому и жертвует посвятительную молитву сидя. 1.4.3.1 Поистине, огонь, разожженный разжигающими (ричами), пылает сильней, чем любой другой огонь. Ведь его и в самом деле не одолеешь и не тронешь его. 1.4.3.2 Точно так же, как пылает огонь, разожженный разжигающими (ричами), пылает и брахман, со знанием произносящий разжигающий (рич). Ведь его и в самом деле не одолеешь и не тронешь его. 1.4.3.3 Он произносит (слова): «Туда (рга-) (пусть двинутся) ваши». (Слово) ргапа («выдох») подлинно содержит рга («туда»). Прану он и разжигает этим (первым разжигающим ричем). «Сюда (а-), о Агни, иди угощать». (Слово) арапа (дыхание, втянутое внутрь и движущееся к анусу) подлинно обладает (смыслом) «вошедшее сюда» (a-ita). Апану он и разжигает этим (вторым разжигающим ричем). «Высоко засияй, о самый юный». «Высоко засияй» — это подлинно вдох (ud-ana). Удану он и разжигает этим (третьим разжигающим ричем). 1.4.3.4 «Ты для нас широкое, достойное славы». Поистине, это слух широк и достоин славы. Ведь слышит он здесь широкую даль и в самом деле с помощью слуха. Слух о» и разжигает этим (четвертым разжигающим ричем). 1.4.3.5 «Достойный восхвалений, достойный поклонений». Поистине, это речь достойна восхвалений. Ведь речь здесь и в самом деле все восхваляет, и все восхваляется здесь речью. Речь он и разжигает этим (пятым разжигающим ричем). 176... [стр. 176 ⇒]

ГЛАВА ЧЕТВЕРТАЯ 141 1 Имеется в виду следующая обрядовая ситуация сказав «хин», будущий хотар произносит «разжигающие» ричи, каждый из которых завершается возгласом «ом», в этот момент адхварью раз за разом подкладывает в жертвенный костер по одной хворостине-разжиге (КШС III 1 10) Трактовка ритуалистом слов «ом» и «хин» продиктована здесь его стремлением преодолеть «ущербность» полнолунного обряда, не предполагавшего исполнения самана (ср примеч к I 1 4 3) Во время приношения сомы «хин» произносился перед первой частью самана (prastava), после чего следовало «ом», что маркировало переход к основной его части (udgitha), см Кане, с 1169-1171 1413 произносит тихо (иратди) — Технический термин, обозначающий обычный способ произнесения яджусов, когда видно движение губ, но звука не слышно В отличие от яджусов рецитация ричей во время обряда производилась в полный голос — громко (uccaih) 1414 Поистине, он произносит {разжигающие ричи со словами) «сюда» и «туда» (sa va a-iti ca pra-iti canvaha) — Перевод до некоторой степени условен, поскольку в тексте речь идет о наречие-префиксе а- («к, в, при») и в данном контексте антонимичном ему префиксе рга- («вперед, про-») 1415 Ведь «туда» совпадает с направлением, в каком делается выдох, «сюда» — в каком вдох (pra-iti vai prana a-ity udanah) — Предложенный перевод, по необходимости описательный, исходит из двусмысленности слова iti, отсылающего в данном случае одновременно и к произносимым префиксам ргаи Й-, и к соответствующим им указующим жестам, которые, видимо, сопровождали их здесь в момент изустной передачи текста, ср аналогичное по смыслу использование iti в связи с выдохом и вдохом в I 3 1 7 У Эггелинга «"Рга (forth)" clearly means out-breathing, and "a (hither)" means in-breathing» 1.4 1 6 «Туда» совпадает с движением скота, когда он удаляется, «сюда» — когда он снова вместе* возвращается {домой) {pra-iti pacavo vitisthanta a-iti samavartante) — Здесь, как и в предшествующей фразе, произнесение ргаи а- сопровождалось, по всей видимости, указующим жестом (см примеч к 14 1 5) Саяна, толкуя здесь эти префиксы, связывает первый с движением скота прочь от дома — в сторону леса на выпас, а второй — с его возвращением вечером домой 1.4.1 8 Поистине, оба эти {слова) совпадают {в смысле) «туда»1 — Поскольку, согласно Саяне, приход Агни на жертвоприношение со стороны обитающих на небе богов означает в то же время его уход от них 297... [стр. 297 ⇒]

Для каждой группы вирусов подобраны наиболее чувствительные клетки (для аденовирусов —эмбриональные клетки почек; для коронавирусов — эмбриональные клетки и клетки трахеи). В зараженных клетках вирусы вызывают ЦПЭ( цитопатический эффект). Культуры клеток используют также при идентификации возбудителей с цитолитической активностью (например, аденовирусов). Для этого применяют так называемую реакцию биологической нейтрализации вирусов в культуре клеток (РБН или РН вирусов). В ее основе — нейтрализация цитолитического действия вирусов типоспецифическми антителами. Иммунитет: вируснейтрализующие специфические IgA (обеспечивают местный иммунитет) и клеточный иммунитет. Местная выработка а-интерферона, появление которого в носовом отделяемом приводит к значительному снижению количества вирусов. Важной особенностью ОРВИ является формирование вторичного иммунодефицита. Постинфекционный иммунитет нестойкий, непродолжительный, типоспецифический. Большое число серотипов и разнообразие вирусов – высокая частота повторных заболеваний. Микробиологическая диагностика.Материал для исследования носоглоточная слизь, мазки-отпечатки и смывы из зева и носа. Экспресс-диагностика.Обнаруживают вирусные антигены в инфицированных клетках. Применяют РИФ (прямой и непрямой методы) с использованием меченных флюорохромами специфических антител, а также ИФА. Для труднокультивируемых вирусов используют генетический метод (ПЦР). Вирусологический метод.Индикацию вирусов в зараженных лабораторных моделях проводят по ЦПЭ, а также РГА и гемадсорбции (для вирусов с гемагглютинирующей активностью), по образованию включений (внутриядерные включения при аденовирусной инфекции, цитоплазматические включения в околоядерной зоне при реовирусной инфекции и т. п.), а также по образованию «бляшек», и «цветной пробе». Идентифицируют вирусы по антигенной структуре в РСК, РПГА, ИФА, РТГА, РБН вирусов. Серологический метод.Противовирусные антитела исследуют в парных сыворотках больного, полученных с интервалом в 10 дней. Диагноз ставят при увеличении титра антител как минимум в 4 раза. При этом определяется уровень IgG в таких реакциях, как РБН вирусов, РСК, РПГА, РТГА. Лечение: эффективного этиотропного - нет; неспецифическое – а-интерферон, оксолин (глазные капли), при вторичной бактериальной инфекции – антибиотики. Основное лечение – симптоматическое/патогенетическое. Антигистаминные препараты. Профилактика: неспецифическая – противоэпидемич. мероприятия. Специфической – нет. Для профилактики аденовирусов – пероральные живые тривалентные вакцины. № 143 Возбудитель гриппа. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение. Таксономия: семейство – Orthomyxoviridae, род Influenzavirus. Различают 3 серотипа вируса гриппа: А, В и С. Структура вируса гриппаА. Возбудитель гриппа имеет однонитчатую РНК, состоящую из 8 фрагментов. Подобная сегментарность позволяет двум вирусам при взаимодействии легко обмениваться генетической информацией и тем самым способствует высокой изменчивости вируса. Капсомеры уложены вокруг нити РНК по спиральному типу. Вирус гриппа имеет также суперкапсид с отростками. Вирус полиморфен: встречаются сферические, палочковидные, нитевидные формы. Антигенная структура. Внутренние и поверхностные антигены. Внутренние антигены состоят из РНК и белков капсида, представлены нуклеопротеином (NP-белком) и М-белками. NP-и М-белки — это типоспецифические антигены. NP-белок способен связывать комплемент, поэтому тип вируса гриппа обычно определяют в РСК. Поверхностные антигены — это гемагглютинин и нейраминидаза. Их структуру, которая определяет подтип вируса гриппа, исследуют в РТГА, благодаря торможению специфическими антителами гемагглютинации вирусов. Внутренний антиген – стимулирует Т-киллеры и макрофаги, не вызывает антителообразования. У вируса имеются 3 разновидности Н- и 2 разновидности N – антигенов. Иммунитет: Во время заболевания в противовирусном ответе участвуют факторы неспецифической защиты: выделительная функция организма, сывороточные ингибиторы, альфа-интерферон, специфические IgA в секретах респираторного тракта, которые обеспечивают местный иммунитет. Клеточный иммунитет - NK-клетки и специфические цитотоксические Т-лимфоциты, действующие на клетки, инфицированные вирусом. Постинфекционный иммунитет достаточно длителен и прочен, но высокоспецифичен (типо-, подтипо-, вариантоспецифичен). Микробиологическая диагностика.Диагноз «грипп» базируется на (1) выделении и идентификации вируса, (2) определении вирусных АГ в клетках больного, (3) поиске вирусоспецифических антител в сыворотке больного. При отборе материала для исследования важно получить пораженные вирусом клетки, так как именно в них происходит репликация вирусов. Материал для исследования — носоглоточное отделяемое. Для определения антител исследуют парные сыворотки крови больного. Экспресс-диагностика.Обнаруживают вирусные антигены в исследуемом материале с помощью РИФ (прямой и непрямой варианты) и ИФА. Можно обнаружить в материале геном вирусов при помощи ПЦР. Вирусологический метод.Оптимальная лабораторная модель для культивирования штаммов—куриный эмбрион. Индикацию вирусов проводят в зависимости от лабораторной модели (по гибели, по клиническим и патоморфологическим изменениям, ЦПД, образованию «бляшек», «цветной пробе», РГА и гемадсорбции). Идентифицируют вирусы по антигенной структуре. Применяют РСК, РТГА, ИФА, РБН (реакцию биологической нейтрализации) вирусов и др. Обычно тип вирусов гриппа определяют в РСК, подтип — в РТГА. Серологический метод.Диагноз ставят при четырехкратном увеличении титра антител в парных сыворотках от больного, полученных с интервалом в 10 дней. Применяют РТГА, РСК, ИФА, РБН вирусов. Лечение: симптоматическое/патогенетическое. А-интерферон – угнетает размножение вирусов. 1. Препараты - индукторы эндогенного интерферона. Этиотропное лечение - ремантидин – препятствует репродукции вирусов, блокируя М-белки. Арбидол – действует на вирусы А и В. [стр. 88 ⇒]

Иммунитет. После перенесенной болезни формируется стойкий пожизненный иммунитет, обусловленный появлением вируснейтрализующих антител, интерферонов и активацией факторов клеточного иммунитета. Микробиологическая диагностика. Исследуют содержимое элементов сыпи, отделяемое носоглотки, кровь, пораженные органы и ткани. Вирус выявляют при электронной микроскопии, в РИФ, РП, по образованию телец Гварниери. Выделяют вирус путем заражения куриных эмбрионов и культур клеток с последующей идентификацией в реакции нейтрализации (на куриных эмбрионах), РСК, РТГА. Серологическую диагностику проводят в РТГА, РСК, РИГА, реакции нейтрализации. Лечение. Симптоматическое; индукторами интерферона и противовирусными препаратами. Профилактика. Прочный иммунитет создает живая оспенная вакцина. Ее готовят из соскобов сыпи телят или при культивировании вируса вакцины (осповакцины) на куриных эмбрионах. Вакцину вводят накожно. Разработана оральная таблетированная вакцина, менее реактогенная. № 150 Возбудитель краснухи. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Таксономия. Семейство Togaviridae. Род Rubivirus. Морфология. Вирион вируса сферической форму. Геном вируса представлен однонитчатой плюс-нитевой РНК, окруженной капсидом с кубическим типом симметрии и внешней липидсодержащей оболочкой, на поверхности которой находятся шипы. В структуре вириона три белка: С, Е1 и Е2. Е1 и Е2— гликопротеины, или шипы, расположенные во внешней оболочке вириона. Резистентность. Вирус чувствителен к эфиру. Малоустойчив к действию физических и химических факторов, неустойчив в окружающей среде. Разрушение происходит под действием органических растворителей, УФ-лучей, солнечного света. Антигенная структура. Вирус представлен одним серотипом. Он имеет внутренний нуклеокапсидный антиген С, выявляемый в РСК, и внешние антигены: Е2, выявляемый в РН, и Е1, или гемагглютинин, выявляемый в РГА и РТГА. Е2 — это протективный антиген вируса. Культивирование. В первичных культурах клеток вирус можно обнаружить по феномену интерференции, в качестве индуктора для суперинфекции используют вирус ECHO-11 и вирус везикулярного стоматита. Вирус краснухи вызывает развитие ЦПД и образование бляшек под агаровым покрытием лишь в некоторых перевиваемых культурах клеток: ВНК-21, Vero, RK-21, SIRC, а также в первичных культурах клеток из тканей человеческого плода. Наилучшей культурой для репродукции и выявления ЦПД являются клетки ВНК-21. Вирус размножается в цитоплазме клеток, вызывая очаговую деструкцию клеточного монослоя и образование цитоплазматических эозинофильных включений. Обладает нейраминидазной активностью. Эпидемиология. Факультативный возбудитель медленных вирусных инфекций. Антропоноз. Источник - человек, опасный со 2 половины инкубационного периода и в течение 7 дней с момента появления сыпи. Выделение вируса из организма происходит с носоглоточным секретом, а также с мочой и испражнениями. Пути передачи:воздушно-капельный и трансплацентарный. Вирус, персистирующий в организме больного с врожденной краснухой, обладает повышенной вирулентностью. Патогенез и проявления. Две формы болезни: приобретенная и врожденная. Приобретѐнная краснуха. Входными воротами инфекции - слизистые оболочки верхних дыхательных путей → вирус в регионарные лимфатические узлы → размножается → поступает в кровь → разносится по органам → оседает в лимфатических узлах и эпителиальных клетках кожи → развивается иммунная воспалительная реакция, сопровождающаяся появлением пятнисто-папулезной сыпи. Инкубационный период — от 11 до 24 дней Проявления: незначительное повышение температуры и легкие катаральные симптомы → конъюнктивит → увеличение затылочных лимфатических узлов → пятнисто-папулезная сыпь, расположенная по всему телу. Вирус выделяется из организма больных с секретом слизистых оболочек верхних дыхательных путей, а также с мочой и фекалиями. Он исчезает из крови через твое суток после появления сыпи, но сохраняется в секрете слизистых оболочек верхних дыхательных путей в течение 2 недель. Иммунитет. Стойкий, напряженный. В ходе заболевания развивается вторичный иммунодефицит клеточного типа. Врожденная краснуха — это медленная вирусная инфекция, развивающаяся в результате внутриутробного трансплацентарного. Проявления развитие катаракты, глухоты и пороков сердца. Внутриутробные пороки. Особая опасность - заражение в 1 триместре беременности. Тератогенное действие обусловлено торможением митотической активности клеток, ишемией плода, цитопатогенным действием вируса на клетки плода. Иммунитет менее стоек, так как формирование его происходит в условиях незрелой иммунной системы плода. Прогрессирующий краснушный панэнцефалит — медленная вирусная инфекция, характеризующаяся комплексом прогрессирующих нарушений двигательной и умственной функции ЦНС, и завершающаяся летальным исходом. Микробиологическая диагностика. Выделение вируса из смывов со слизистой оболочки носа и зева, крови, мочи, реже — испражнений, а также внутренних органов погибших детей и на обнаружении антител в парных сыворотках и цереброспинальной жидкости при врожденной краснухе и прогрессирующем краснушном панэнцефалите. Выделение вируса путем заражения чувствительных клеток. Индикацию вируса осуществляют на основании интерференции с цитопатогенными вирусами или по обнаружению ЦПД и в РГА. Идентификацию вируса осуществляют в РН, РТГА, РИФ и ИФА. (Серодиагностика) Для обнаружения антител применяют РН, РСК, РТГА, ИФА. Диагностическое значение имеет четырехкратное и более увеличение титров антител в динамике заболевания, а также определение специфических IgM. Обнаружение антител у беременных. Если через 10—12 дней после общения беременной с источником инфекции у женщины регистрируется нарастание титров антигемагглютининов в парных сыворотках, а после 20-го дня определяются IgM, то это подтверждает... [стр. 93 ⇒]

«вне нас») спасения как на заданность веры». Только связанная с керигмой вера может в конечном итоге быть верой в церковь как носительницу керигмы. Напротив, в вопросе об историческом Иисусе необходимо подчеркнуть «невозможность для самого человека достичь спасения, ргае* Христа перед своими, extra nos благовестил, необходимость исхода верующих из самих себя»42. Речь идет о примате Христа перед и над церковью. С этими аргументами новый вопрос об историческом Иисусе не хочет возвращаться в фарватер либерального богословия. Поэтому и заговорили о новом вопросе об историческом Иисусе. Новое в новом вопросе об историческом Иисусе состоит в том, что его необходимо задавать не минуя керигму, а именно через посредство первохристианского благовестил. Согласно Кеземану, интерпретация и традиция принципиально неразделимы43. Таким образом, речь идет не о возвращении ко времени до керигмы и тем более не о сведении Евангелия к историческому Иисусу. Это просвещенческая затея оказалась fata morgana (миражом). Поэтому история также не может служить обоснованием керигмы. Однако история является критерием керигмы и веры. «Речь идет не о том, чтобы исторически обосновать веру, но о том, чтобы критически отделить подлинное благовестие от ложного»44. Э.Фукс выразил этот методический подход в ясной формуле: «Если мы раньше интерпретировали исторического Иисуса с помощью первохристианс-кой керигмы, то сейчас мы интерпретируем эту керигму с помощью исторического Иисуса — оба направления интерпретации дополня> ют друг друга»45. Таким образом, новый вопрос об историческом Иисусе учитывает герменевтический круг, действительный для всякого понимания. Этот вопрос исходит из предпонимания, из конкретной веры, и соотносится с ее содержанием, с Иисусом Христом. Он понимает Иисуса в свете церковной веры, и наоборот, интерпретирует церковную веру, соизмеряя ее с Иисусом. Христологический догмат и историческая критика кажутся вновь примиренными, хотя * Ргае- «перед» (лат.), здесь — «первенство», «превосходство». — Прим. ред. 12 Е. Kasemann «Sackgassen im Streit um den historischen Jesus», в Exegetische Versuche und Besinnungen II. Guttingen, 1970 (3-е изд.), S. 67. 43 E. Kasemann Problem, S. 190-195. *" Id. Sackgassen, S. 55. 45 E.Fuchs ZurFrage nach dem historischen Jesus. Tubingen, 1965 (2-е изд.), VII. [стр. 29 ⇒]

Эпидемиоло-гия Вирусы парагриппа вызывают в основном локальные вспышки. и профиИсточник – только человек. Путь заражения – воздушнолактика капельный. Иммунитет – непродолжительный, типоспецифический. Методы профилактики не разработаны. Лабораторная Материалом для исследования служит: диагностика Отделяемое носоглотки, мазки-отпечатки слизистой носовых ходов, кровь и секционный материал. 1. Экспресс-диагностика: ◘Прямой РИФ или ИФА (обнаружить вирусный антиген в мазкахотпечатках). 2. Вирусологический: ◘Смыв с носоглотки вносят в культуру клеток. Индикацию проводят по ЦПД (СИМПЛАСТЫ!), РГА с культуральной жидкостью, реакции гемадсорбции. Идентификация – РТГА или реакции торможения гемадсорбции. 3. Серологический метод: ◘Специфические антитела и возрастание их титра в 4 раза минимум (в парных сыворотках) выявляют с помощью РТГА, РСК, ИФА, РН, РИФ ВИРУС ►Вирус эпидемического паротитасвинки») имеет типичную для ЭПИДПАРОТИТ парамиксовирусов морфологию. Белок HN и белок F обладают А (СВИНКИ) теми же функциями. (особенности) ►Заражение воздушно-капельным путем. Источник инфекции – больной. Репродукция вируса происходит в cтеноновом протоке, сопровождается местным поражением тканей околоушных желез. Затем вирус поступает в кровь, попадает в железистые ткани и в мозг. ►Существует только один антигенный тип вируса. Перенесенная инфекция оставляет стойкий иммунитет. У 20% мальчиков в подростковом возрасте развивается орхит, который может привести к стерильности. Также поражаются внутренние органы и железы (панкреатит, тиреоидит, менингит). ►Лабораторная диагностика: Материал – слюна, отделяемое носоглотки, моча (начало заболевания), ликвор. 1. Вирусологический метод: используют куриные эмбрионы и культуры клеток. Индикация в культуре клеток по ЦПД (гигантские многоядерные клетки и симпласты с цитоплазматическими включениями, позже наблюдается разрушение клеточного монослоя). На эмбрионах – РГА. Идентификацию проводят с помощью РТГА, РИФ, ИФА, РСК, реакции торможения гемадсорбции. 2. Серологический метод: ◘Специфические антитела и возрастание их титра в 4 раза минимум (в парных сыворотках) выявляют с помощью РТГА, РСК, ИФА ►Специфическая профилактика – живая комбинированная вакцина тримовакс против кори, паротита и краснухи (вакцинируют в 12 месяцев, однократно). Также вакцинируют моновакциной подростков и взрослых, не болевших ранее паротитом. ВИРУС КОРИ ►Вирус кори имеет типичную для парамиксовирусов морфологию. (особенности) ►У него отсутствует нейраминидаза, таким образом вирус кори обладает гемагглютинирующей, гемолитической и симпластообразующей активностью ►Корь – острое вирусное заболевание преимущественно детского возраста, характеризующееся общей интоксикацией, поражением слизистых оболочек дыхательных путей (в полости рта обнаруживаются пятна Коплика - Филатова — везикулы,... [стр. 3 ⇒]

Положительная РГА оценивается по форме осадка эритроцитов, которые осаждаются на стенках, образуя «зонтик». 10.3. Титром вируса считается наибольшее разведение его, при котором наблюдается агглютинация эритроцитов, что соответствует одной гемагглютинирующей единице (1 ГАЕ) в 0,2 мл. Рабочее разведение должно содержать в 0,2 мл 4 ГАЕ, поэтому показатель последнего разведения антигена, вызвавшего агглютинацию, делят на 4. Напри+ мер, если агглютинирующий титр равен 1:128, то рабочее разведение (4 ГАЕ в 0,2 мл) будет соответствовать 1:32 (128 : 4 = 32). 10.4. Рабочую дозу антигена контролируют в РГА. Для этого в 4 лунки наливают по 0,2 мл физиологического рас+ твора. В первую лунку вносят 0,2 мл рабочего разведения вируса, смешивают и переносят в последующие лунки. Из четвертой лунки 0,2 мл удаляют. Во все лунки добавляют по 0,2 мл физиологического раствора и по 0,05 мл взвеси эритроцитов. Реакцию учитывают через 60...90 мин. При правильном выборе рабочего разведения вируса в первой и второй лунках, содержащих соответственно 2 ГАЕ и 1 ГАЕ, должна быть полная агглютинация, а в третьей и четвертой лунках агглютинации не должно быть. 10.5. Для постановки основного опыта в одном ряду готовят в объеме 0,2 мл двукратные разведения специфи+ ческой сыворотки до указанного на этикетке ампулы тит+ ра. Во втором ряду разводят отрицательную сыворотку. В каждую лунку обоих рядов вносят по 0,2 мл рабочего разведения вируса, содержащего 4 ГАЕ. В третьем ряду ставят контроль эритроцитов (0,05 мл эритроцитов и 0,4 мл физиологического раствора). Панели встряхивают и пос+ ле 60...90+минутного контакта сыворотки с вирусом в каж+ дую лунку добавляют по 0,05 мл 5%+ной взвеси эритро+ цитов. Реакцию учитывают через 60...90 мин после оседания эритроцитов в контрольных лунках третьего ряда. Идентификация вируса считается завершенной, если специфическая сыворотка тормозит гемагглютинирующую активность вируса до ее титра. [стр. 222 ⇒]

Эритроциты в фосфатнобуферном растворе не должны спонтанно агглютинироваться. Для контроля рабочей дозы антигена в 5 лунок пластины вносят по 0,025 см3 фосфатнобуферного раствора. В первую лунку добавляют 0,025 см3 рабочего разведения антигена и после смешивания 0,025 см3 жидкости переносят во вторую лунку и т. д. Из последней лунки 0,025 см3 жидкости удаляют. Затем во все лунки добавляют по 0,025 см3 0,6%ной суспензии эритроцитов морской свинки. При правильном приготовлении рабочего разведения антигена в первой, второй и третьей лунках, содержащих соответственно 4, 2 и 1 ГАЕ, должна быть полная агглютинация эритроцитов. В четвертой и пятой лунках агглютинация эритроцитов должна отсутствовать или быть незначительной. Контроль специфичности антигена с гипериммунной и нормальными сыворотками свиней ставят, как описано в п. 2.4. Гипериммунная сыворотка свиней должна полностью подавлять гемагглютинирующую активность антигена в титре, указанном на этикетке флакона. Нормальная сыворотка свиней не должна подавлять гемагглютинирующую активность антигена. 2.6. Парвовирусный антиген в суспензии внутренних органов абортированных плодов определяют в реакции гемагглютинации (РГА). Для постановки реакции из легких, почек, печени и кишечника плодов длиной не более 15 см готовят 30%ную суспензию на фосфатнобуферном растворе. Суспензию центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин и надосадочную жидкость используют в РГА. Плоды старше 70дневного возраста (длиной более 17 см) непригодны для обнаружения парвовирусного антигена. 2.7. В лунки пластины вносят по 0,025 см3 фосфатнобуферного раствора и готовят двукратные разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят 0,025 см3 0,6%ной суспензии эритроцитов морской свинки. Пластину осторожно встряхивают и выдерживают при температуре 6...8°C в течение 2...3 ч. За титр гемагглютинирующего антигена принимают его наибольшее разведение, которое вызывает полную агглютинацию эритроцитов. [стр. 359 ⇒]

Образовавшийся сгусток отделяют от стенок тонким металлическим стержнем или пастеровской пипеткой и выдерживают при комнатной температуре 20...25°C в течение 12...18 ч или при температуре 37°C (в термостате) в течение 60 мин, а затем 8...10 ч при температуре от 2°C до 8°C. Отстоявшуюся сыворотку сливают в чистые пробирки и исследуют в РТГА. Для удаления термолабильных ингибиторов сыворотку крови прогревают на водяной бане при 56°C в течение 30 мин. 12. РТГА проводят в два этапа: n определение гемагглютинирующего титра антигена в реакции гемагглютинации (РГА) для расчета рабочей дозы; n определение титра антител в пробах сыворотки крови. 12.1. Постановка реакции гемагглютинации. Для постановки РГА готовят двукратные разведения антигена от 1:2 до 1:1 048 576. С этой целью во все лунки полистироловой панели пипеткой разливают раствор № 1 (0,05 см3 или 0,025 см3), в первую лунку вносят равный объем антигена, трехкратно пипетируют и переносят по 0,05 см3 или 0,025 см3 во вторую лунку и т. д. Из последней лунки удаляют по 0,05 см3 или 0,025 см3 соответственно. После разведения антигена во все лунки вносят 0,8%ную суспензию эритроцитов петуха в объеме, равном исходному объему раствора № 1. Микропанели аккуратно встряхивают и оставляют при комнатной температуре (20...25°C). Учет реакции проводят после оседания эритроцитов в контроле. Для контроля эритроцитов на спонтанную гемагглютинацию и определения времени учета реакции в две лунки с раствором № 1 (0,05 см3 или 0,025 см3) добавляют равный объем эритроцитов. РГА оценивают положительно при оседании эритроцитов в виде хорошо выраженного «зонтика». Примечание. Получение нечетких результатов может быть связано с изменившимся pH забуференного физиологического раствора. [стр. 403 ⇒]

Из осадка эритроцитов на физиологическом растворе (pH 7,2...7,4) готовят 0,7 или 1%ную суспензию. Хранить суспензию можно в условиях холодильника (4°C) до появления признаков гемолиза эритроцитов. Кроме нативных, в работе могут быть использованы стабилизированные (формалинизированные) эритроциты петуха. 2.4. Получение сыворотки крови. 2.4.1. Кровь берут из подкрыльцовой вены или путем скарификации гребня, собирают в стерильные пробирки, предварительно увлажненные стерильным физиологическим раствором. Образовавшийся сгусток отделяют от стенок тонким металлическим стержнем или пастеровской пипеткой и выдерживают при комнатной температуре (18...20°C) в течение 12...18 ч или при температуре 37°C (термостат) в течение 60 мин, а затем 8...10 ч при 4°C (холодильник). Отстоявшуюся сыворотку сливают в чистые пробирки и исследуют в РТГА. 2.4.2. Для удаления термолабильных ингибиторов сыворотку крови прогревают на водяной бане при 56°C в течение 30 мин. 2.5. Реакцию торможения гемагглютинации проводят в два этапа: n определение гемагглютинирующего титра вируса в реакции гемагглютинации (РГА) для расчета рабочей дозы; n определение титра антител в пробах сыворотки крови. Реакцию ставят макроили микрометодом. 2.5.1. Постановка реакции гемагглютинации. Для постановки РГА готовят двукратные разведения вакцинного вируса от 1:2 до 1:4096. С этой целью во все лунки одного ряда полистероловой микропанели микротитратором разливают физиологический раствор (0,05 или 0,25 см3), в первую вносят в равном объеме вакцинный вирус, трехкратно пипетируют и переносят 0,05 или 0,025 см3 во вторую лунку и т. д. Из последней лунки 0,05 или 0,025 см3 удаляют и обезвреживают в 2%ном растворе едкого натра. [стр. 449 ⇒]

Из осадка отмытых эритроцитов готовят 1%ную и 5%ную взвесь в физиологическом растворе. Готовую взвесь хранят при 4°C не более 5 суток. 12. Перед постановкой РЗГА ставят реакцию гемагглютинации, которая основана на способности вирусов болезни Ньюкасла и классической чумы птиц вызывать склеивание (агглютинацию) эритроцитов. Реакция гемагглютинации является подготовительным этапом для постановки реакции задержки гемагглютинации. РГА используется с целью определения наличия вируса в исследуемом материале и его титрования. Гемагглютинины входят в состав вирусной частицы (вириона) и могут содержаться в следующих инфицированных вирусом материалах: аллантоисной и амниотической жидкостях, оболочках и органах куриного эмбриона; в легких, печени и селезенке погибшей птицы, в жидкой и клеточной фракциях культур ткани. Гемагглютинирующей активностью, кроме вирусов, обладают также некоторые штаммы различных видов бактерий и микоплазм. В связи с этим с особой осторожностью следует подходить при оценке положительной РГА в бактериологически нестерильных материалах. Неспецифическая гемагглютинация может быть вызвана и изменением pH раствора. Для постановки РГА используют эритроциты кур, лошади и многих других видов млекопитающих и птиц. Спектр гемагглютинации служит характеристикой биологической активности вируса и штаммов. Вирулентные штаммы вируса болезни Ньюкасла не вызывают агглютинацию эритроцитов лошади, чем отличаются от вируса классической чумы птиц, который способен агглютинировать их в высоких разведениях. Для постановки РГА готовят двукратные разведения вируссодержащего материала, начиная с 1:2 до 1:2048 (1:2560), а при необходимости и выше, для чего в ряд лунок... [стр. 459 ⇒]

Надосадочную жидкость переносят в стерильные пробирки, добавляют 1000 ЕД/мл пенициллина и 1000 мг/мл стрептомицина, выдерживают при комнатной температуре (20°C) 60 мин, проверяют на отсутствие бактериального загрязнения путем высева на питательные среды МПБ, МПА и используют для заражения эмбрионов кур. 3. Выделение вируса на эмбрионах кур. 3.1. С этой целью исследуемый материал (10%ную надосадочную суспензию) вводят в объеме 0,2 мл в аллантоисную полость 3...10дневным эмбрионам. Заражают не менее 10 эмбрионов, контролем служат 5 незараженных эмбрионов. 3.2. Зараженные и контрольные эмбрионы инкубируют в термостате при температуре 37...38°C и относительной влажности 60...70% в течение 96 ч. В процессе инкубации эмбрионы овоскопируют два раза в сутки, погибших исследуют в капельной реакции гемагглютинации РГА (п. 4). Через 96 ч инкубации все эмбрионы вскрывают после предварительного охлаждения в холодильнике при 4°C. 3.3. Перед вскрытием эмбрионов скорлупу над воздушным пространством (пугой) обрабатывают спиртом, обжигают и из каждого эмбриона отбирают экстраэмбриональную жидкость в стерильные пробирки, одновременно делают высевы на питательные среды МПБ, МПА для контроля на отсутствие бактериальной контаминации. 4. Постановка капельной реакции гемагглютинации (РГА). 4.1. Для постановки капельной реакции гемагглютинации экстраэмбриональную жидкость от каждого эмбриона смешивают в равных каплях с 1%ной взвесью эритроцитов петуха на стекле или пластинах. При положительной реакции через 2...5 мин появляются хлопья агглютинированных эритроцитов. 4.2. Для получения 1%ной суспензии эритроцитов используют петухов старше 6 мес. Кровь берут из подкрыльцовой вены во флаконы с 2...3%ным раствором лимонно... [стр. 476 ⇒]

..7,3), трижды отмывают физиологическим раствором путем центрифугирования при 1500 об/мин 10 мин. Из осадка эритроцитов готовят 1%ную суспензию и хранят ее не более трех суток в условиях холодильника (4°C). 4.3. При наличии гемагглютинации и отсутствии бактериального загрязнения проводят титрование выделенного вируса в количественной РГА. В случае отрицательной РГА образцы экстраэмбриональной жидкости объединяют (по 5 ЭК) и проводят еще два пассажа с последующим контролем на вирус в капельной РГА. 5. Постановка количественной РГА. 5.1. Для постановки количественной РГА готовят двукратные разведения исследуемой экстраэмбриональной жидкости ЭК от 1:2 до 1:1024. Для этого в ряд лунок пластин наливают физиологический раствор (pH 7,2...7,3) в объеме по 0,2 мл. В первую лунку вносят 0,2 мл исследуемой жидкости, трехкратно пипетируют и переносят 0,2 мл смеси во вторую лунку и так далее до требуемого разведения. Из последней лунки 0,2 мл удаляют в дезраствор. 5.2. В каждую лунку добавляют по 0,2 мл 1%ной суспензии эритроцитов, затем пластины встряхивают и оставляют при комнатной температуре на 30 мин. Контролем служат две лунки с эритроцитами и физиологическим раствором в равных объемах (по 0,2 мл). 5.3. При положительной РГА эритроциты образуют осадок в виде зонтика. Титром вируса считается то наибольшее его разведение, при котором наблюдается еще агглютинация эритроцитов, что и соответствует 1 АЕ. Выделенный вирус идентифицируют в РТГА. 6. Идентификация вируса в реакции торможения гемагглютинации (РТГА). 6.1. Идентификацию выделенного вируса проводят в РТГА с эталонными специфическими сыворотками. Подготовку препаратов к работе проводят согласно требованиям, указанным во вкладыше в набор. [стр. 477 ⇒]

Инфекционный ларинготрахеит дифференцируют путем заражения эмбрионов кур на хорионаллантоисную оболочку и постановки реакции нейтрализации согласно наставлению по лабораторной диагностике инфекционного ларинготрахеита, утвержденному Главветупром Минсельхоза СССР. Оспу дифференцируют путем постановки биопробы на цыплятах. Для исключения ньюкаслской болезни ставят реакцию гемагглютинации (РГА). Вирус ньюкаслской болезни обладает гемагглютииирующими свойствами. Специфичность РГА подтверждается реакцией гемагглютинации со специфической сывороткой (1). [стр. 506 ⇒]

Полученную взвесь эритроцитов иссле дуют на спонтанную агглютинацию по п. 6.2.5. Эритроци ты, не обладающие спонтанной агглютинацией, использу ют в РГА и РТГА. 6.2.5. Постановка РГА на спонтанную агглютинацию. Реакцию ставят на полистироловых панелях. В 5...6 лунках смешивают равные объемы по 0,025 см3 ЗБФ и при готовленную взвесь эритроцитов. Панели осторожно встря хивают и выдерживают при температуре от 2 до 4°C. Учет реакции осуществляют не ранее, чем через 1,5...2 ч. Само агглютинация проявляется равномерным распределением эритроцитов на внутренней поверхности лунки в виде «зон тика», в то время как отрицательный результат будет харак теризоваться их оседанием на дно лунки в виде «пуговки». 6.2.6. Постановка РГА с исследуемым материалом. Реакцию ставят на полистироловых панелях. Готовят двукратные разведения испытуемого материала на ЗБФ pH 6,6 от 1:2 до 1:1 048 576 в объеме 0,05 см3, и во все лун ки вносят такой же объем суспензии эритроцитов. Одно временно ставят контроль на спонтанную агглютинацию эритроцитов, для чего в 5...6 лунках смешивают равные объемы по 0,05 см3 ЗБФ и приготовленную взвесь эритро цитов. Панель осторожно встряхивают и выдерживают при температуре от 2 до 4°C. Учет реакции осуществляют не ранее, чем через 1,5... 2 ч. Положительной реакцию считают, когда эритроциты равномерно распределяются на внутренней поверхности лунки в виде «зонтика», в то время как отрицательный результат будет характеризоваться оседанием эритроцитов на дно лунки в виде «пуговки». Наибольшее разведение исследуемого материала, при котором наблюдается агглю тинация эритроцитов, считается титром агглютинирующе го агента. 6.2.7. Постановка РТГА. Для идентификации выделенного в РГА гемагглютини рующего агента применяется РТГА. Для постановки РТГА готовят рабочее разведение ис следуемого материала на ЗБФ pH 6,6, содержащего 4 ГАЕ... [стр. 597 ⇒]

...гемолиз эритроцитов. КЛИНИКА Вирусы парагриппа 1-го типа вызывают симптом ложного крупа, бронхиолиты, пневмонии у детей, у взрослых – насморк, легкие ОРЗ; 2 тип – крупассоциированный вирус; 3 тип (наиболее распространен) -- у детей первого года жизни - в 60-70% вызывают заболевания нижних отделов дыхательных путей (бронхиолиты, бронхиты со стенозом гортани, пневмонии); 4 тип – ОРЗ с интоксикацией, напоминающей грипп. Эпидемиоло-гия Вирусы парагриппа вызывают в основном локальные вспышки. Источник – только и профичеловек. Путь заражения – воздушно-капельный. Иммунитет – лактика непродолжительный, типоспецифический. Методы профилактики не разработаны. Лабораторная Материалом для исследования служит: диагностика Отделяемое носоглотки, мазки-отпечатки слизистой носовых ходов, кровь и секционный материал. 1. Экспресс-диагностика: ◘Прямой РИФ или ИФА (обнаружить вирусный антиген в мазках-отпечатках). 2. Вирусологический: ◘Смыв с носоглотки вносят в культуру клеток. Индикацию проводят по ЦПД (СИМПЛАСТЫ!), РГА с культуральной жидкостью, реакции гемадсорбции. Идентификация – РТГА или реакции торможения гемадсорбции. 3. Серологический метод: ◘Специфические антитела и возрастание их титра в 4 раза минимум (в парных сыворотках) выявляют с помощью РТГА, РСК, ИФА, РН, РИФ ВИРУС ►Вирус эпидемического паротита («свинки») имеет типичную для парамиксовирусов ЭПИДПАРОТИТА морфологию. Белок HN и белок F обладают теми же функциями. (СВИНКИ) ►Заражение воздушно-капельным путем. Источник инфекции – больной. (особенности) Репродукция вируса происходит в cтеноновом протоке, сопровождается местным поражением тканей околоушных желез. Затем вирус поступает в кровь, попадает в железистые ткани и в мозг. ►Существует только один антигенный тип вируса. Перенесенная инфекция оставляет стойкий иммунитет. У 20% мальчиков в подростковом возрасте развивается орхит, который может привести к стерильности. Также поражаются внутренние органы и железы (панкреатит, тиреоидит, менингит). ►Лабораторная диагностика: Материал – слюна, отделяемое носоглотки, моча (начало заболевания), ликвор. 1. Вирусологический метод: используют куриные эмбрионы и культуры клеток. Индикация в культуре клеток по ЦПД (гигантские многоядерные клетки и симпласты с цитоплазматическими включениями, позже наблюдается разрушение клеточного монослоя). На эмбрионах – РГА. Идентификацию проводят с помощью РТГА, РИФ, ИФА, РСК, реакции торможения гемадсорбции. 2. Серологический метод: ◘Специфические антитела и возрастание их титра в 4 раза минимум (в парных сыворотках) выявляют с помощью РТГА, РСК, ИФА ►Специфическая профилактика – живая комбинированная вакцина тримовакс против кори, паротита и краснухи (вакцинируют в 12 месяцев, однократно). Также вакцинируют моновакциной подростков и взрослых, не болевших ранее паротитом. ВИРУС КОРИ ►Вирус кори имеет типичную для парамиксовирусов морфологию. (особенности) ►У него отсутствует нейраминидаза, таким образом вирус кори обладает гемагглютинирующей, гемолитической и симпластообразующей активностью ►Корь – острое вирусное заболевание преимущественно детского возраста,... [стр. 3 ⇒]

Отбор и подготовка материала. В лабораторию направляют от больных животных пробы фекалий, взятые в первые дни болезни, и сыворотку крови для серологической диагностики. От погибших животных отбирают сердечную мышцу и тонкий кишечник. Материал отправляют в термосе со льдом. Лабораторная диагностика парвовирусной инфекции собак может проводиться по следующим направлениям: - обнаружение гемагглютинирующего вируса в патматериале с последующей идентификацией вируса в РТГА или ИФА; - обнаружение специфических антител в сыворотке крови собак. Обнаружение вируса в патматериале постановки РГА. С этой целью из проб фекалий, отобранных в первые четыре дня болезни, готовят на забуференном физиологическом растворе 20%-ную суспензию, после чего ее центрифугируют при 3-5 тыс. об/мин (при возможности 8-10 тыс. об/мин). Образовавшуюся надосадочную жидкость используют в РГА. Реакцию гемагглютинации проводят при 2-4ºС с 0,5-1%-ной взвесью эритроцитов свиней. Учет реакции проводят через 1-1,5 часа. При наличии гемагглютинирующего вируса в материале проводят его идентификацию. Идентификацию вируса в патматериале проводят при помощи РТГА или ИФА. Постановку РТГА осуществляют общепринятыми методом микро- и макровариантов с 4-8 ГАЕ вируса при 4ºС. Используемые в реакции иммунные сыворотки инактивируют 1 час при 56ºС, после чего их обрабатывают эритроцитами свиней и раствором каолина. При отсутствии гемагглютинации с разведениями вируса 1:8 и 1:16 результат считают положительным Для постановки ИФА используют кошачьи антитела к вирусу панлейкопении кошек. Серодиагностику парвовирусной инфекции собак осуществляют в РТГА, где в качестве антигена используют штамм вируса SP-80, получаемый в культуре легочных клеток кошек. В реакции используют эритроциты свиней, фиксированные 3%-ным раствором формальдегида. Исследуемую сыворотку инактивируют прогреванием при 56ºС в течение 30 минут и адсорбируют свиными эритроцитами с целью удаления неспецифических агглютининов. Сыворотки считают положительными при наличии специфических антител в разведении 1:160 и выше. Алеутская болезнь норок (плазмоцитоз норок) – контагиозная, медленно развивающаяся инфекционная болезнь, характеризующаяся распространенной плазмоклеточной пролиферацией (плазмоцитозом), гипергаммаглобулинемией, явлениями геморрагического диатеза, анемией и прогрессирующим истощением зверей. К болезни восприимчивы норки всех пород, независимо от пола и возраста, однако животные определенных пород (алеутские, сапфировые, голубые) генетически предрасположены к более тяжелому проявлению болезни. Как было установлено, они являются гомозиготными носителями рецессивного гена аа. Болезнь протекает остро, подостро, хронически (чаще) и латентно. Различают бессимптомное развитие болезни (непрогрессирующая форма), которое развива... [стр. 9 ⇒]

Выделение вируса осуществляют путем заражения РКЭ 9-11-дневного возраста в аллантоисную полость суспензией материала в объеме 0,2 мл. При этом на каждую пробу материала используют не менее 10 эмбрионов. Инкубацию зараженных эмбрионов проводят в течение 72 часов, после при отсутствии погибших 5 эмбрионов убивают путем охлаждения при 4ºС на ночь. Остальные пять эмбрионов инкубируют до 120 часов, а затем убивают. При этом учитывают срок наступления гибели и по времени гибели эмбрионов определяют вирулентность изолированного штамма. При отсутствии РКЭ вирус можно выделить на неиммуннной к ньюкаслской болезни птице. Для этого исследуемый материал вводят (0,5мл) внутримышечно цыплятам в возрасте 2-4 мес. При появлении для болезни симптомов птицу убивают в агональном состоянии и берут пробы головного мозга и селезенки для индикации и идентификации вируса. Индикация вируса в выделенном материале необходима для ориентировочного определения гемагглютинирующего вируса в аллантоисной или амниотической полостях, а также органах вскрытого куриного эмбриона. Для быстрой индикации вируса ставят РГА с эритроцитами кур, морской свинки и обязательно лошади. Постановка РГА с эритроцитами лошади позволяет дифференцировать вирус гриппа птиц в изоляте, который в отличие от вируса ньюкаслской болезни способен их агглютинировать. Для постановки реакции на предметные стекла наносят 5%-ную суспензию эритроцитов и каплю вируссодержащего материала и наблюдают за появлением хлопьев эритроцитов. Идентификацию вируса ньюкаслской болезни осуществляют в РТГА макро- и микровариантов. Постановка РТГА микрометодом заключается в нанесении на предметное стекло аллантоисной жидкости, содержащей идентифицируемый гемагглютинирующий вирус, капли эталонной специфической сыворотки и капли суспензии эритроцитов. Идентификацию вируса также можно проводить в РИФ по вышеописанной методике, ИФА, РСК. При постановке последней следует иметь в виду, что патогенные велогенные штаммы вируса обладают слабой комплементсвязывающей активностью в отличие от мезо- и лептогенных штаммов. Серодиагностика и ретроспективная диагностика ньюкаслской болезни основана на выявлении специфических антител к возбудителю болезни. В практике используют РТГА, в которой исследуют парные пробы сыворотки крови в присутствии эталонного антигена (в его качестве используют вакцинный штамм La Sota). Результат реакции считают положительным, если разница в титрах первой и второй сывороток составляет не менее трех разведений. Для оценки поствакцинального иммунитета также исследуют желтки яиц от вакцинированной птицы, что имеет некоторые преимущества перед исследованием сывороток крови птиц серологическим методом. Инфекционный бурсит (болезнь Гамборо, инфекционная бурсальная болезнь) – остро протекающая болезнь, поражающая чаще всего цыплят 3-6недельного возраста и характеризующаяся поражением клеток и органов им... [стр. 25 ⇒]

Для серологического исследования в лабораторию направляют 10-15 проб сывороток крови (по 2-3 мл) от свиноматок с нарушением воспроизводительной функции. Также рекомендуется направлять сыворотку крови от плодов, мертворожденных и новорожденных поросят до приема молозива. Вместе с сывороткой крови от плодов в лабораторию возможно доставлять жидкость из анатомических полостей после хранения их при температуре 4°С в течение ночи. Материал доставляют в термосе со льдом. Подготовка материала заключается в приготовлении препаратовотпечатков из внутренних органов и обязательно легких плода, так как вирус содержится в тканях только при отсутствии антител, а в присутствии антител – сохраняется в легких. Параллельно с приготовлением препаратов-отпечатков из тканей плода готовят 20-30%-ную суспензию, центрифугируют при 1 тыс об/мин в течение 20 минут, после чего надосадочную жидкость используют в качестве антигена для постановки РГА. Индикацию и идентификацию вируса проводят в РГА и РИФ. Для постановки реакции гемагглютинации используют 0,6%-ную взвесь эритроцитов морской свинки на фосфатном буфере. Реакцию проводят при температуре 4°С с ее учетом после 60 минут инкубации. В реакции иммунофлуоресценции исследуют препараты-отпечатки из внутренних органов абортированных плодов. При совпадении результатов диагностической индикации (в РГА) и серологической идентификации вируса (в РИФ) ставят окончательный диагноз. Серодиагностика и ретроспективная диагностика основана на выявлении специфических антител в сыворотке крови свиноматок и плодов. С этой целью осуществляют постановку РТГА с использованием диагностического набора ВИЭВ и ВГНКИ. Сыворотки от свиноматок и плодов исследуют в реакции в разведениях от 1:8 до 1:16384, которые смешивают с 4 ГАЕ антигена и после часового контакта при комнатной температуре к смеси добавляют 0,6%ную суспензию эритроцитов морской свинки. Результат реакции учитывают через 2-3 часа инкубации при 4°С. Диагноз считают установленным в случае обнаружения в двух и более из числа доставленных для исследования пробах специфических антител в разведениях 1:64 и выше. Для серодиагностики болезни можно использовать реакцию микронейтрализации в пластиковых панелях с круглодонными лунками, РИД и ELISA- вариант ИФА. ЛЕКЦИЯ 7. ВИРУСЫ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ, ИНФЕКЦИОННОГО БУРСИТА, ИНФЕКЦИОННОГО ЛАРИНГОТРАХЕИТА, БОЛЕЗНИ МАРЕКА, ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР Ньюкаслская болезнь – высококонтагиозная вирусная болезнь, главным образом куриных, характеризующаяся пневмонией, энцефалитом, геморрагическим диатезом и поражением внутренних органов. Из-за сильного разнообразия симптомов болезни различают четыре ее формы. Первая форма вызывается велогенными штаммами вируса и характеризуется одновременным поражением органов дыхания и пищеварения (в виде... [стр. 28 ⇒]

В этой связи заражение культур клеток целесообразно проводить в период их логарифмического роста, когда сформировалось только 30-50% монослоя. Из первичных культур клеток рекомендуется использование культур клеток почек (РК-15) и тестикул (ST) поросят. Перевиваемые культуры клеток человека (HeLa, Hep-2, KB, FL-Amnion) признаны контаминированными парвовирусами свиней. Размножение парвовируса свиней в первичных и перевиваемых культурах клеток сопровождается развитием цитопатического эффекта, который характеризуется диффузной зернистостью и округлением клеток, отделением их от стекла и частичным или полным разрушением клеточного монослоя. Учитывая высокую вероятность спонтанной контаминации используемых в лабораториях культур клеток, рекомендуется проводить их деконтаминацию путем серийного пассирования их в присутствии специфической сыворотки (1%) в ростовой среде. Перед использованием культуры рекомендуется исследовать с целью исключения парвовирусной контаминации по РГА и гемадсорбции эритроцитов морских свинок. Парвовирус агглютинирует эритроциты морской свинки, цыплят, крыс, мышей и некоторых других животных и не агглютинирует эритроциты барана, лошадей, свиней, крупного рогатого скота. Для постановки реакций чаще используют эритроциты морской свинки, реакцию проводят при температуре 4°С, в качестве разбавителя используют фосфатно-буферный раствор. Лабораторная диагностика. На наличие в хозяйстве парвовирусной инфекции могут указывать признаки нарушения воспроизводительной способности свиноматок, однако окончательный диагноз ставят на основании результатов лабораторного исследования. Постановка диагноза на парвовирусную инфекцию свиней путем выделения вируса из патматериала является малопригодным диагностическим тестом, так как выделить возбудитель из погибших и мумифицированных плодов удается не всегда. Кроме того, используемые для изоляции вируса культуры клеток зачастую бывают изначально контаминированными парвовирусами, что может приводить к диагностическим ошибкам. Лабораторная диагностика парвовирусной инфекции свиней проводится по следующим направлениям: - индикация и идентификация возбудителя непосредственно в патматериале путем постановки РГА и РИФ; - обнаружение специфических антител в сыворотке крови больных животных. Отбор патматериала. На исследование направляют мумифицированные плоды не позднее 70 дней супоросности (длиной менее 16 см) или легкие от них. Инфицированные плоды позднее 70 дней супоросности обычно содержат вместе с антигенами антитела, что мешает выявлению вируса и вирусного антигена. [стр. 29 ⇒]

Р Г А (Реакция гемагглютинации) РГА - известна с 1941 года. Не серологическая реакция, в ней не участвует иммунная сыворотка, т.е. антитела. Способностью агглютинировать эритроциты обладают ортомиксовирусы (вирус гриппа), парамиксовирусы (вирусы парагриппа, паротита, ньюкаслской болезни и др.), аденовирусы (вирус ССЯ-76), некоторые нейротропные вирусы и другие. При постановке РГА надо знать эритроциты каких животных агглютинирует данный вирус. С помощью РГА нельзя серотипировать и идентифицировать вирусы, она используется, в основном, для их индикации (выявления или подтверждения наличия). Механизм РГА заключается в том, что на поверхности эритроцитов имеются рецепторы мукопротеидной природы, способные адсорбировать до 10000 вирионов, а на поверхности гемагглютинирующих вирусов располагаются – сложные белковые тела с ферментной активностью. При смешивании эритроцитов с вируссодержащей жидкостью гемагглютинины вируса при помощи фермента муциназы вступают во взаимодействие с рецепторами эритроцитов, в результате чего происходит адсорбция вирусов на эритроцитах. Вирионы адсорбированные на одном эритроците, способны свободными поверхностями соединяться с другими эритроцитами., образуя при этом мостики между ними, что приводит к склеиванию (агглютинации) эритроцитов. Адсорбция вирусов на эритроцитах – энзиматический (ферментный) процесс, поэтому она не стабильна. Через некоторое время (в т.ч. в зависимости от температуры окружающей среды и др.) после проявления агглютинации связь между вирусами и эритроцитами нарушается, так как вирусная муциназа разрушает рецепторы эритроцитов и вирусы элюируют (отсоединяются) с эритроцитов. Это надо учитывать при учете РГА (а также и РЗГА). После элюции эритроциты оседают на дно лунки планшета (или пробирки) в виде диска («пуговки», бугорка). Использованные в РГА эритроциты вторично этим вирусом не агглютинуруются, т.к. чувствительные к данному вирусу рецепторы у эритроцитов уже разрушены, но могут быть агглютинированы другими вирусами, к которым сохранились рецепторы. РГА - ведущий метод индикации гемагглютинирующих вирусов, репродуцированных (накопленных) в экстраэмбриональной жидкости (иногда и в тканях) развивающихся эмбрионов кур или в культуральной жидкости различных культур клеток. Вирусный гемагглютинин выявляется в РГА с 1-5% суспензией эритроцитов кур. Первоначально ставят ориентировочную РГА на стекле или в чашках Петри с 1-5% взвесью эритроцитов на физиологическом растворе. На хорошо промытую и обезжиренную поверхность стекла наносят каплю вируссодержащего материала и каплю взвеси эритроцитов, перемешивают. Положительная РГА появляется в течение 3-5 минут и характеризуется образованием хлопьев агглютинированных эритроцитов. Рис.1. РГА на стекле. [стр. 1 ⇒]

Развернутую РГА (как и РЗГА) раньше ставили в пробирках Флоринского с использованием аппарата Флоринского. В настоящее время применяют плексигласовые планшеты (макрометод) или планшеты для биохимических исследований (объем лунки 0,22 мл с внесением всех компонентов в объеме 0,05 мл каждый). Внесение компонентов реакции прежде и кое-где сейчас проводили с помощью аппарата Флоринского, но в настоящее время обычно используют микродозаторы (микропипетки), в том числе автоматические. Результаты положительной РГА в предварительном опыте подтверждают путем постановки развернутой (классической) реакции. При этом в каждую лунку планшета вносят по 0,2 мл стерильного физиологического раствора, после чего в первую лунку вносят 0,2 мл испытуемой экстраэмбриональной или культуральной жидкости, перемешивают с помощью пипетки. Переносят 0,2 мл жидкости в следующую пробирку или лунку и т.д. до конца данного ряда лунок планшета. Таким образом, готовят последовательные двукратные разведения испытуемого материала от 1:2 до 1:4096 и более. Из последней лунки планшета 0,2 мл материала удаляют в дезраствор. Затем в каждую лунку с разведениями сыворотки добавляют по 0,2 мл 1% суспензии эритроцитов, планшет встряхивают для равномерного перемешивания компонентов и оставляют при температуре 22-24оС. Реакцию сопровождают контролем эритроцитов на самоагглютинацию. Для этого к 0,2 мл физраствора добавляют 0,2 мл 1% взвеси эритроцитов (чаще используют 4 лунки планшета), перемешивают и оставляют при указанной температуре. Агглютинации эритроцитов в данном случае быть не должно. Оценивают результаты РГА в среднем через 30 минут по бальной системе в крестах: - Четыре креста (++++) - агглютинированные эритроциты оседают на дно лунки в виде перевернутого зонтика с неровными зубчатыми краями. - Три креста (+++) - зонтик агглютинированных эритроцитов меньше и в его центре находится диск неагглютинированных эритроцитов. [стр. 1 ⇒]

За гемагглютинирующий титр вируса или одну гемагглютинирующую единицу (1 ГАЕ) принимают наибольшее разведение вируса, при котором наблюдается агглютинация эритроцитов не менее чем на два креста. Например: четко выраженная гемагглютинация получена в разведении 1:512, т.е. 0,2 мл выделенного вируса в разведении 1:512 содержат 1 ГАЕ. РЗГА (Реакция задержки (торможения) гемагглютинации) РЗГА чаще применяется для ретроспективной серологической диагностики, определения напряженности постинфекционного и поствакцинального иммунитета посредством количественного определения специфических антител в сыворотке крови цыплят и взрослых птиц. РЗГА также является серологическим методом идентификации вновь выделенных штаммов вирусов, обладающих гемагглютинирующей активностью и определения их антигенного родства с эталонными штаммами. Методика постановки РЗГА для серологической диагностики заболевания и с целью идентификации выделенного вируса отличаются незначительно. При проведении диагностических исследований, направленных на выявление специфических антител, используют стандартный инактивированный антиген какого-либо вируса. Для идентификации возбудителя используется заведомо положительная сыворотка, содержащая антигемагглютинины к искомому вирусу в известном титре. Сущность РЗГА состоит в том, что если к вирусу обладающими гемагглютинирующими свойствами, добавить сыворотку, содержащую специфические антитела и смесь выдержать на контакте 30-60 минут, а затем внести взвесь эритроцитов, гемагглютинация не наступит, поскольку гемагглютинирующая активность вируса нейтрализуется специфическими антителами. Некоторые жидкости организма (сыворотка крови, молоко, слюна, моча и др.) могут содержать ингибиторы, которые могут тормозить (задерживать) реакцию гемагглютинации. В подобных случаях даже нормальная (отрицательная) сыворотка, т.е. сыворотка от здоровых животных, может дать задержку гемагглютинации, что приведет к ошибочным результатам. Различают термолабильные и термостабильные ингибиторы. Термолабильные ингибиторы присущи бета-фракции глобулина и обладают свойствами бета-глобулина, подавляют гемагглютинацию, нейтрализуют вирус и поэтому являются важным фактором противовирусного иммунитета. Для нейтрализации термолабильных ингибиторов перед постановкой РЗГА все сыворотки крови прогревают в водяной боне при 56-65°С 30 минут. Термостабильные ингибиторы (ингибиторы Френсиса) содержатся в альфа-фракции глобулина, они устойчивы к высоким температурам (даже к кипячению) и действию щелочи. Подавляют гемагглютинацию, но вируснейтрализующими свойствами не обладают. Для нейтрализации термостабильных ингибиторов сыворотки обрабатывают углекислым газом, реже перийодатом калия.или фильтратом культуры вибриона холеры. Реакция задержки гемагглютинации для серологический диагностики ставится в два этапа. На первом этапе проводится титрование стандартного инактивированного антигена вируса по гемагглютинирующей активности в РГА, готовится и контролируется его рабочее разведение. На втором этапе ставится собственно РЗГА. В РЗГА используют рабочее разведение антигена, равное 4 ГАЕ. Для приготовления рабочего разведения антигена проводят титрование стандартного инактивированного антигена вируса в РГА. В результате этого устанавливают активность антигена равную 1 ГАЕ, после чего готовят рабочее разведение, равное 4 ГАЕ. Для этого антиген с известной гемагглютинирующей активностью разводят стерильным физиологическим раствором во столько раз, сколько получают от деления на 4 числа, соответствующего его гемагглютинирующему титру. Так в нашем примере гемагглютинирующий титр антигена (1 ГАЕ), определенный в РГА, равен 1:512. Чтоб получить рабочее разведение антигена, его необходимо разбавить в 128 раз - (512 : 4 = 128). Следовательно, для приготовления рабочего разведения антигена активностью в РГА 1 :512, содержащего 4 ГАЕ в 0,2 мл, нужно взять 1 мл исходного антигена и добавить 127 мл физраствора. Рис.3. РГА. [стр. 2 ⇒]

Вирусы, обладающие гемагглютинирующими свойствами, имеют на поверхности гем агглю т инины , с помощ ью которы х и п роисходит склеивание эритроц и тов. По св оей химической природе гемагглютинины я в л я ю тся глико- или липопротеидами. У слож ны х вирусов они струк турно связаны с ворсинкам и, у простых вирусов — с капсидом. В процессе взаимодействия вирусов с эритроцитами различают стадии адсорбции, агглютинации и элюции. А дсорбция вирусов на эритроцитах начинается как несп еци ф и ческая, а затем переходит в сп ец и ф и ческ ую вследствие сродства гемагглютининов к рецепторам эритроцитов. На одном эритроците адсорбируется множ ество вирусов, они образуют мостики между эритроцитами, изменяется электростатический заряд эритроц и тов и в результате наступает следую щ ая стадия взаимодействия — гемагглютинации, на которой процесс м ож ет остановиться. Н екоторые вирусы способны к элюции — освобож дению с поверхности эритроцитов. Элюция п рои сходи т под действием вирусны х ферментов (например, нейраминидазы) на рецепторы эритроцитов. Элюированные вирусы при этом не п овреж даю тся, эритроциты ж е не способны повторно адсорбировать вирус вследствие разрушения рецепторов. При постановке реакции гемагглютинации (РГА ) стараются использовать именно те эритроциты (птиц, ж и вотных, человека), с которыми гемагглютинирующие свойства данного вируса выявляются лучше; чащ е всего гемагглютинацию ставят с эритроцитами кур. Обычно РГА ставят при комнатной температуре, реже при 4 °С или 37 “С. Н еобходимо такж е учитывать значение pH, электролитный состав среды. Задерживающее действие на РГА могут оказать ингибит оры , содерж ащ иеся в тканях, где размножался вирус, и других биологических субстратах. Для снятия ингибиторного действия вируссодержащ ие материалы прогревают, обрабатывают трипсином, ацетоном и др. [стр. 109 ⇒]

Применение. Реакция гемагглютинации ш ироко применяется в вирусологической практике для обнаружения гемагглютинирующ их вирусов и их титрования. Реакция проста по технике выполнения, дает быстрые и достаточно точные результаты. Наиболее часто РГА применяют при диагностике гриппа и других острых респираторных вирусны х инфекциях. И спользую т ее и для обнаруж ения ряда других вирусов, обладающ их гемагглютинирующ ими свойствами. В научных исследованиях РГА является удобной моделью для изучения механизма взаимодействия вируса и клетки. Обычно реакцию гемагглютинации ставят на плексигласовых досках с углублениями — луночками, реже — в пробирках или на предметных стеклах. Ниже приводится пример выявления вируса гриппа и определения его титра в вируссодержащ ем материале — аллантоисной ж идкости куриного эмбриона, зараж енного в аллантоисную полость смывом из носоглотки больного гриппом. Техника пост ановки Р Г А (табл. 9). На плексигласовой доске готовят двукратные возрастающие разведения в объеме 0,5 мл исследуемого вируссодерж ащ его материала, начиная с 1:10 и до 1:1280. В луночки с разведениями добавляют равные объемы 1% взвеси эритроцитов кур (предварительно трехкратно отмытых физиологическим раствором). Д оску осторож но встр яхи ваю т и оставляю т на 3 0 45 мин при комнатной температуре. Учет результатов проводят по трехкрестовой системе в зависимости от внешнего вида осадка эритроцитов. При гемагглютинации на « + + » осадок имеет форму зонтика и занимает все дно лунки. При отсутствии агглютинации эритроциты оседают в центре лунки в виде к ом пактного диска. Тит ром вируса называется то наибольшее его разведение, при котором еще наблюдается выраженная гемагглютинация (« + + + » или « + + » ). В нашем примере титр... [стр. 110 ⇒]

При постановке РТГА с сыворотками больных следует пользоваться специальными ингибиторорезистентными вирусными диагностикумами или же освобож дать сы воротки от ингибиторов путем прогревания при температуре 5 6 -6 0 °С, обработки нейраминидазой, трипсином, ацетоном, адсорбции ингибиторов каолином и т.п. Реакцию тормож ения гемагглютинации ставят обычно на досках с лунками по методике, сходной с РГА. Основное отличие состоит в том , что в реакции наряду с вирусом и эритроцитами участвует еще сы воротка, с которой вирус предварительно выдерживают, и уж е потом добавляют эритроциты. Техника пост ановки Р Т Г А (табл. 10) с целью идентификации вируса гриппа рода А . На плексигласовой доске готовят три ряда двукратных возрастающ их разведений (в объеме 0,25 мл) диагностических противогриппозных сывороток A (H 1N 1), A (H 2N 2) и A(H 3N 2) от 1:10 до 1:320 (до титра сы вороток). Во все лунки, кроме контрольной, добавляют по 0,25 мл рабочей дозы вируса (разведение 1:40), в котором содерж ится 4 гемагглютинирующ ие единицы; доза была оттитрована в РГА (табл. 10). После выдерживания реакции в течение 1 часа при комнатной температуре во все лунки добавляют по 0,5 мл 1% взвеси эритроцитов кур. Учет результатов проводят через 3 0 40 минут. В нашем примере тормож ение гем агглю тинации произош ло с сы вороткой A (H 3N 2), следовательно, вы делен ви р ус гр и п п а , п ри н а дл еж ащ и й к п од ти п у A (H 3N 2). РТГА ставят и для определения наличия и титра антител в сыворотке больного. Для этого готовят последовательны е двукратн ы е разведения сы в ор отк и в объеме 0,25 мл и соединяют их с 0,25 мл известного антигена (содержащего 4 гемагглютинирующ ие единицы), чтобы произошла нейтрализация вируса. Затем в пробирки вносят по 0,5 мл взвеси эритроцитов. За титр сы воротки принимают то наибольшее ее разведение, в котором еще наблюдается тормож ение гемагглютинации (1:160). [стр. 113 ⇒]

Занятие № 3 Тем а: Вирусны е инфекции, их особенности. П ротивовирусны й иммунитет. М олекулярно-генетические м етоды исследования. М етоды индикации и идентификации вирусов (продолж ение) — РГА, РТ ГА , реакция нейтрализации in vivo на уровне клетки План занятия 1. П ротивовирусный иммунитет; неспецифические и специфические факторы защ иты, механизмы их противовирусного действия. 2. Реакция гемагглютинации вирусов (РГА ), ее су щ ность и значение для индикации вируса и определение его титра (демонстрация). 3. Идентификация вируса в реакции тормож ения гемагглютинации (РТГА) — демонстрация. 4. Реакция нейтрализации вирусов на мышах и развиваю щ ихся курины х эмбрионах (студенты изучаю т самостоятельно). 5. Молекулярно-генетические методы исследования в диагностике вирусных инфекций: молекулярная гибридизация и полим еразная цепная реакция (П Ц Р), сущ ность, принципы постановки. 6. Разобрать и перенести в альбом схемы молекулярной гибридизации и ПЦР. [стр. 129 ⇒]

При постановке реакции гемагглютинации (РГА) стараются использовать именно те эритроциты (птиц, животных, человека), с которыми гемагглютинирующие свойства данного вируса выявляются лучше; чаще всего гемагглютинацию ставят с эритроцитами кур. Обычно РГА ставят при комнатной температуре, реже при 4° или 37°С. Необходимо также учитывать значение рН, электролитный состав среды. Задерживающее действие на РГА Moiyr оказать ингибиторы, содержащиеся в тканях, где размножался вирус, и других биологических субстратах. Для снятия ингибиторного действия вируссодержащие материалы прогревают, обрабатывают трипсином, ацетоном и др. Применение. Реакция гемагглютинации широко применяется в вирусологической практике для обнаружения гемагглютинирующих вирусов и их титрования. Реакция проста по технике выполнения, дает быстрые и достаточно точные результаты. Наиболее часто РГА применяют при диагностике гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций. Используют ее и для обнаружения ряда других вирусов, обладающих гемагглютинирующими свойствами. В научных исследованиях РГА является удобной моделью для изучения механизма взаимодействия вируса и клетки. Обычно реакцию гемагглютинации ставят на плексигласовых досках с углублениями - ;гуночками, реже - в пробирках или на предметных стеклах. Ниже приводится пример выявления вируса гриппа и определения его титра в вируссодержащем материале аллантоисной жидкости куриного эмбриона, зараженного в аллантоисную полость смывом из носоглотки больного гриппом. Техника постановки РГА (табл. 7). На плексигласовой доске готовят двукратные возрастающие разведение в объеме 0,5 мл исследуемого вируссодержащего материала, начиная с 1:10 и до 1:1280. В луночки с разведениями добавляют равные объемы 1% взвеси эритроцитов кур (предварительно трехкратно отмытых физиологическим раствором). Доску осторожно встряхивают и оставляют на 30-45 мин при комнатной температуре. Учет результатов проводят по трехкрестовой системе в зависимости от внешнего вида осадка... [стр. 56 ⇒]

Таким образом, вируснейтрализующая сыворотка оказыает тормозящее действие на реакцию гемагглютинации, и по отсутствию или наступлению РГА можно судить о том, произошла ли реакция нейтрализации между вирусом и сывороткой. Эта реакция получила название реакции торможения гемагглютинации (РТГА), она обладает иммунологической .специфичностью и может быть использована: а) для окончательной идентификации неизвестного гемагглютинирующего вируса - по специфической диагностической сыворотке; б) для выявления титра неизвестных антител в сыворотке больного - по известным вирусным антигенам-диагностикумам. Ингибиторы, Затрудняет применение РТГА наличие в сыворотках крови человека и животных неспецифических вирусных ингибиторов, которые могут вызвать неспецифическое торможение гемагглютинации. Чтобы избежать искажения результатов РТГА, выпускают противовирусные диагностические сыворотки, освобожденые от ингибиторов. При постановке РТГА с сыворотками больных следует пользоваться специальными ингибиторорезистентными вирусными диагностикумами или же освобождать сыворотки от ингибиторов путем прогревания при температуре 56-60°С, обработки нейраминидазой, трипсином, ацетоном, адсорбции шггибиторов каолином и т.п. Реакцию торможения гемагглютинации ставят обычно на досках с лунками по методике, сходной с РГА. Основное отличие состоит в том, что в реакция наряду с вирусом и эритроцитами участвует еще сыворотка, с которой вирус предварительно выдерживают, и уже потом добавляют эритроциты. Техника постановки РТГА (табл.8) с целью идентификации вируса гриппа рода А. На плексигласовой доске готовят три ряда двукратных возрастающих разведений (в объеме 0,25 мл) диагностических противогриппозных сывороток A(H1N1), A(H2N2) и A(H3N2) от 1:10 до 1:320 (до титра сывороток). Во все лунки, кроме контрольной, добавляют по 0,25 мл рабочей дозы вируса (разведение 1:40), в котором содержится 4 гемагглютинирующие единицы; доза была оттитрована в РГА 63... [стр. 58 ⇒]

Реакция гемагглютинации вирусов (РГА), ее сущность и значение для индикации вируса и определения его титра; демоне трация РГА. 2. Идентификация вируса в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) - демонстрация. 3. Реакция нейтрализации действия вирусов на мышах и куриных эмбрионах (студенты изучают самостоятельно). 4. Молекулярно-генетические методы исследования в диагностике вирусных инфекций - сущность, принципы постановки: а) молекулярной гибридизации; б) полимеразной цепной реакции (ПЦР) 5. Разобрать и перенести в альбом схему ПЦР (стр. 74). 6. Контрольная работа по "Общей вирусологии" (См. контрольные вопросы к занятиям №№ 1, 2, 3) Контрольные вопросы по теме занятия № 3 Противовирусный иммунитет. Специфические и неспецифические факторы защиты. 1. Назовите звенья противовирусного иммунитета, подчеркните основные. 2. Назовите специфические факторы противирусного иммунитета, объясните их защитную функцию. 3. Какова сущность защитного действия специфических иммуноглобулинов? 4. Назовите цитотоксические клетки, участвующие в защите от вирусной инфекции. 5. Назовите классы иммуноглобулинов, играющих ведущую роль в противовирусном иммунитете, дайте их характеристику. 6. Назовите неспецифические факторы, участвующие в защите организма от вирусной инфекции, объясните механизм их 105... [стр. 100 ⇒]

Смотреть страницы где упоминается термин "РГА": [178] [182] [195] [232] [233] [245] [249] [354] [362] [365] [616] [617] [8] [10] [9] [24] [110] [166] [369] [43] [69] [2] [2] [197] [277] [354] [62] [7] [17] [25] [156] [198] [2] [2] [85] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [13] [2] [79] [14] [7] [1]